擬南芥葉綠體定位的mTERF9的功能研究.pdf

1、葉綠體基因表達對植物光合作用及發(fā)育至關重要，但是我們對其調控機制卻知之甚少。在動物中，線粒體轉錄終止因子(mTERF)家族成員在線粒體基因的表達過程中發(fā)揮著重要作用，然而目前對光合生物中mTERFs的功能研究較少，其功能機制尚不明確。在本研究中，我們選取擬南芥mTERF成員mTERF9作為研究對象，對其功能進行研究。首先，我們獲得了該基因T-DNA插入的純合突變體mterf9，其生長緩慢且具有明顯的黃化表型。構建mTERF9融合4×MY

2、C標簽的轉基因互補植株，并以此為材料，分離其葉綠體，基質，類囊體，利用特異的MYC抗體對其進行亞細胞精細定位，檢測結果顯示其主要定位在葉綠體基質中。對突變體mterf9的光系統(tǒng)相關蛋白的積累水平進行檢測，檢測結果顯示Psad、Psba、Rbcs、RbcL蛋白積累水平顯著下降。對mterf9的葉綠體相關基因表達活性進行檢測，qRT-PCR顯示其PEP相關基因表達下調，NEP相關基因表達上調。利用Northern blot實驗進行進一步驗證

3、，結果表明在mterf9突變體中，psbA、rbcL、accD的表達沒有明顯變化，但多順反子petD的轉錄本模式變化明顯，含內含子的petD轉錄本增加。該結果顯示mTERF9可能參與擬南芥葉綠體基因內含子的剪接。我們進一步對mterf9的葉綠體RNA編輯位點進行檢測，結果顯示與野生型相比atpF、clpP、ndhB-2、ndhB-3、ndhB-6、ndhB-7編輯位點的編輯效率下降明顯。RNA免疫共沉淀(RIP)實驗表明mTERF9蛋白