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1、DREB類轉(zhuǎn)錄因子和RD22類蛋白在植物應(yīng)答和抵抗多種非生物逆境中起重要作用。本論文首次從強(qiáng)抗逆植物蒙古沙冬青中克隆到 AmDREB2基因,并對(duì)該基因和實(shí)驗(yàn)室在前期從蒙古沙冬青克隆的另一個(gè)基因 AmRD22進(jìn)行了表達(dá)分析,然后將它們分別轉(zhuǎn)入擬南芥,通過(guò)轉(zhuǎn)基因擬南芥對(duì)其抗逆功能進(jìn)行了鑒定,主要研究結(jié)果如下:
?。?)用PCR方法擴(kuò)增到 AmDREB2的編碼區(qū) cDNA,推測(cè)其編碼蛋白由175個(gè)氨基酸殘基組成,分子量為19.96 K
2、Da,等電點(diǎn)為7.26,屬于DREB2型轉(zhuǎn)錄因子,可能為親水性蛋白,定位在細(xì)胞核。
(2)AmDREB2的表達(dá)受高鹽、干旱和低溫脅迫的顯著誘導(dǎo),尤其在干旱和鹽脅迫下其表達(dá)量持續(xù)上調(diào)。
(3)成功將AmDREB2編碼區(qū)cDNA片段連接到植物表達(dá)載體pCAMBIA3301的rd29A啟動(dòng)子之后,通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化擬南芥,經(jīng)鑒定和繁殖獲得 T3代純合株系。
?。?)通過(guò)對(duì) T3代純合株系在干旱、低溫、高鹽和外源
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