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1、《生理科學(xué)進(jìn)展》《生理科學(xué)進(jìn)展》2003年04期加入收藏獲取最新鎖核酸研究進(jìn)展鎖核酸研究進(jìn)展李生茂徐祥梁華平李磊【摘要】:【摘要】:鎖核酸(lockednucleicacidLNA)是一種新型的寡核酸衍生物結(jié)構(gòu)中βD呋喃核糖的2’O4’C位通過縮水作用形成環(huán)形的氧亞甲基橋、硫亞甲基橋或胺亞甲基橋呋喃糖的結(jié)構(gòu)鎖定在C3’內(nèi)型的N構(gòu)型形成了剛性的縮合結(jié)構(gòu)。LNA作為一種新的反義核酸具有與DNARNA強(qiáng)大的雜交親和力、反義活性、抗核酸酶能力、
2、水溶性好及體內(nèi)無毒性等優(yōu)點(diǎn)。LNA在基因診斷和基因治療上有很多優(yōu)勢(shì)如:單鏈核酸的多態(tài)性基因分型、LNA寡聚體具有高效抑制端粒酶活性及LNA修飾的DNA核酶(LNAzymes)高效清除高級(jí)結(jié)構(gòu)的RNA等有良好的應(yīng)用研究前景【作者單位】【作者單位】:第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所一室第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所一室第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所一室第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所一室【關(guān)鍵詞】【關(guān)鍵詞】:鎖核酸鎖核酸核苷酸衍
3、生物核苷酸衍生物寡聚核苷酸寡聚核苷酸【基金】:【基金】:國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展規(guī)劃項(xiàng)目(G1999054203)國(guó)家自然科學(xué)基金(30170367)全軍“十五”課題基金(2001~2005)資助課題【分類號(hào)】:【分類號(hào)】:R341【正文快照】:【正文快照】:反義核酸藥物是藥學(xué)研究的新領(lǐng)域有希望成為分子水平治療各種疾病如艾滋病、病毒感染、癌癥、炎癥反應(yīng)及心血管疾病、慢性感染性疾病和遺傳性疾病等新的突破口正受到世界范圍內(nèi)的廣泛重視。1978年
4、Zemecnik等首先根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則設(shè)計(jì)反義寡核苷酸用于基因治療的《生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展》《生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展》2003年03期加入收藏獲取最新鎖核酸的特點(diǎn)及其應(yīng)用鎖核酸的特點(diǎn)及其應(yīng)用李生茂徐祥梁華平李磊【摘要】:【摘要】:【作者單位】【作者單位】:第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所一室第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所一室第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所一室第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所一室【關(guān)鍵詞】【關(guān)鍵詞】:鎖核
5、酸鎖核酸第三軍醫(yī)大學(xué)第三軍醫(yī)大學(xué)野戰(zhàn)外科野戰(zhàn)外科亞甲基亞甲基酸衍生物酸衍生物解的穩(wěn)定性解的穩(wěn)定性治療各種疾病治療各種疾病寡核苷酸寡核苷酸熱穩(wěn)定性熱穩(wěn)定性呋喃核糖呋喃核糖【分類號(hào)】:【分類號(hào)】:R341【正文快照】:【正文快照】:中國(guó)期刊資訊網(wǎng)論文庫(kù)醫(yī)學(xué)論文臨床醫(yī)學(xué)論文應(yīng)用鎖核酸探針技術(shù)檢測(cè)腫瘤樣本中Kras基因突變應(yīng)用鎖核酸探針技術(shù)檢測(cè)腫瘤樣本中應(yīng)用鎖核酸探針技術(shù)檢測(cè)腫瘤樣本中KrasKras基因突變基因突變2010060611:13來
6、源:作者:網(wǎng)友評(píng)論0條瀏覽次數(shù)185[摘要]目的應(yīng)用鎖核酸探針技術(shù)檢測(cè)腫瘤樣本中Kras基因突變探討其診斷價(jià)值。方法結(jié)合鎖核酸TaqMan探針與實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)建立Kras基因突變快速檢測(cè)法與傳統(tǒng)聚合酶鏈反應(yīng)單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析法(PCRSSCP)及測(cè)序結(jié)果進(jìn)行比較評(píng)價(jià)新方法的診斷價(jià)值。結(jié)果鎖核酸探針PCR法可對(duì)腫瘤樣本中Kras基因突變進(jìn)行有效檢測(cè)操作簡(jiǎn)便可在104倍的野生型Kras基因背景下檢測(cè)出突變靈敏度為0.1%可檢測(cè)突變基因最
7、低限為10拷貝mL相對(duì)應(yīng)傳統(tǒng)方法本方法可同時(shí)進(jìn)行較大規(guī)模的樣品檢測(cè)更快捷和靈敏。結(jié)論鎖核酸探針實(shí)時(shí)熒光PCR法較PCRSSCP法有明顯優(yōu)勢(shì)適用于大規(guī)模臨床樣本的Kras基因突變檢測(cè)可作為腫瘤篩查和預(yù)后判斷有效手段。[關(guān)鍵詞]鎖核酸Kras熒光PCRPCRSSCP[中圖分類號(hào)]R730.4[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A[文章編號(hào)]16739701(2010)118603近期鎖核酸(lockednucleicacidLNA)作為一種新穎的核苷酸衍生物引起
8、了人們的廣泛關(guān)注。由于LNA和核苷酸在結(jié)構(gòu)上有很大的相似性故其對(duì)DNA、RNA有很好的識(shí)別能力和強(qiáng)大的親和力。與其它寡核酸類似物相比LNA有很多優(yōu)點(diǎn)如和DNA、RNA互補(bǔ)的雙鏈有很強(qiáng)的熱穩(wěn)定性Tm值可升高3~8℃具有抗3脫氧核苷酸酶降解的穩(wěn)定性高效的自動(dòng)寡聚化作用合成方法簡(jiǎn)單等[1]。Kras基因的突變與胃癌、胰腺癌、結(jié)直腸癌密切相關(guān)結(jié)、直腸癌患者Kras點(diǎn)突變率達(dá)40%~50%且點(diǎn)突變幾乎皆位于1213和61密碼子其中大多數(shù)突變點(diǎn)位于
9、12密碼子。本研究即通過LNA探針熒光PCR方法檢測(cè)腫瘤樣本和血漿中Kras基因的突變了解LNA探針檢測(cè)方法的優(yōu)越性。1材料和方法1.1臨床資料收集本院腫瘤組織樣本85例其中胃癌組織樣本25例直腸癌樣本28例結(jié)腸癌樣本22例胰腺癌樣本10例。收集腫瘤血漿樣本97例胃癌血漿樣本30例直腸癌樣本32例結(jié)腸癌樣本25例胰腺癌樣本10例。所有患者均經(jīng)手術(shù)、病理證實(shí)。另取20例正常人樣本為對(duì)照組。1.2方法1.2.1取材腫瘤組織樣本為術(shù)中切取新鮮
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