病原微生物實驗活動危險度評估已修改

1、病原微生物實驗活動 危險度評估,內(nèi)容：,一、病原微生物試驗活動危險度評估的定義二、目的、意義和用途三、病原微生物危害程度評估的原則四、病原微生物危害程度分類五、病原微生物危害程度評估依據(jù) 《人間傳染的病原微生物名錄》 六、病原微生物危害程度評估要考慮的因素七、病原微生物的危害程度評估方法八、我市的病原微生物危害評估情況,一、病原微生物試驗活動危險度評估的定義,危險度評估:是在對某種病原微生物以及對其操作

2、程序或?qū)嶒灮顒拥臐撛谖：M行評估。它應該建立在對病原微生物的生物學特性、傳播的宿主范圍、致病性等已經(jīng)了解的基礎(chǔ)上；對于未知病原微生物，可以在對已知病原體特性的了解基礎(chǔ)上根據(jù)有限的臨床資料、流行病學資料及實驗室數(shù)據(jù)等作出可能性的判斷，根據(jù)可能性采取進一步的評價。危險評估可以借助多種方法進行，其中重要的是專業(yè)評估，應由生物安全管理機構(gòu)、實驗室或項目負責人、各類有關(guān)的專業(yè)人員共同進行。,,生物危害評估工作由誰來做？,生物安全專家委員會,病原學

3、專家免疫學專家檢驗醫(yī)學專家流行病學專家預防獸醫(yī)學專家環(huán)境保護學專家實驗管理學專家,二、目的、意義和用途,1、目的、意義主要目的是在實驗活動中根據(jù)病原微生物可能對個人或個體或?qū)嶒灜h(huán)境造成危害的高低，來制定相應的安全防范制度和操作程序，選擇相應等級的生物安全實驗室及設(shè)備配置，實驗人員采取相應的防護措施和使用相符的安全防護裝備，以及在發(fā)生意外泄漏或意外事故時能及時采取有效的防護措施，來達到確保實驗室工作人員不被污染和實驗環(huán)境不被

4、污染的目的。,二、目的、意義和用途,2、用途（1）通過評估確定生物安全防護水平，根據(jù)評估結(jié)論確定實驗室安全防護等級、個人防護級別及相應的安全措施等。（2）根據(jù)評估結(jié)論制定病原微生物實驗活動的操作、儀器設(shè)備使用及管理規(guī)程和操作程序；制定實驗室和實驗室廢棄物的消毒與處置及意外事故處理、人員培訓、個人防護劑健康監(jiān)測等工作程序。,二、目的、意義和用途,（3）病原微生物危害程度評估工作中收集的許多相關(guān)信息，對于實驗室人員具有非常重要的參考價值

5、，需要學習掌握。（4)通過評估我們能對某種病原微生物在實驗室檢測時在實驗條件、人員、設(shè)備等各方面是否符合生物安全管理要求，該項操作的安全是否能得到保證等問題有比較全面的掌握和了解。（5）通過評估我們能清楚地了解病原微生物的基本生物特性以及它的改良性、傳播途徑、感染途徑、治療措施的現(xiàn)狀。,三、病原微生物危害程度評估的原則,1、堅持結(jié)合實際，科學評估。要根據(jù)各自實驗室人員組成和設(shè)備條件的實際情況進行評估，避免生搬硬套，不加分析隨意引用

6、他人的評估資料，要求有針對性。2、堅持簡明扼要，科學可行原則。要求突出重點，內(nèi)容齊全，避免內(nèi)用繁雜，操作性科學性不強，結(jié)論要明確。3、堅持專業(yè)人員協(xié)助完成的原則。危害程度評估是一項專業(yè)性很強且跨專業(yè)的綜合性工作，需要其他相關(guān)專業(yè)的技術(shù)人員配合協(xié)同承擔完成,四、病原微生物危害程度分類,病原微生物危害程度分類依據(jù)：《病原微生物實驗室生物安全管理條例》 (GH19489-2004)按危害程度將病原微生物分為四類： 第四

7、類危險程度最低 第一類危險程度最高 第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物 WHO《實驗室生物安全手冊》《實驗室生物安全通要要求》危害程度由4級至1級遞減。不同國家有不同的分類方法。,五、病原微生物危害程度評估依據(jù),病原微生物危害程度分類是危害評估的主要依據(jù)。某種病原微生物危害程度高低主要產(chǎn)生的相對危害程度的大小，應取決于它對個體和群體感染后可能造成的危害程度，因此要根據(jù)各自不同實際情況作出科學

8、的恰如其分的評估。,,《人間傳染的病原微生物名錄》2006-1-11,我國對病原微生物除進行危害程度分類外，還規(guī)定了其不同實驗操作的防護水平以及運輸?shù)陌b要求，具體內(nèi)容見衛(wèi)生部頒布的《人間傳染的病原微生物名錄》。該《名錄》已于2006年1月11日下發(fā)執(zhí)行。核心內(nèi)容是對病原微生物的常見實驗操作的生物安全實驗室等級提出明確要求，指導各單位涉及人間傳染的病原微生物的實驗活動。,,《人間傳染的病原微生物名錄》,病毒-160 類細菌、放線菌、

9、衣原體、支原體、立克次體、螺旋體-155 類真菌-59 類朊病毒-6 種,,《人間傳染的病原微生物名錄》,,《人間傳染的病原微生物名錄》,表2. 細菌、放線菌、衣原體、支原體、立克次體、螺旋體分類名錄,病例分享：血培養(yǎng)檢出布魯氏菌,血培養(yǎng)涂片,對比：協(xié)和醫(yī)院血培養(yǎng)布氏涂片,純培養(yǎng)物革蘭染色及相關(guān)試驗結(jié)果,觸酶陽性,氧化酶陽性,動力陰性,血培養(yǎng)四天報陽,尿素酶陽性,柯氏染色陽性,布氏桿菌？,流行病學史？,布氏抗體檢測？,呼吸科病人：周

10、xx 女 65歲 梧州富民人 病歷未提及職業(yè)情況主訴：咳嗽、胸痛一周余 入院查體：發(fā)燒達39°以上、納差、乏力消瘦、肌肉酸痛、頸肩關(guān)節(jié)痛、皮膚黃染、兩肺呼吸音粗實驗室檢查：ALT258 AST366 GGT 201 TBIL79.1 臨床診斷：肺部感染 肝損查因 頸椎病臨床用藥：左氧+呋辛 癥狀有所改善。血培養(yǎng)雙瓶雙側(cè)（四瓶）報陽，涂片鏡下高度

11、懷疑布氏桿菌！電話要求護士幫忙問職業(yè)情況特別留意是否養(yǎng)羊或與是否有羊接觸史。護士回報：“一個月前在家吃過羊肉火鍋、經(jīng)常去菜市場、丈夫5 年前養(yǎng)羊！”,病史摘要,,布病概況,1 布氏桿菌病又稱布病、波狀熱，是人畜共患的傳染病。病原菌為革蘭陰性短小桿菌，按生化和血清學反應分為馬爾他布魯菌（羊型）、流產(chǎn)布魯菌（牛型），豬布魯菌（豬型）！ 2 主要臨床特點為長期發(fā)熱（波狀熱）、多汗、乏力、關(guān)節(jié)痛、肌肉酸痛、睪丸炎、肝脾腫大等，少數(shù)患

12、者可出現(xiàn)各種各樣的充血性皮疹和黃疸；慢性期患者多表現(xiàn)為骨關(guān)節(jié)系統(tǒng)損害 3 流行病學史：發(fā)病前病人與家畜或畜產(chǎn)品（以羊最多見）、布魯氏菌培養(yǎng)物有密切接觸史，或生活在疫區(qū)，或與疫苗生產(chǎn)、使用和研究有密切關(guān)系。,病原菌分離：從病人血液、骨髓、其他體液及排泄物等任一種培養(yǎng)物中分離到布魯氏菌。布魯氏菌病的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸比較復雜，其臨床表現(xiàn)多種多樣，很難以一種癥狀來確定診斷。對人布魯氏菌病的診斷，應是綜合性的。即結(jié)合病人流行病學接觸史，臨

13、床表現(xiàn)和實驗室檢查。傳播途徑：呼吸道、消化道、損傷皮膚、粘膜（眼結(jié)膜）鑒別診斷：主要應與風濕熱、傷寒、副傷寒、肺結(jié)核、風濕性關(guān)節(jié)炎等做出鑒別診斷,布病概況,布氏桿菌具有傳染性，人群普遍易感，對人有極強的致病力，有可能通過人傳人感染，但極少發(fā)生故臨床上做好接觸隔離即可因此對于二級實驗室：在生物安全柜內(nèi)做完關(guān)鍵的鑒別試驗后報告布氏桿菌屬，為臨床治療提供病原學依據(jù)，不必鑒定到種及相關(guān)藥敏培養(yǎng)物及接觸活菌物品應高壓滅菌后再離開實驗室

14、上報CDC，完善相關(guān)鑒定及流調(diào),結(jié)果報告,治療原則：早期 聯(lián)用 足量 多療程治療藥物： WHO推薦多西環(huán)素200mg/d和利福平600―900mg/d聯(lián)用，療程6周甚至更長！或者用利福平聯(lián)合四環(huán)素或鏈霉素進行治療！復方磺胺甲惡唑能滲透到細胞內(nèi)，對急性患者退熱較快。常用劑量翁每日4―6片(每片含TMP 80mg，SMZ 400mg)，分2次口服。連服4―6周。布氏桿菌感染容易復發(fā)，臨床治療失敗多為患者感覺癥狀消失后自行停藥導

15、致！,治療用藥,,《人間傳染的病原微生物名錄》,A類：使人染病或使人和動物都染病者，聯(lián)合國編號UN2814，其運輸專用名稱為危害人的感染性物質(zhì)；僅使動物染病者聯(lián)合國編號UN2900，其運輸專用名稱為僅危害動物的感染性物質(zhì)。,,不符合A類標準的感染性物質(zhì)，其聯(lián)合國編號為UN3373，運輸專用名稱為診斷標本，臨床標本或生命物質(zhì)B類。,,六、病原微生物危害程度評估要考慮的因素,1、病原微生物的致病性致病力越強，導致的疾病也越來越嚴重，其危害

16、程度就越高。2、病原微生物的傳播方式（傳播途徑）一般情況下，通過呼吸道，以氣溶膠形式傳播或擴散的危害，通常要比消化道或接觸傳播的病原微生物的危害程度要高，造成的危害的范圍要廣。3、病原微生物宿主范圍宿主的范圍越廣，其感染、擴散的可能性就越大，危害性也就較大。,氣溶膠,六、病原微生物危害程度評估要考慮的因素,4、是否有有效的預防和治療措施有有效的疫苗免疫措施而且有有效的治療措施，哪怕這種病原微生物致病性比較強，其潛在危險或?qū)е碌?/p>

17、后果相對來說也比較低。5、是否為已知的病原微生物對于未知的病原微生物，在對其有限的了解的基礎(chǔ)上，要采取更為嚴格的安全防護措施，認真對待。6、人群的免疫屏障如果對某一人群進行免疫，建立起了有效的免疫屏障人群，其防護要求比沒有免疫屏障人群肯定要低。,七、病原微生物危害程度評估的要素,1、微生物的一般生物學特性概述簡述病原微生物的基本生物學特性，比如形態(tài)特征、生物學特性以及致病性、感染途徑、流行現(xiàn)狀、治療與預防措施、自然宿主構(gòu)成等

18、2、微生物危害程度分類明確該病原微生物不同性質(zhì)的材料作為評估危害等級、分類的依據(jù)，危害評估結(jié)果，作為采取檢測過程中預防措施的基本要求等。3、微生物的致病性和感染劑量明確易感人群、致病性的強弱，感染后病死情況以及感染劑量的多少。,六、病原微生物危害程度評估的要素,4、暴露后的潛在后果 分析實驗人員暴露后，可能對實驗人員產(chǎn)生的后果，以及可能對周圍環(huán)境和人群帶來的危害等，如果通過呼吸道、傷口或其他部位暴露時，有可能會產(chǎn)生更為嚴重

19、的后果，潛在危害更大，對這些都需要評估。5、自然感染途徑 明確自然感染途徑的種類和方法。不同病原微生物的自然感染途徑有其固有的特點，一旦改變感染途徑，可能存在的風險和危害需要進行評估，所以在評估報告中要說明情況。,,自然傳播途徑▲病原微生物可通過,空氣水食物接觸血液母嬰蟲媒土壤,傳播途徑,,六、病原微生物危害程度評估的要素,6、實驗室操作所致的除消化道、呼吸道以外的其他感染途徑如皮膚接觸，通過傷口、粘膜的

20、等途徑感染，因為有些病原微生物除了自然感染途徑會引起疾病以外，在實驗室檢測過程中有可能因?qū)嶒灢铄e或意外導致其他途徑感染，并有可能產(chǎn)生更為嚴重的后果。7、微生物在環(huán)境中的穩(wěn)定性 一般來講在自然感染條件下，生物學特性穩(wěn)定，對外界自然條件抵抗力強的病原微生物，其危害性就要大些。,六、病原微生物危害程度評估的要素,8、所操作微生物的濃度和濃縮標本的容量原始生物樣本和經(jīng)過培養(yǎng)或濃縮的生物樣本，其危害程度也相差很大的，后者危害程度明顯大于前者

21、9、微生物自然和易感人群宿主評估時要講述清楚該病原微生物的自然宿主的構(gòu)成、易感人群的分布特征等問題，這樣有利于對某些實驗操作者采取更為科學到位的防護措施，防止發(fā)生實驗室感染事件。,六、病原微生物危害程度評估的要素,10、宿主來自臨床、實驗、動物研究的信息 根據(jù)這些資料和信息制定范圍全面的預防控制措施，尤其對一些新發(fā)現(xiàn)的或輸入性疾病的病原體要高度重視。11、計劃進行的實驗操作 要明確操作過程中可能會引起感染或

22、外泄的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，同時要針對這些薄弱環(huán)節(jié)制定具有針對性的預防控制措施及處置方法等12、可能會擴大的宿主范圍和重組的DNA的操作 在進行DNA實驗操作時要嚴格控制進行兩種微生物間的基因重組實驗，防止發(fā)生可能產(chǎn)生的潛在危害。,六、病原微生物危害程度評估的要素,13、預防和治療措施 對一些未知的或沒有有效的預防和治療措施的病原微生物的實驗操作要采取更為嚴格的防護要求和防護措施，尤其是一些致死性、易擴散傳播的病原微生物的實驗要嚴格管理

23、控制、確保安全。14、評估結(jié)論 簡單總結(jié)病原微生物的基本特性、致病性、穩(wěn)定性及危害性，提出實驗活動中需要關(guān)注和控制的關(guān)鍵環(huán)節(jié)與預防措施等，以及發(fā)生意外時要有足夠能力來應對這些不測事件，防止發(fā)生實驗室感染和向周圍環(huán)境擴散。,七、病原微生物的危害程度評估方法,首先收集整理擬開展實驗活動的病原微生物的基本資料和信息，針對評估要素逐條加以介紹與表述； 然后對擬從事實驗活動的危險性和可能產(chǎn)生的危害進行分析。包括實驗操作的非自然

24、感染途徑、所操作的病原體的濃度、實驗操作項目、方法的流程和步驟及可能產(chǎn)生暴露的環(huán)節(jié)等，并提出實驗操作要求和預防控制措施，以及說明是否涉及動物實驗等； 第三是對實驗活動中人員素質(zhì)提出要求最后得出一個該病原微生物總體的總結(jié)性結(jié)論，如病原微生物的穩(wěn)定性、傳播途徑宿主范圍、感染性強弱、致病特點、預防和治療手段、安全控制方法及消毒滅菌的要求。,如何進行生物安全風險評估,人員,病原微生物,實驗室及設(shè)備,實驗室及設(shè)備,病原微生

25、物,人員,1、病原微生物,67種重要病原微生物風險評估報告（網(wǎng)上可以下載）,67種重要病原微生物風險評估報告（網(wǎng)上可以下載）,2. 實驗室設(shè)施及活動,3、人員,實驗室及設(shè)備,病原微生物,人員,4.規(guī)章制度,,規(guī)章制度,①實驗室人員準入制度；②菌毒種或樣本等感染性材料管理制度；③員工健康管理制度；④生物安全工作自查制度；⑤實驗室資料檔案管理制度；⑥生物安全管理及實驗人員的培訓和考核制度；⑦意外事件處理與報告制度；⑧實驗

26、室安全保衛(wèi)制度。,5.評估結(jié)論,評估結(jié)論,根據(jù)上述風險評估要求及其落實情況，本實驗室達到BSL-2標準，可以開展相應級別的涉及生物安全的實驗活動 。,評估報告交給醫(yī)院生物安全管理委員會批準！,病原微生物實驗活動危害的再評估,,鑒于病原微生物信息不斷更新和生物安全實驗室活動的變更等因素，危險平估是一種動態(tài)發(fā)展的工作，下列情況應進行再評估：1．生物安全實驗室正式啟用前 在生物安全實驗室建造之前的危險評估主要用于幫助生物安全實驗室設(shè)

27、計者與使用者確定試驗室的規(guī)模、設(shè)施與合理布局，其評估結(jié)果可能不夠詳細，與實際使用有差距。因此，在生物安全實驗室正式啟用前，應根據(jù)實際工作進行再評估。,2．病原微生物的致病性、毒力、傳染方式改變時 當收集到資料表明所從事病原微生物的致病性、毒力、傳染方式發(fā)生變化時，應對其背景資料及時變更，并對其實驗操作的安全性進行重新平估。3．增加新的研究項目時 在實驗活動中，如增加新的研究項目，應對該項目的活動進行評估。4．分離到原

28、來未評估過的高致病性病原微生物時 在實驗活動中分離到原評估報告中未涉及的高致病性病原微生物時，應進行危害評估。,5．發(fā)現(xiàn)原來評估中未發(fā)現(xiàn)的隱患時 生物安全實驗室操作人員在進行實驗活動中，發(fā)現(xiàn)其實驗過程中存在原評估報告中為發(fā)現(xiàn)的隱患，或者在檢查與督察過程中發(fā)現(xiàn)存在生物安全問題，應進行再評估。6．發(fā)生微生物逃逸、泄露或人員感染意外時 在實驗活動中發(fā)生微生物逃逸、泄露或人員感染等意外情況時，應立即進行再評估。,八、我市的

29、病原微生物危害評估情況,金黃色葡萄球菌的生物危害評估報告,金黃色葡萄球菌的生物危害評估報告,金黃色葡萄球菌的生物危害評估報告,金黃色葡萄球菌的生物危害評估報告,部分相關(guān)資料,生物安全柜接種標本,紫外線照片消毒,門禁、個人防護用品,部分原始記錄,部分原始記錄,腎內(nèi)科病人：程X 男 48歲 廣東肇慶人 職業(yè)情況：農(nóng)民主訴：反復發(fā)熱十余 天，3月20日入院。 入院查體：發(fā)燒達39°以上、伴畏寒寒戰(zhàn)

30、，在當?shù)匦l(wèi)生院檢查尿常規(guī)：顆粒管型+，尿蛋白++、生化白蛋白24.5g/L、肌酐201umol/L、尿素12.77mmol/L,對癥退燒治療，為進一步診治來我院就診，急診擬“腎盂腎炎、尿結(jié)石、腎功能不全”收入腎內(nèi)科實驗室檢查：RBC3.39 HGB89 PLT23 CRP20.1臨床初步診斷：發(fā)熱查因：腎盂腎炎？肺炎右輸尿管上段結(jié)石、低蛋白血癥。血培養(yǎng)雙瓶雙側(cè)（四瓶）報陽，涂片鏡下高度馬爾尼菲！,病例分享：病史摘要,實驗