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1、1中文 中文 2790 字出處: 出處:ARYA S. P, MAHAJAN M, JAIN P. Photometric Methods for the Determination of Vitamin C[J]. Analytical Sciences, 1998, 14(5):889-895.分光光度法測定 分光光度法測定維生素 維生素 C 的含量 的含量摘要: 摘要:維生素 C 的重要性已得到世界人們的廣泛認(rèn)可。這種維生素的不足
2、會導(dǎo)致各種疾病。鑒于其重要性,已有包括分光光度法的多種方法用于測定藥品,食品和生物樣本中的維生素 C 含量。人們普遍認(rèn)為可用分光光度法測定抗壞血酸的含量。關(guān)鍵詞: 關(guān)鍵詞:維生素 C 含量;分光光度法1.引言 .引言對于不同的自然物質(zhì),測定其中維生素 C 含量的方法亦不同。它可作為藥品的一種重要輔料,復(fù)合維生素 B 的穩(wěn)定劑并可作為一種抗氧化劑。鑒于其能產(chǎn)生良好的作用,所以被廣泛用于治療某些疾病,如壞血病、普通感冒、貧血、出血性疾病、傷
3、口愈合甚至不孕,這些功能已有案件證明。人們認(rèn)為維生素 C 對發(fā)育以及肌肉,骨骼,牙齒和皮膚的再生是至關(guān)重要的。因此,越來越多的人使用含有維生素 C 的藥品和其他自然物質(zhì),這意味著實用化學(xué)家應(yīng)制定其含量的分析方法,使操作簡單、快速,結(jié)果準(zhǔn)確,具有靈敏性和選擇性。想發(fā)明一種理想測定方法的這個愿望,導(dǎo)致產(chǎn)生了許多不同的方法,它們有不同的適用條件。許多以儀器為基礎(chǔ)的分析方法,包括高效液相色譜 5 - 10 , 極譜法 11 - 13 和酶 14
4、 -15 方法,已有文獻報道。但由于其固有的限制,這些技術(shù)不常用于常規(guī)分析。然而,分光光度法特別有前景,因為它們速度快和靈敏度高。因此,制訂了許多類似的方法, 用于測定抗壞血酸(AA)的含量。雖然已有一些短期的評論報道,但仍需一個嚴(yán)格的方法來檢查這些方法的突出特點和適用條件。這項審查是試圖專門評估現(xiàn)有的分光方法的簡便性,快速性,比爾定律范圍,靈敏度,選擇性與適用性。這主要是基于從 1970 年到 1997 年期間的化學(xué)文摘所搜集的信息
5、來評估。2.結(jié)果與討論 .結(jié)果與討論 一些染料,如 DCIP,DMDQ、茚三酮,快速紅色美聯(lián)鹽和 2,7-二氯熒光素等已被用來測定維生素 C 的含量,其中 DCIP 被研究得最多。它被列入正式的滴定方法,不同國家的藥典 19 - 21 均有收載,同時也成為了各類比色法的基礎(chǔ)。藍色染料(DCIP)在加入抗壞血酸后褪成無色,如圖 1 所示。但它在酸性溶液中呈粉紅色。使用該染料,可在人尿中和加工過的西紅柿中檢測出抗壞血3酶 33 - 35 比
6、色法測定市場上的維生素 C 片劑、水果和蔬菜中抗壞血酸的含量,在 358 nm 或 320 nm 處測量吸光度。結(jié)果得到的產(chǎn)物是氧化鄰苯二胺/1,4二胺,該物質(zhì)是被抗壞血酸氧化酶或過氧化物酶氧化得到的,在過氧化氫溶液中,pH 值為 5.3 ??箟难岜宦然趸⒂?DHAA 4,5 取代苯二胺 36 縮合,從而生成喹喔啉衍生物,用于吸光度的測量。該中涉及 4 - 硝基- 1 ,2 -苯二胺 37 ( λmax = 375 nm )的方
7、法非常復(fù)雜,工作量太大。因為它涉及許多耗時的步驟,包括用陰離子層析柱純化樣品。不久以前,對藥品、食品和生物樣本中已被氧化和稀釋的維生素 C 含量的測定已引起人們的重視。因為 AA 和 DHAA 氧化還原物是許多生物系統(tǒng)的一個重要組成部分。各類研究員 38 - 45 在不同的實驗室完成了用高效液相色譜法同時測定兩個 AA 和 DHAA。Rose 和 Nahrwold38 確定在 254 nm 和 210 nm 紫外吸收波長處測定 AA 和
8、 DHAA,可用于分析食品、生物樣品和醫(yī)藥制劑。 Graham和 Donald39,使用 62.5 毫米縮聚原磷酸離子交換柱( Aminex - HPX 87H )在波長 254 nm 處對食物樣本進行分析。這兩種方法也被用于測定蔬菜樣品 40 中的含量,即使用紫外檢測器(254 nm)。Tessier 等人已報道一種對微量測定進行驗證的方法,微量測定就是用高效液相色譜熒光法測定血漿中被氧化和被稀釋的維生素 C 的含量,這種微量分析用高
9、效液相色譜熒光法僅需已步就可完成,而且可避免衍生物的干擾??箟难崤c取代苯可生成有色物質(zhì),如 m-二硝基苯在甲醛酒石酸和三硝基苯在酒石酸緩沖溶液中,此時測兩者中抗壞血酸,其濃度范圍分別為 2-50 μg/ml 和 0-125 μg/ml。間苯二酚 48 甲醇溶液在鹽酸酸性介質(zhì)中,與抗壞血酸反應(yīng)呈淡黃色顏色(λmax=425 nm),在 80-400 μg/ml 范圍內(nèi)服從比爾定律。4 -氯- 7-硝基苯并呋喃 49 與抗壞血酸在氫氧化鈉
10、溶液中生成藍綠色物質(zhì)。用 50%(V/V)的水丙酮溶液稀釋反應(yīng)物后在 582 nm 處測量吸光度。在 5-20 μg/ml 濃度范圍服從比爾定律,只有當(dāng)遠離陽光和日光燈直接照射,該有色物質(zhì)才能穩(wěn)定存在 30 分鐘。據(jù)報道:該方法能避免所有其他維生素和存在于多種維生素制劑中的礦物質(zhì)的干擾,并可用于藥物,新鮮果汁和蔬菜的分析。哈什米等人 50 提出了一種以 2,3,5-三苯基氯化物與抗壞血酸在堿性介質(zhì)中的反應(yīng)為基礎(chǔ)的方法。這個粉紅色溶液可允
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