N-糖鏈新受體的開(kāi)發(fā)及其應(yīng)用.pdf

1、近年，因N-連接糖鏈對(duì)細(xì)胞癌癥的發(fā)生和轉(zhuǎn)移、以及造血功能有密切關(guān)系，因而，其結(jié)構(gòu)與生物功能之間關(guān)系研究倍受人們的關(guān)注。為了這些研究能夠順利進(jìn)行，不僅需要研制開(kāi)發(fā)相關(guān)糖類分析儀器，而且更急需開(kāi)發(fā)糖鏈相關(guān)試劑和新的簡(jiǎn)便、高靈敏、高選擇性的N-連接糖鏈分析方法。
　　從冷凍的毛霉菌中提取出來(lái)的內(nèi)-β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶M（Endo-M酶）具有切斷N-連接糖鏈五糖核心最內(nèi)側(cè)的兩個(gè)N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc-GlcNAc）之間的糖苷

2、鍵，將其中一個(gè)GlcNAc留在多肽鏈上，并把釋放出來(lái)的糖鏈轉(zhuǎn)移到另外一個(gè)含有GlcNAc殘基的受體上的特性。根據(jù)Endo-M的這些特性，設(shè)計(jì)合成了既含有GlcNAc又含有電活性基團(tuán)的受體，優(yōu)化了各受體的合成以及純化方法，初步探討了在糖鏈轉(zhuǎn)移酶Endo-M作用下各種受體與N-連接糖鏈的轉(zhuǎn)移結(jié)合過(guò)程，由于所合成的受體易離子化或已帶電荷，所以可以提高糖鏈衍生物在質(zhì)譜檢測(cè)器上的靈敏度。我們還進(jìn)行了實(shí)際樣品卵清蛋白的檢測(cè)，用糖鏈酶解霉 E酶切卵清