Integrin激活c-Src的結(jié)構(gòu)生物學研究.pdf

1、c-Src基因是發(fā)現(xiàn)的第一個原癌基因。c-Src蛋白參與細胞內(nèi)很多重要的信號通路,如細胞增殖,細胞分化,細胞凋亡,細胞粘附和細胞迀移。c-Src的功能異?；虍惓；罨瘯е鹿怯不Y、血栓、癌癥。因此,c-Src成為一個十分重要的藥物靶點,很多c-Src的抑制劑已經(jīng)應用在前臨床或臨床實驗中。整合素P3亞單位和c-S rc的活化相關(guān)聯(lián)。P3的胞內(nèi)段的末端三個氨基酸RGT與c-Src的SH3直接結(jié)合,激活c-Src以及下游信號通路傳導。蛋白結(jié)構(gòu)

2、是蛋白功能的基礎。P3和c-Src之間的相互作用,與它們的結(jié)構(gòu)是分不開的。雖然P3、c-S r c的晶體結(jié)構(gòu)已有報道,然而,由于P3和c-Src之間相互作用的結(jié)構(gòu)信息的缺失,P3如何通過RGT:SH3之間的相互作用來激活c-Src的機制,仍然是需要回答的問題。
　　本文從RGT:SH3復合物的晶體結(jié)構(gòu)研究開始入手,利用X衍射晶體學的方法,成功解析了復合物的晶體結(jié)構(gòu)。從晶體結(jié)構(gòu)中,找到了RGT與SH3的結(jié)合方式和結(jié)合位點。RGT與S

3、H3的結(jié)合是以一種非經(jīng)典的多肽和SH3結(jié)合的方式。結(jié)合位點處于SH3的“N”-Src loop上,正好位于SH3、linker、catalytic domain所結(jié)合的“拉鏈”的開口處。我們推測,RGT與SH3的結(jié)合打破了原有三者之間作用力的平衡,啟動了c-Src活化的第一步。在晶體結(jié)構(gòu)所提供的信息的基礎上,我們在體外蛋白相互作用的實驗、酶活性實驗和體內(nèi)細胞伸展實驗上進行了晶體結(jié)構(gòu)模型的驗證。這些實驗結(jié)果與解析的晶體結(jié)構(gòu)所顯示信息一致。