黃連、萸黃連標準飲片制備技術規(guī)范及其主要成分抗腫瘤活性研究.pdf

1、黃連是我國常用傳統(tǒng)中藥，其藥用部位為毛茛科植物黃連Coptis chinensis Franch.、三角葉黃連Coptis deltoidea C. Y. Cheng et Hsiao或云連Coptis teeta Wall.的干燥根莖，藥材分別稱為“味連”“雅連”和“云連”。味連主產(chǎn)于湖北、重慶等地，產(chǎn)量大、質(zhì)量好，其中湖北恩施利川味連年產(chǎn)量約占全國產(chǎn)量的50％。黃連始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品，收載于歷年版《中國藥典》一部，具有清

2、熱燥濕、瀉火解毒之功效，用于濕熱痞滿，嘔吐吞酸，高熱神昏，心火亢盛，心煩不寐，心悸不寧，癰腫疔瘡等病癥。黃連炮制時因加輔料不同有黃連、酒黃連、姜黃連和萸黃連4種飲片之分，并具有不同的其功效作用，但4種飲片標準主要借用黃連藥材標準，缺乏飲片專屬性質(zhì)量標準，導致其飲片質(zhì)量難以控制、嚴重影響了臨床療效和用藥安全。另一方面，由于中藥飲片成分和炮制機制的復雜性，當前采用化學對照品、對照藥材等標準物質(zhì)的質(zhì)量評價方法無法反映中藥飲片的科學內(nèi)涵和特征屬

3、性，特別是對于熟飲片。中藥標準飲片是用來評價飲片質(zhì)量最合適的“標準物質(zhì)”，具有專屬性強、經(jīng)濟、獲取方便、應用廣泛等優(yōu)點。因此，開展中藥標準飲片作為中藥飲片質(zhì)量評價標準體系中標準物質(zhì)的基礎研究具有非常重要的科學意義和實用價值。本學位論文通過對黃連和萸黃連標準飲片的制備工藝，質(zhì)量標準，指紋圖譜進行系統(tǒng)研究，并對其主要有效成分抗腫瘤生物活性進行了初步研究，以期規(guī)范黃連和萸黃連標準飲片的制備工藝，完善其質(zhì)量控制標準和闡釋其藥效物質(zhì)基礎，為黃連、

4、萸黃連標準飲片的生產(chǎn)及其應用提供科學依據(jù)。
　　1.黃連、萸黃連原形飲片制備工藝研究
　　通過對黃連文獻調(diào)研和實地調(diào)研，選擇味連為制備黃連及萸黃連標準飲片的原料，確定了味連道地產(chǎn)區(qū)，考察了味連產(chǎn)地加工方法，制定了原料藥材的采集加工技術規(guī)范；在黃連和萸黃連飲片的傳統(tǒng)制備工藝基礎上，對其凈制、軟化、切制、干燥、篩選等工藝程序進行了規(guī)范，確定了技術參數(shù)，進行了批量制備，為制備黃連和萸黃連標準飲片提供了原料飲片。
　　2.黃連

5、、萸黃連標準飲片的均勻化技術規(guī)范研究
　　采用高效液相色譜法等現(xiàn)代分析方法對不同粉碎方式及粒度的黃連、萸黃連質(zhì)量進行綜合分析，確定了其均勻化方法；采用薄層色譜法、高效液相色譜法等現(xiàn)代分析方法開展了環(huán)境因素對黃連、萸黃連標準飲片質(zhì)量的影響研究，為標準飲片的粒度選擇提供科學依據(jù)。
　　3.黃連，萸黃連標準飲片質(zhì)量標準研究
　　參照2015年版《中國藥典》一部收載黃連的質(zhì)量標準，對黃連和萸黃連標準飲片的性狀、薄層鑒別、檢查（

6、水分、總灰分）、浸出物、含量檢測等項進行了研究，分別制訂較完善的質(zhì)量標準，能有效控制黃連，萸黃連標準飲片的質(zhì)量。
　　4.黃連、萸黃連標準飲片指紋圖譜研究
　　參照國家食品藥品監(jiān)督管理總局頒布的“中藥注射劑指紋圖譜”相關技術要求，分別制定黃連和萸黃連標準飲片的指紋圖譜。黃連的指紋圖譜標示15個共有峰，萸黃連的指紋圖譜標示了18個共有峰，能有效評價黃連、萸黃連的質(zhì)量。
　　5.擬定黃連、萸黃連標準飲片制備技術規(guī)范及質(zhì)量標

7、準草案
　　參照相關中藥飲片制備工藝和質(zhì)量標準的研究資料，對黃連和萸黃連標準飲片的制備工藝和質(zhì)量標準的研究結果進行了總結。規(guī)范了黃連和萸黃連標準飲片的制備工藝、擬定了質(zhì)量標準草案，從而為兩種標準飲片的生產(chǎn)及推廣應用奠定了良好基礎。
　　6.萸黃連中主要成分抗腫瘤活性篩選研究
　　采用現(xiàn)代分子生物學研究方法，對萸黃連主要有效成分小檗堿和吳茱萸堿進行了抗腫瘤生物活性研究，表明兩者均具有抑制腫瘤細胞增殖作用，且小檗堿對Hep