微生物技術分子生物技術中英文資料外文翻譯--ao法活性污泥中氨氧化菌群落的動態(tài)與分布

1、中文 中文 6200 字出處： 出處：Water research, 2011, 45(18): 6207-6216A/O 法活性污泥中氨氧化菌群落的動態(tài)與分布摘要：我們研究了在厭氧—好氧序批式反應器（SBR）中氨氧化菌群落（AOB）和亞硝酸鹽氧化菌群落（NOB）的結構活性和分布。在研究過程中，分子生物技術和微型技術被用于識別和鑒定這些微生物。污泥微粒中的氨氧化菌群落結構大體上與初始的接種污泥中的結構不同。與顆粒形成一起，由于過程條件中

2、生物選擇的壓力，AOB 的多樣性下降了。DGGE 測序表明，亞硝化菌依然存在，這是因為它們能迅速的適應固定以對抗洗滌行為。DGGE 更進一步的分析揭露了較大的微粒對更多的 AOB 種類在反應器中的生存有好處。在 SBR 反應器中有很多大小不一的微粒共存，顆粒的直徑影響這 AOB 和 NOB 的分布。中小微粒（直徑0.9mm）可以使含氧量降低從而限制 NOB 的生長。所有這些研究提供了未來對 AOB 微粒系統(tǒng)機制可能性研究的支持。關鍵詞：

3、氨氧化菌（AOB） ，污泥微粒，菌落發(fā)展，微粒大小，硝化菌分布，發(fā)育多樣性1. 簡介在濃度足夠高的條件下，氨在水環(huán)境中對水生生物有毒，并且對富營養(yǎng)化有貢獻。因此，廢水中氨的生物降解和去除是廢水處理工程的基本功能。硝化反應，將氨通過硝化轉化為硝酸鹽，是去除氨的一個重要途徑。這是分兩步組成的，由氨氧化和亞硝酸鹽氧化細菌完成。好氧氨氧化一般是第一步，硝化反應的限制步驟：然而，這是廢水中氨去除的本質。對 16S rRNA 的對比分析顯示，大多

4、數活性污泥里的氨氧化菌系統(tǒng)的跟 ß-變形菌有關聯(lián)。然而，一系列的研究表明，在氨氧化菌的不同代和不同系有生理和生態(tài)區(qū)別，而且環(huán)境因素例如處理常量，溶解氧，鹽度，pH，自由氨例子濃度會影響氨氧化菌的種類。因此，廢水處理中氨氧化菌的生理活動和平衡對廢水處理系統(tǒng)的設計和運行是至分析方法-TOC、TN、TP、MLSS、SVI 都根據標準方法定期檢測。污泥大小分布由篩法決定。4 個干凈的直徑為 5cm 鋼制篩，篩孔直徑分別0.9,0.6,

5、0.45,和 0.2mm，這 4 個篩子被全程監(jiān)控。用友刻度的圓柱從反應器中取100mL 的污泥，然后放到 0.9mm 篩孔的篩子上。隨后用蒸餾水沖洗，直徑小于0.9mm 的顆粒通過這個篩子，到達篩孔更小的篩子上。沖洗過程要重復幾次，以分開污泥團。不同面上收集到的顆?；謴陀谜麴s水反沖洗。每一部分都手機在不同的燒杯里，然后用量化的濾紙過濾來測定 TSS。一旦留在各個篩子上 TSS的數量確定了，就可以確定不同大小的顆粒占污泥總重的比例了。2

6、.2 DNA 提取和 PCR-DGGE來自大約 8mg 的 MLSS 種的污泥被轉化成 1.5mL 的 Eppendorf 管，然后在14000g 條件下離心 10 分鐘。移除上清液，向其中加入 1mL 磷酸鈉緩沖液，然后在無菌條件下研磨以分離顆粒。使用 E.Z.N.A.Soil DNA 工具，離心物種 DNA 染色體被分離。為了放大氨氧化菌特征 16s rRNA 來進行 DGGE，一個巢式 PCR 被用為先前描述。30µl

7、的巢式 PCR 放大劑被加載并被在聚丙烯酰胺凝膠上的加了線性分布為 35%-55%的變性劑 DGGE 分開。這個膠體在維持 60 度、140V、1×TAE 緩沖液中(通用突變檢測系統(tǒng))運行 6.5h。電泳結束后，銀染色和膠體的發(fā)展表現正如Sanguinetti 所表述。接下來是空氣干燥和用凝膠成像分析系統(tǒng)掃描。凝膠掃描圖像用 Quantity One 分析，版本號 4.31。成對群落相似性的色子指數是計算評估氨氧化菌群落在 D

8、GGE 中線路相似性的。這個用 Quantity One 測出的指數范圍從 0%(無共同頻帶)到 100%(頻帶相同)。Shannon 多樣性指數（H）是用來衡量將一個菌群中每個菌種的豐富度和比例加入考慮的微生物多樣性。H 用下列等式計算：其中，ni/N 表示 i 菌種占總群落的比例(i 條帶亮度在條帶總亮度中的比例)。微生物系統(tǒng)樹圖模板相似性使用 Quantity One 不用非加權配對組算術平均數（UPGMA 法）算法就能計算出來。