外文翻譯--使用聚合酶鏈反應(yīng)變性梯度凝膠電泳法測(cè)定不同電子受體條件下的反硝化聚磷菌的特征（譯文）

1、1中文 中文 7630 字 出處： 出處：Water research, 2002, 36(2): 403-412附錄一使用聚合酶鏈反應(yīng)變性梯度凝膠電泳法測(cè)定不同 電子受體條件下的反硝化聚磷菌的特征Johwan Ahn, Tomotaka Daidou, Satoshi Tsuneda, Akira Hirata化學(xué)工程學(xué)系,早稻田大學(xué),3-4-1 Ohkubo,東京新宿,東京 169 - 8555,日本2000 年 6 月 15 日接

2、收； 2001 年 1 月 4 日接收修訂版；2001 年 4 月 17 正式收錄摘要 摘要為了調(diào)查反硝化聚磷菌（DNPAOs）的特點(diǎn)以及微生物多樣性，能夠使用硝酸鹽作為電子受體進(jìn)行強(qiáng)化生物除磷（EBPR） ，三序批式反應(yīng)器都工作在三個(gè)不同的電子受體條件，即只有氧氣，氧氣和硝酸鹽以及只有硝酸鹽。根據(jù)關(guān)于每個(gè)反應(yīng)器中的生物化學(xué)轉(zhuǎn)化的化學(xué)分析，人們發(fā)現(xiàn)，負(fù)責(zé)強(qiáng)化生物除磷的聚磷微生物包含至少有三個(gè)種群包括 DNPAOs，并根據(jù)微生物群落結(jié)構(gòu)改

3、變電子受體條件。此外，與氧及硝酸鹽培養(yǎng)的污泥在缺氧條件下的磷攝取量呈急劇增加，這表明在有氧條件存在一定比例的 DNPAOs 能夠利用硝酸鹽。另一方面，微生物群落結(jié)構(gòu)依靠不同的電子受體而改變已經(jīng)通過變性梯度凝膠電泳聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增 16S 核糖體 DNA 片段的結(jié)果的分析得到證明。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，包含在所有的反應(yīng)器中的細(xì)菌通常是 Rhodocyclus sp.（96％同源性）和 Dechlorimonas sp.（97％的同源性） ，基于從

4、 DGGE 條帶切下的序列及測(cè)定親緣關(guān)系的分析得出，它們屬于β-Proteobacteria。然而，在所有的反應(yīng)器中只有 Rhodocyclus sp.的存在被熒光原位雜交分析所證明。©2002 愛思唯爾科技有限公司保留所有權(quán)利。3效的分析非可培養(yǎng)環(huán)境的微生物群落結(jié)構(gòu)樣品如 EBPR 工藝中的微生物。 此外, 從 DGGE 凝膠切除的條帶的序列分析提供了一個(gè)基礎(chǔ)的凝膠系統(tǒng)識(shí)別相應(yīng)的細(xì)菌對(duì)應(yīng)的條帶以及 16 s riboso

5、mal RNA (rRNA)的設(shè)計(jì)有針對(duì)性的寡核苷酸探針熒光原位雜交(FISH)分析,即使這些細(xì)菌是非可培養(yǎng)的。本研究的目的是表征不同電子受體栽培條件下的 DNPAOs,在此基礎(chǔ)上, 采用 PCR-DGGE和 FISH 法分析微生物群落結(jié)構(gòu)、親緣關(guān)系的改變和識(shí)別執(zhí)行生物除磷的 DNPAOs。2. 2. 材料和方法 材料和方法2.1 2.1. 反應(yīng)器運(yùn)行 反應(yīng)器運(yùn)行三個(gè)序批式反應(yīng)器（SBRS）各 1.0 L 工作容積，提供了三種不同的

6、電子受體，即，氧氣和硝酸鹽（RAN 反應(yīng)器） ，無硝酸鹽（RAA 的反應(yīng)器） ，僅硝酸鹽（RNN 反應(yīng)器） ，分別運(yùn)行了 30 天獲得負(fù)責(zé)生物除磷的 PAOs。如表 1 所示，RAN 和 RAA 的反應(yīng)器在厭氧/好氧條件下運(yùn)行，而 RNN 反應(yīng)器在厭氧/缺氧條件下運(yùn)行。在運(yùn)行反應(yīng)器之前，從東京一個(gè)市政污水處理廠好氧反應(yīng)池取出的活性污泥是接種過的。在接種之前，這些污泥的缺氧吸磷能力采用硝酸鹽作為電子受體進(jìn)行了評(píng)估。其結(jié)果是，總有機(jī)碳（TO

7、C）被完全吸收并且磷在厭氧條件下釋放，且在隨后的缺氧條件下觀察到，磷吸收利用硝酸鹽作為電子受體。所有的反應(yīng)器運(yùn)行周期為 8 h,包括一個(gè) 20 分鐘填充階段,90 分鐘厭氧階段,315 分鐘有氧或缺氧階段,30 分鐘沉降階段和 25 分鐘退出階段。一個(gè)周期后,0.5 L 的流出量與相同數(shù)量的入流量交換,因此保持 16 h 的水力停留時(shí)間(HRT)。在一個(gè)循環(huán)結(jié)束時(shí)，為維持平均 20 天細(xì)胞停留時(shí)間（MCRT） ，17mL 剩余活性污泥浪