Waardenburg綜合征的基因突變研究及中醫(yī)病因病機(jī)探析.pdf

1、目的：由于如今生活節(jié)奏的加快，人們的精神壓力不斷增加，越來越多的人被耳聾這個(gè)疾病所困擾。許多后天患病的耳聾人群通過一定的藥物、理療等治療可獲得改善，然而對于那些先天性耳聾患兒，目前則尚無有效的治療手段。因此，對于這些先天性耳聾疾病的遺傳學(xué)研究成為了目前的研究熱點(diǎn)。Waardenburg綜合征(Waardenburg syndrome，WS)作為此類疾病中不容忽視的一種，越來越多的學(xué)者們投入到了對其研究中，以期從分子水平全面認(rèn)識(shí)該疾病的發(fā)

2、生發(fā)展，從而尋求更有效的方法治療該疾病。本課題組通過對收集到的2個(gè)WS家系及10例散發(fā)WS患者進(jìn)行臨床分型（初步判斷符合WS1和WS2兩型），確定與WS1和WS2發(fā)生有關(guān)的四個(gè)基因（PAX3、MITF、SOX10、SNAI2）進(jìn)行突變檢測,以期了解WS的表型與基因型之間的關(guān)系，并從中醫(yī)角度對WS的病因病機(jī)進(jìn)行初步探析。
　　方法：利用本課題組前期在湖北各地部分特殊教育學(xué)校和聾兒康復(fù)中心采集的耳聾家系樣本及臨床資料，根據(jù)Waarde

3、nburg綜合征診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行篩選，收集了2個(gè)WS家系及10例散發(fā)WS患者。詳細(xì)詢問病史，根據(jù)其臨床資料進(jìn)行初步分型。應(yīng)用cyrillic2.1繪圖軟件繪制該家系遺傳學(xué)圖譜，簽署知情同意書，獲取外周靜脈血樣標(biāo)本。通過聚合酶鏈反應(yīng)（PCR)擴(kuò)增PAX3、MITF、SOX10、SNAI2候選突變基因編碼區(qū)的全部外顯子及相鄰內(nèi)含子。對擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物在ABI自動(dòng)測序儀上進(jìn)行雙向測序，利用GeneTool軟件及分子生物學(xué)網(wǎng)站的信息分析數(shù)據(jù)。

4、>　　結(jié)果：①按照Waardenburg綜合征的診斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合2個(gè)家系患者（編號(hào)家系1、家系2）及10例散發(fā)患者（編號(hào)分別為HuB-21、HuB-34、HuB-66、HuB-107、HuB-357、HuB-397、HuB-421、HuB-433、HuB-448、SY-2）的臨床資料分析：HuB-433符合 WS1，其余家系及散發(fā)病例初步符合 WS2；②通過對候選基因的檢測,家系2和HuB-433均檢測到PAX3基因突變，其中家系2的先證

5、者及其母親均攜帶c.92C>G(p.T31S）的雜合突變，HuB-433發(fā)現(xiàn)c.220C>T(p.R74C）的突變。家系1和HuB-448均檢測到MITF基因突變，其中家系1的先證者及其母親均發(fā)現(xiàn)c.1162-1G>A的突變，HuB-448發(fā)現(xiàn)c.859G>T（p.E287X）的突變。HuB-397檢測到SOX10的2號(hào)外顯子基因突變：c.331T>C(p.F111L）。檢索國內(nèi)外文獻(xiàn)，PAX3基因 c.92C>G突變已有報(bào)道，c.11

6、62-1G>A、c.220C>T、c.859G>T及 c.331T>C均不曾有案例報(bào)道，為新突變。③除HuB-433、HuB-397、HuB-448外，其余散發(fā)病例均未檢測到致病基因突變。
　　結(jié)論:①本研究中WS2是WS中最常見的一種，絕大多數(shù) WS2患者均伴有先天性感音神經(jīng)性耳聾，這與以往的文獻(xiàn)報(bào)道相符；②這些基因突變位點(diǎn)的確定，為這些家系產(chǎn)前診斷提供了重要的依據(jù);③部分WS2患者未檢測到致病基因突變，提示可能存在新的致病基因