黑龍江口岸蜱媒病原的多樣性及其復(fù)合感染調(diào)查.pdf

1、目的：
　　為了研究黑龍江地區(qū)密山、綏芬河、嘉蔭、東寧、虎林、同江、遜克、蘿北、牡丹江、黑河、饒河11口岸蜱類(lèi)分布、攜帶及復(fù)合感染新發(fā)蜱傳病原體的情況。方法：
　　2014年4月到2015年10月，綜合黑龍江口岸森林植被和蜱媒病的生態(tài)學(xué)、生物學(xué)歷史資料，選擇密山、綏芬河、嘉蔭、東寧、虎林、同江、遜克、蘿北、牡丹江、黑河、饒河11口岸作為調(diào)查樣點(diǎn)，利用布旗法采集樣本蜱，經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定后，根據(jù)地區(qū)及種類(lèi)進(jìn)行編號(hào)，單只檢測(cè)。

2、　　蜱獨(dú)立分裝，在管壁上做好編號(hào)，放入無(wú)菌鋼珠，在低溫環(huán)境下利用研磨儀將蜱研磨至粉末狀，4℃保存，按照試劑盒操作步驟提取蜱組織DNA，通過(guò)建立五種新發(fā)蜱傳疾病病原體（伯氏疏螺旋體、斑點(diǎn)熱群立克次體、巴爾通體、巴貝西原蟲(chóng)、嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體）特異性引物，利用PCR或巢式PCR方法對(duì)所有樣本進(jìn)行特異性片段擴(kuò)增，選取 PCR陽(yáng)性片段送測(cè)序公司進(jìn)行測(cè)序，所獲得的序列與網(wǎng)上（NCBI）序列進(jìn)行同源性比較，并做進(jìn)化樹(shù)分析，以確定并分析病原體在媒介蜱中

3、的地理及特征分布。
　　結(jié)果：
　　1、蜱類(lèi)構(gòu)成
　　共采集1306只蜱標(biāo)本，經(jīng)分類(lèi)鑒定分屬于革蜱屬的森林革蜱、硬蜱屬的全溝硬蜱和血蜱屬的嗜群血蜱和日本血蜱。其中森林革蜱Dermacentor silvarum、625只占總數(shù)的47.86％，為優(yōu)勢(shì)種群，全溝硬蜱Ixodes persulcatus332只占25.42%，嗜群血蜱 Haemaphysalis concinna308只占23.58%，日本血蜱Haemaph

4、ysalisjaponica41只占3.14%。
　　2、病原檢測(cè)結(jié)果
　　本研究在所檢測(cè)的1306份樣本中，共檢測(cè)出1例巴貝西原蟲(chóng)陽(yáng)性樣本，528例斑點(diǎn)熱群立克次體陽(yáng)性樣本、11例巴爾通體陽(yáng)性樣本、31例嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體陽(yáng)性樣本、11例萊姆病螺旋體陽(yáng)性樣本，感染率分別為0.8‰、404.3‰、8.4‰、23.7‰和8.4‰。對(duì)5種新發(fā)蜱媒疾病的病原體進(jìn)行檢測(cè)，共發(fā)現(xiàn)8種病原體，分別是嘎氏疏螺旋體Borrelia afzel

5、ii、伽氏疏螺旋體Borrelia garinii、巴貝西原蟲(chóng)Babesia spp.、勞氏立克次體Rickettsia raoultii、新塔拉塞威奇立克次體Candidatus Rickettsia tarasevichiae、黑龍江立克次體Rickettsia heilongjiangensis、巴爾通體 Bartonella spp.、嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體 Anaplasma phagocytophilum。本研究結(jié)果顯示，黑龍江1

6、1個(gè)口岸地區(qū)至少存在兩種萊姆病螺旋體（Borrelia garinii、Borrelia afzelii），三種斑點(diǎn)熱群立克次（Rickettsia raoultii、Candidatus Rickettsia tarasevichiae、Rickettsia heilongjiangensis），也同時(shí)證實(shí)了嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體(Anaplasma phagocytophilum)、巴貝西原蟲(chóng)（Babesia spp.）、巴爾通體（Bar

7、tonella spp.）的存在。
　　3、復(fù)合感染檢測(cè)結(jié)果
　　共檢測(cè)到復(fù)合感染24例，分別為斑點(diǎn)熱群立克次體與萊姆病螺旋體，斑點(diǎn)熱群立克次體與嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體和斑點(diǎn)熱群立克次體與巴爾通體，復(fù)合感染率為18.4‰(24/1306)。
　　結(jié)論：
　　黑龍江口岸媒介蜱類(lèi)攜帶多種新發(fā)蜱媒病原體，并存在一定程度的復(fù)合感染現(xiàn)象，提示黑龍江地區(qū)蜱媒疾病的危險(xiǎn)程度很高，急需加強(qiáng)黑龍江口岸地區(qū)蜱媒傳染病及其復(fù)合感染的監(jiān)測(cè)與防