鯉鯽雜交和鯉魚雌核發(fā)育子代的同工酶及DNA的遺傳分析.pdf

1、本研究進行了四個組合的鯉鯽雜交試驗,應用同工酶檢測技術對子代進行分析,推測了分別以鯉魚和鯽魚為母本、烏龍鯽二倍體和四倍體為父本產(chǎn)生三倍體的原因;應用遠緣雜交誘導鯉魚雌核發(fā)育以及用紫外線滅活精子使鯉魚卵受精、人工誘導雌核發(fā)育,應用微衛(wèi)星DNA和RAPD分子標記鑒定雌核發(fā)育是否成功,并判斷所誘導的雌核發(fā)育屬于阻止第二極體排出型還是阻止第一次卵裂型雌核發(fā)育二倍體。1、利用水平式淀粉凝膠電泳法對烏克蘭鱗鯉(♀)×烏龍鯽四倍體(♂)、紅鯽(♀)×

2、烏龍鯽四倍體(♂)、紅鯽(♀)×烏龍鯽二倍體(♂)和白鯽(♀)×墨龍鯉(♂)四組鯉鯽雜交子代的背側肌肉組織的天冬氨酸轉氨酶(AAT)、α-甘油醛磷酸脫氫酶(a-GPD)、葡萄糖磷酸異構酶(GPI)、異檸檬酸脫氫酶(IDH)、乳酸脫氫酶(LDH)、蘋果酸脫氫酶(MDH)、磷酸葡萄糖變位酶(PGM)和肌漿蛋白(PROT)進行了電泳分析,并測量了紅細胞長徑。紅細胞測量結果表明烏克蘭鱗鯉(♀)×烏龍鯽四倍體(♂)、紅鯽(♀)×烏龍鯽四倍體(♂)

3、、紅鯽(♀)×烏龍鯽二倍體(♂)雜交子代為三倍體,白鯽(♀)×墨龍鯉(♂)雜交子代為二倍體。四組雜交子代GPI同工酶的基因組成結果表明,父本烏龍鯽四倍體和父本烏龍鯽二倍體都產(chǎn)生二倍體配子,且二倍體配子中一套為鯉染色體組,一套為鯽染色體組。2、應用大口胭脂魚雄魚精子為遠緣精子誘導了六個雌性鯉魚(分別為禾花烏鯉雌核發(fā)育Fl(禾花烏鯉(♀)×大口胭脂魚(♂)、烏克蘭鱗鯉雌核發(fā)育F1代(烏克蘭鱗鯉(♀)×大口胭脂魚(♂)、貝爾湖鯉、松浦鯉、禾花

4、烏鯉和烏克蘭鱗鯉)的雌核發(fā)育,應用紫外線照射后遺傳失活的精子誘導一組津新鯉雌核發(fā)育。其中禾花烏鯉雌核發(fā)育F1(♀)×大口胭脂魚(♂)組、烏克蘭鱗鯉雌核發(fā)育F1代(♀)×大口胭脂魚4(♂)組、貝爾湖鯉(♀)×大口胭脂魚(♂)組及津新鯉雌核發(fā)育組均獲得了正常二倍體子代。利用8對微衛(wèi)星引物,對三個鯉魚為母本的遠緣雜交雌核發(fā)育組和津新鯉雌核發(fā)育組的正常二倍體子代及親本進行分析,并計算重組率。檢測結果表明,四組雌核發(fā)育子代的基因均來自母本,均為母

5、本的雌核發(fā)育類型;且四個雌核發(fā)育組合的幼苗部分個體都存在雜合,表明基因座位與著絲粒間有交叉交換現(xiàn)象。津新鯉雌核發(fā)育組(分析了48個個體)的8個基因座位上,MFW19座位上的重組率最低,重組率為1.20％,HLJ1118座位的重組率最高,重組率為85.70%。由此可以認為MFW19座位與著絲粒的距離最近,HLJ1118座位與著絲粒的距離最遠。微衛(wèi)星DNA分析結果表明兩種方法誘導的雌核發(fā)育均屬于阻止第二極體排出型雌核發(fā)育二倍體。利用20個隨