臨床基因擴增檢驗試驗的設置質量管理體系

1、臨床基因擴增檢驗實驗室的設置及質量管理體系的建立,山東省臨床檢驗中心 張炳昌,一.臨床基因擴增檢驗實驗室的設置,依據：衛(wèi)生部頒發(fā)的《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》（衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2002]10號）,臨床標本的接收,通常的工作流程：標本采集 血清分離 編號 保存或檢測應在四個測定區(qū)域之外的地方或區(qū)域內接收 接收的標本應收集在原始容器中在核酸提取時帶入至標本制備區(qū),,,,,,什么樣的臨床基因擴增檢

2、驗實驗室是最標準的？,,理想的PCR實驗室設置1,理想的PCR實驗室設置2,,,,,,臨床基因擴增實驗室設置的一般原則,各區(qū)獨立注意風向人員流向物品流向,二.實驗室質量管理體系的建立,質量手冊質量體系程序文件標準操作程序 (相關記錄表格),質量管理體系的建立,質量手冊程序文件標準操作程序（SOP）,質量手冊,定義：闡明一個實驗室的質量方針，并描述其質量體系的文件。其主要內容包括目錄、批準頁、前言、質量方

3、針、組織結構、人員職責、實驗室設施環(huán)境、儀器設備、溯源性、檢驗方法、標本管理、記錄、報告等，是對上述各方面質量管理的一般性描述。,程序文件,程序文件則是對通用于整個實驗室的某些方面工作的文件化描述。主要包括實驗室文件和檔案等的管理、內審、管理評審、人員培訓、投訴處理、保密、計算機安全、新項目開展、量值溯源、試劑儀器及實驗用品的購買、標本管理、廢物處理等方面。,標準操作程序,SOP最為具體，最具有可操作性，也是使用頻率最高的文件，與實驗

4、室的日常工作密切相關。常用SOP文件：儀器設備SOP文件，試驗項目操作SOP文件，質量、管理SOP文件等。如某個具體的項目臨床標本的收集、處理、保存、檢測等，具體儀器的操作使用、校準及維護等。SOP文件與程序文件之間的區(qū)別在于后者的原則性要強一些，針對的是一個系列或一個方面的工作。,臨床基因擴增檢驗實驗室的技術驗收文件要求,臨床基因擴增檢驗實驗室的技術驗收申請表后提出來的實驗室所必須具有的程序文件，大部分是SOP ，少部分是程序文件，

5、對實驗室的質量手冊沒作要求。,怎樣來編寫SOP 文件,這一點目前大部分實驗室都覺得不知從何寫起，希望有一個標準模式。其實細細思考一下，你某一項檢驗應該怎樣做才能保證質量，然后就將這些過程寫下來就可以了。其實這些SOP 文件究竟采用何種格式編寫并不重要，關鍵的是要具體，要具有可操作性，要讓既使是第一次接觸該SOP 的人也能按其完成相關操作。一定要有這樣一種觀念，即SOP 文件不是拿來給別人看的，而是拿來給自己實驗室技術人員用的，一定要從實

6、際出發(fā)，做得到的才寫進去，做不到的就不要寫進去。,質量管理,質量管理不是表面文章，其精髓就是所有與實驗室檢驗質量有關的環(huán)節(jié)全部要有章可循，并按章進行。這即是對實驗室實際操作技術人員的約束，同時也是對實驗室負責人的約束，不能隨心所欲，比如說儀器、試劑、消耗品的購買，都必須按程序進行。這是與我們傳統(tǒng)的平常只查考勤、查衛(wèi)生等到出現問題時再處罰個人的經驗管理模式所完全不同的，這個觀念和意識的轉變首先應是實驗室負責人，然后才是具體的實驗操作人員。

7、,臨床PCR 實驗室質量管理的特點,（一）“無基因”概念 （二）實驗室要有嚴格的人員進入限制和程序（三）使用合格的試劑和消耗品,臨床基因擴增檢驗實驗室相關記錄,臨床基因擴增檢驗實驗室需要記錄的有臨床標本接收中的患者個人有關資料（如姓名、性別、年齡等）、標本接收日期、標本特性、標本的狀態(tài)、標本的編號等；檢測前的儀器設備和試劑的準備等；檢測中的試劑生產廠家、試劑批號、檢測日期、檢測結果、質控結果及分析、檢測人（簽字）、質檢人（簽字）等、

8、檢測后的實驗臺面、儀器設備等的消毒和清潔、紫外線照射等。記錄要持之以恒。,質量管理的內涵,寫你所做的做你所寫的記錄你已做的分析你已做的質量持續(xù)改進,,怎樣編寫SOP？,1.檢驗項目SOP,應根據申華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準 編號WS/T 227-2002 “臨床檢驗操作規(guī)程編寫要求”編寫項目的SOP文件 原則上，每一收費的檢驗項目都應有與之相應的SOP文件，盡管某些項目SOP文件可

9、以簡單一些,編寫中應特別注意，要書寫： 1 拒收標本的規(guī)定 2 質控品使用水平和頻率，允許限的糾正措施 3 操作性能的概要。如：精密度、病人結果可報告范圍、方法學比較等。 4 對檢驗結果為病危報警值的處理,手冊必須由主任批準，簽字和注明日期。 如果實驗室改變領導，手冊須由現領導再批準，簽字和注明日期。,,實驗室必須保存停止使用的操作手冊副本，并保存到停止使用兩年后才能銷毀。,2.儀器設備的維護和校準SOP,責任人維

10、護和校準的基本方面：光路、濾光片、波長、加熱模塊的清潔、具體的校準點選擇（如加樣器的校準體積點選擇、溫度計的校準溫度點選擇等）、維護和校準的具體方法包括用具 校準合格的判斷標準 維護和校準的間隔時間,儀器設備的操作 SOP,按照每臺儀器設備的使用說明書，將其詳細操作步驟包括開機關機次序、編程、調試、運行、計算等按實際使用中的先后順序逐項列出，最后還應有使用的注意事項。,儀器SOP文件,應根據廠家提供的操作說明書編寫適合實驗室實際簡明

11、扼要操作程序，大致有：開關機程序.常規(guī)操作程序特殊(急診、復測、…)操作程序儀器維護程序其它,儀器每日保養(yǎng)記錄表,月保養(yǎng)記錄表,項目校準程序和計劃,校準對于檢驗結果在規(guī)定的報告范圍內的準確和可靠是必要的。校準是一個測試和調整儀器或者檢驗系統(tǒng)，試劑盒的過程，以提供檢驗反應和所測物質之間的準確關系。用配套校準品進行校準是量值溯源開始，廠家應保證校準品的最終溯源,校準計劃,校準計劃是指檢驗項目的校準頻度。每次校準數據記錄表對

12、校準數據變化的評估根據美國CLIA 88規(guī)定、還要對校準結果進行驗證（Verification）。用一己知濃度樣品，稀釋成不同濃度，檢測后觀察所測濃度是否準確，是否成線性。,儀器校準記錄表,儀器校準記錄表（2）,儀器工作的最基本的環(huán)境條件,保證儀器能準確進行工作的最基本的環(huán)境、客觀條件。如：溫度、濕度、UPS、光照度等。,實驗室SOP要點,,1.SOP文件基本格式,,2.實驗室清潔SOP要點,目的:為了使實驗室臺面、地面和儀器設備在實

13、用后，處于潔凈和無污染性狀態(tài)，以防止出現因儀器設備不潔影響檢測結果或儀器使用壽命；防止因實驗室臺面、地面和儀器設備的生物傳染危險性造成實驗室人員感染，以及防止實驗室交叉污染而出現假陽性結果等。 適用范圍應包括實驗室地面、臺面和儀器設備等的清潔。 按實驗室臺面、地面和儀器設備分開來寫各自的具體清潔方法，要具體而又有可操作性 應規(guī)定工作人員在清潔時，必須按試劑準備區(qū)?標本制備區(qū)?擴增(及產物分析)區(qū)方向進行，不得逆行 規(guī)定每一工作區(qū)

14、域的清潔必須使用專用的清潔用具，不得混用 規(guī)定有潛在生物傳染危險性材料濺出時的消毒清潔方法,3.生物安全防護SOP要點,明確規(guī)定實驗室工作人員在進行哪一類接觸到有潛在生物傳染危險性的物品和材料時，應使用哪類個體生物安全防護設備和用具 制定實驗室內銳器物品的使用規(guī)則 制定發(fā)生意外如手指劃破、血清濺入眼內等情況下的處理程序 明確有潛在生物傳染危險性的廢棄物（包括廢棄臨床標本）拿出實驗室前的消毒方法如高壓或化學消毒,4.臨床標本的采集

15、、運送、接收和保存 SOP要點,特定標本采集的具體方法步驟 明確規(guī)定標本的采集容器要求 明確標本的采集量 明確標本采集后送到實驗室檢測所能容許的最大時間間隔，亦即標本采集后，應在多長時間內送至實驗室 明確標本采集后，在送至實驗室檢測前的保存方式和條件 明確標本從采集處運送至實驗室過程中所要求的運送條件 明確標本接收時，簽收的程序、拒收的標準和標本唯一編號的規(guī)則 規(guī)定標本在實驗室內的短期（應有具體時間）和長期（應有具體時間）

16、保存條件和要求 制定保證標本安全存放措施,即如何防止標本丟失、掉換、變質的措施,5.試劑和消耗品的質檢 SOP,試劑質檢的基本方面，如試劑的抗干擾能力（主要是針對提取試劑），即對溶血、脂血標本擴增抑制作用的了解?？赏ㄟ^自行制備含已知量病毒核酸的不同程度溶血或脂血的標本進行質檢。如為定量檢測試劑，還應包括檢測的重復性、線性范圍等的質檢，通常使用2-3份樣本進行檢測即可。如為定性檢測試劑，則應重點考察測定下限，可用系列稀釋的含已知量靶核酸

17、的血清標本進行 核酸提取用離心管質檢的基本方面 帶濾心吸頭的質檢主要是濾心的密封性,6.項目檢測、結果判斷、解釋和報告 SOP,標本進入實驗程序后的操作編號方式 根據所用試劑盒確定的詳細操作流程 儀器編程及文件名的編寫規(guī)則 結果判讀的流程和規(guī)則 結果分析解釋的流程 結果報告流程,7.實驗記錄及其管理 SOP,日常檢驗過程中應記錄的基本內容的規(guī)定，如儀器設備操作、維護和校準過程及有關數據；檢驗試劑來源和批號；檢驗標本的來源和

18、唯一編號；試劑的配制；實驗環(huán)境條件的控制記錄；實驗室清潔的記錄；質控的記錄；原始檢測數據及其推導記錄等 對實驗記錄者的簽名方式的規(guī)定和要求 實驗記錄管理的基本方面：指定專門的管理人；有專門的保存處如柜子等；記錄的登記歸檔方法；記錄的借閱及銷毀記錄；記錄保存的時間；電子記錄的備份保存具體方法及保存時間等,8.室內質量控制 SOP,明確室內質控物的來源及濃度 明確所選用的質控方法 明確失控的判斷標準或所采用的失控規(guī)則 明確失控后的

19、分析及處理措施,9.參加室間質量評價 SOP,明確規(guī)定室間質評樣本的接收記錄方式、保存條件及實驗編號規(guī)則 明確室間質評樣本的檢測流程，要強調的是，室間質評樣本應以與臨床標本相同的方式處理和檢測 明確室間質評樣本的報告流程，即填寫、復核和簽發(fā)如何進行，由誰負責 明確對返回結果的分析流程和責任人 明確室間質評檢測失敗的原因分析流程 明確如果測定準確性出現問題后，如何針對性采取措施的流程,10.投訴處理 SOP,明確投拆第一接觸人對

20、投拆的處理流程，即如何記錄、如何針對相關投訴的進一步處理程序、是否需要報告和如何報告、以及如何向投拆人返回處理意見等?？蓪⑼恫鸱譃椴煌惾鐚z驗結果正確性、服務態(tài)度、報告單填寫錯誤等分別編寫處理流程 投拆有效時的如何改進和采取何種措施的具體流程。應非常具體并具有可操作性,,臨床PCR檢驗流程記錄表,臨床PCR檢驗流程記錄表 檢驗日期 檢驗項目： 擴增儀中保存文件名：

21、使用說明：1．本記錄表須嚴格遵循試劑準備區(qū)?標本制備區(qū)?擴增區(qū)（產物分析區(qū)）單一流向移動，嚴禁逆向移動。2．各項工作執(zhí)行后，在相應敘述前的“?”內打“?”。3．本記錄表最后與相應的標本接收記錄等歸檔保存于擴增區(qū)的專用文件柜內，以備查找。,實驗前準備? 試劑在有效期內 ? 擴增儀、加樣器和溫度計在校準的有效期內? 生物安全柜的濾膜在使用有效期內 ? 消毒溶液在有效期內? 沖眼器內無菌生理鹽水在有效期

22、內 ? 離心管、帶濾心吸頭已經過質檢合 操作者：,試劑準備區(qū)（1區(qū)）實驗前 ： ? 打開通風設備 ? 實驗臺面清潔（水或70%酒精擦拭）? 冰箱溫度：冷藏室（2~8℃） ℃；

23、 冷凍室（?20℃?1℃） ℃? 實驗室溫度： ℃（允許范圍：10~30℃）；相對濕度： （允許范圍：30%~70%）PCR試劑來源： （可直接列出有關廠家名稱） 批號： 檢驗項目： 本次實驗用量： 人份，剩余量： 人份。其他有關試劑配制：? 按XXX（將有關SOP編號列出）SOP配制1%含氯

24、消毒液 毫升；? 按XXX（將有關SOP編號列出）SOP配制4％NaOH溶液 毫升；? 按XXX（將有關SOP編號列出）SOP配制0.1%焦磷酸二乙酯 毫升；? 按XXX（將有關SOP編號列出）SOP配制 毫升；? 其他： 儀器設備使用：離心機：? 正常 ? 不正常

25、 振蕩器：? 正常 ? 不正常實驗后：? 按XXX（將有關SOP編號列出）SOP清潔實驗室臺面、地面、加樣器和離心機，并進行紫外照射30分鐘以上。? 按XXX（將有關SOP編號列出）SOP處理實驗廢棄物。 操作者：,標本制備區(qū)（2區(qū)）實驗前： ? 打開通風設備

26、 ? 實驗臺面清潔（水或70%酒精擦拭）? 冰箱（柜）溫度：冷藏室（2~8℃） ℃； 冷凍室（?20℃?1℃） ℃? 實驗室溫度： ℃（允許范圍：10~30℃）；相對濕度： （允許范圍：30%~70%）陽性室內質控物來源： 濃度及批號： 擴增位置： 陰性室內質控物來源： 批號：

27、 擴增位置： 所取理的標本（對應標本接收的唯一編號）及擬擴增位置：1917252101826311192741220285132129614223071523318162432核酸提取及加樣過程：按XXX（列出編號）SOP進行。儀器設備使用：

28、 生物安全柜：? 正常 ? 不正常 恒溫儀溫度校準： ℃離心機：? 正常 ? 不正常 振蕩器：? 正常 ? 不正常實驗后：? 按XXX（將有關SOP編號列出）SOP清潔實驗室臺面、地面及儀器設備。? 按XXX（將有關SOP編號列出）SOP處理實驗廢棄物。

29、操作者：,,相關要點舉例,1.實驗室設施、儀器設備及管理,臨床基因擴增檢驗實驗室應有充分合理的空間、良好的照明和空調設備 ；實驗室儀器設備應保養(yǎng)良好，實驗用品要達到相應的要求。加樣器的校準？帶濾塞吸頭的使用及質檢？離心機？熱循環(huán)儀？水浴箱和/或恒溫干浴儀？酶標儀和洗板機？,2.基因擴增儀器設備的質控,3.帶濾塞吸頭的使用及質檢,首先制備一個含1～2%甘油及色素（如甲基橙）的水溶液，如果吸頭的最大體積為100μl，則將加樣器吸取體積調至

30、110～120μl，再套上吸頭后吸取上述有色液體。如果吸頭質量好，則有色液體不應出現在濾塞之上，否則說明濾塞不嚴。,3.帶濾塞吸頭的使用及質檢,用實驗來檢驗帶濾塞吸頭的質量：先純化制備數份強陽性和數份陰性核酸標本，然后將加樣器吸取量設至擴增加樣所需的體積，使用待評價帶濾塞吸頭對一份強陽性樣本來回吸取10次（模擬10份陽性樣本的吸?。瑢⒆詈笠淮蔚奈∫杭又烈缓瑪U增反應液的管中。之后，換一個新吸頭，連續(xù)吸取10份陰性樣本分別至10個擴增反

31、應管中，此過程重復3～5次，最后對每一管按所用試劑方法進行擴增檢測。強陽性樣本應為強陽性，陽性弱或出現陰性則說明吸頭可能含有擴增抑制物。所有陰性樣本應為陰性，出現陽性則表明吸頭不能有效地防止氣溶膠對加樣器的污染。,4.擴增儀孔間溫度的重復性和均一性的檢測方法,一是使用一種熱電偶探針、微伏轉換器和自動圖示記錄儀組成擴增加熱模塊孔內溫度監(jiān)測記錄系統(tǒng)，當孔間溫度變異超出1℃時，其可測出來。具體做法是將裝有TE緩沖液并上加石蠟油的擴增反應管放

32、置于擴增儀各孔中，熱電偶探針透過擴增反應管蓋插至緩沖液中，然后按程序進行一個常規(guī)的PCR擴增，加熱模塊如為96孔，則至少要測定12孔不同位置孔內的溫度，在整個擴增過程中，可移動熱電偶探針至上述不同孔中監(jiān)測溫度，但每一孔內溫度監(jiān)測至少要有一個擴增周期。,擴增儀孔間溫度的重復性和均一性的檢測方法,第二種方法并非直接測定孔內溫度，而是通過擴增功能來間接獲知孔間的均一性，即將加有一已知的含一定濃度的陽性質控樣本的擴增反應管置于擴增儀各孔中按常規(guī)

33、進行擴增檢測，觀察結果的一致性程度，如果有某一個或幾個孔結果有問題，則應確定這一個或幾個孔是否會重復性地得到假陰性結果，如果是，則表明相應孔的熱傳導有損壞。,5.理想的試劑和操作方法,改善測定精密度的措施必須首先著重在最不精密的步驟上，應對試劑準備、標本收集、核酸提取、測定方法和儀器操作寫出“標準操作程序”(SOP) ，并嚴格按其操作。,試劑準備區(qū)：試劑質檢報告 (1),試劑名稱 產地

34、 批號 有效期 規(guī)格 數量 1 收到試劑后，目測試劑是否處于凍存狀態(tài)： 是 □ 否 □2 核對試劑的品種和數量： 無誤 □ 有誤 □3 核對完后及時轉入-18℃的冰箱保存： 是□ 否 □4 在上批試劑存量尚可維持一周時對新批號試劑進行較驗實驗：是 □

35、否□5 校驗實驗設置：空白對照，陰性對照，陽性對照各一，梯度陽性標準品4個，再加一質控血清 新舊試劑的對比實驗（各做5個管的室內控制品）,試劑準備區(qū)：試劑質檢報告(2),6 校驗實驗結果：A 空白對照有無擴增 有 □ 無 □ B 陽性對照有無檢出 有 □ 無 □

36、 C 陰性對照有無擴增 有 □ 無 □ D 相關性大于 0.98 是 □ 否 □ E 斜率在 -3.6—4.4之間 是 □ 否 □ F 截距在30- 54之間 是 □ 否 □ J 新舊試劑對比實驗結果

37、 舊試劑值 新試劑值 用t檢驗 t = 批間有無差異： 有 □ 無 □ 7 最終判斷試

38、劑是否合格： 合格 □ 不合格 □質檢結論：本批次試劑： 符合質檢要求□ 不符合質檢要求□ 可以使用 □ 不可以使用 □ 驗收時間 驗收人 主任審閱核,試劑準備區(qū)：實驗耗材質檢報告(1),耗材名稱 產地 批號

39、 有效期 規(guī)格 數量 1 收到耗材后，外包裝檢查：a 包裝完好無損： 是□ 否□b 產品標識，批準文號，生產日期有效期清楚： 是□ 否□2 內包裝檢查：a 內包裝是否有破損，泄漏： 是□ 否□b 內容物是否齊全（型

40、號、數量、使用說明書等） 是□ 否□,試劑準備區(qū)：實驗耗材質檢報告(2),3 性能檢查：A. 離心管的核酸抑制物檢測，方法：分別取5個新批次的離心管和舊批次的離心管做室內質控物的檢測，同時做各做一個陰性對照。B.Tip頭的核酸抑制物的檢測，方法：分別取5個新批次Tip頭和舊批次Tip頭做室內質控物的檢測，同時做各做一個陰性對照。C. 新舊批次對比實驗結果 舊批次值

41、 新批次值 用t檢驗 t = 批間有無差異： 有 □ 無 □ 7 最終判斷試劑是否合格： 合格 □ 不合格 □ 質檢結論：本批次試劑： 符合質檢要求□ 不符合質檢要求□

42、 可以使用 □ 不可以使用 □ 驗收時間 驗收人 主任審閱核,,人員培訓,臨床基因擴增檢驗的操作主要是標本處理中的核酸提取步驟，這其中所涉及的又主要是加樣器的使用，盡管操作簡單，但由于均為微量操作，要獲得穩(wěn)定可靠的測定結果，操作人員需要一定的專業(yè)技術知識和經驗，要盡可能做到知其然又知其所以然。,實驗室的日常

43、工作管理,工 作 項 目 核 查 點水浴箱、微量恒溫器（加熱模塊） □校準及記錄溫度 次氯酸鈉溶液 □新鮮配制生物安全柜 □先起動運行30分鐘后

44、再開始工作 室內質控 弱陽性質控（定性） □有 低、中、高濃度質控（定量） □有 陰性質控：原樣本 □有 經歷提取過程的空管 □有 僅含擴增反應混合液管

45、 □有實驗臺面 □使用后用次氯酸鈉溶液消毒， 再用70%乙醇清潔

46、 □紫外照射加樣器、離心機 □使用后用次氯酸鈉溶液消毒， 再用70%乙醇清潔實驗室各區(qū)

47、 □遵循單一工作流向 □紫外照射,分析你已做的,每次實驗結果的分析 表象與真象多次實驗結果的綜合分析 趨勢的內在含義儀器設備的使用情況分析 維護與校準周期的有效性,三.技術驗收,依據：《臨床檢驗擴增檢驗

48、實驗室管理暫行辦法》 衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2002]10號《臨床基因擴增檢驗實驗室工作規(guī)范》 衛(wèi)檢字2002第8號,技術驗收內容,實驗室設置和設備設施和環(huán)境人員設備管理檢測方法標本管理記錄報告質量控制抱怨 等十章共三十八條,實驗

49、室設置和設備,本章共七條。 實驗室分區(qū)：規(guī)范化分區(qū)、明確的識別標記防污染：空氣流向、中央空調、各區(qū)間的封閉性各區(qū)儀器設備物品配備：充分性、科學性、專用性（標識） “生物安全柜” “可移動紫外燈” “加樣器”,設施和環(huán)境,本章包括五條；實驗室設施、工作區(qū)域、能源、照明等；環(huán)境和實驗條件控制設施：溫濕度計、不間斷或穩(wěn)壓電源等；實驗室進出的限制和控制：人員進入控制標識、生物傳染危險性標識實驗室“內務管理”（如人

50、員流動、清潔等）制度和相應設施；廢棄血清處理、生物防護等措施和相應設施,設施和環(huán)境需注意的問題,清潔程序或制度 清潔用具的專用、清潔工作的單一流向、清潔方法的具體性生物防護及廢棄血清處理 對工作人員的保護和對環(huán)境的保護 銳器使用規(guī)則 生物傳染危險性廢棄物出實驗室前預處理,人 員,本章包括三條。人員數量足夠；有培訓上崗證培訓計劃：室內的定期培訓（記錄）人員技術（資格、培訓、技能）檔案。,設備管理（1）,本

51、章包括三條。主要儀器設備應得到正確維護，應有設備維護程序文件；以及維護的記錄加樣器、溫度計、擴增儀和酶標儀等設備應有校準程序文件、有明顯標識表明其校準狀態(tài)（此次校準時間及下次應校準時間）；實驗室應保存每一臺儀器設備的檔案材料，對檔案材料的具體內容作了詳細規(guī)定。,設備和質控物（2）,每一臺設備的檔案內容包括： （a）設備名稱；（b）制造商名稱、型號、序號等；（c）接收日期和啟用日期；（d）目前放置地點；（e）接收時的狀態(tài)；（

52、f）儀器使用說明書有復印件；（g）校準和/或檢定的日期和結果及下次校準和/或檢定的日期；（h）迄今所進行的維護和今后維護計劃的細節(jié)；（i）損壞、故障、改裝或修理的歷史。,檢 測 方 法,本章包括三條。標準操作程序（SOP）：儀器設備操作和校準程序；標本收集處理程序；擴增檢測工作程序；儀器試劑的選購和質檢程序；消耗性材料的購買、驗收、質檢和貯存程序。SOP應現行有效及便于使用。,標 本 管 理,本章包括五條。建立唯一編號識別系統(tǒng)，避

53、免標本混淆；標本采集、運送和保存程序；標本接收時的狀態(tài)記錄；標本的適用性和充分性；標本貯存的標準操作程序及貯存溫度控制措施;標本接收及安全處置程序；維護實驗室誠實性的必要措施。,記 錄,本章包括三條。有記錄管理制度：適合自身實際情況，符合現行規(guī)章制度；（由誰管、在何處管、保存多長時間）原始記錄、計算和導出數據應歸檔并保存；記錄應有有關人員的簽字；所有記錄和報告都要妥善保管并保密。,報 告,檢測結果的報告應準

54、確、清晰和客觀；定性測定報告“陰性”或“陽性”；定量測定則以拷貝數/ml或IU/ ml報告；避免二者之間的混淆；每份報告應包括以下信息：標題、唯一標識、檢測標本說明、標本特性和狀態(tài)、標本接收日期和檢測日期、檢測方法、檢測和校核人員簽字及發(fā)出日期、參考結果或范圍；如對報告有效性有疑問，實驗室應立即通知臨床相關科室予以改正的程序；有報告的發(fā)放程序：用電話、傳真、電子郵件報告結果時的保密原則。,質 量 控 制,實驗室應有室內質量控制標

55、準操作程序 質控物來源、濃度、批號 陰性質控的設置 所選擇的統(tǒng)計質控方法（均值、SD如何得到的） 失控的判斷標準 失控以后怎么辦 質量持續(xù)改進實驗室應參加室間質量評價。,抱 怨,實驗室應制定抱怨及其處理的SOP； 可操作性、不同抱怨的處理如抱怨涉及到工作是否符合現行程序，或是否符合管理辦法和工作規(guī)范，或對實驗室校準及檢測質量有疑問時，則實驗室應立即對這些范圍的工作和有關職責進行審核。,技術

56、驗收的其它內容,就有關實驗室質量管理方面與具體工作有關的內容進行口試和/或筆試；已知HBV DNA和/或HCV RNA血清盤的實際檢測和結果報告。,技術驗收表的修改及驗收細節(jié),2002年11月和2003年1月在北京兩次專家討論會,文件審核,文件是否都有文件的可操作性文件的現行有效,現場考試,口試或筆試內容：舉在其工作中有可能遇到的實例，考察是否能應用所制定的程序進行應對例子： 一. 現有一個患者向你提出：“我在你們醫(yī)

57、院檢測HBV DNA為陽性，但在另一家醫(yī)院檢測為陰性，你們醫(yī)院是怎么做的檢測？”，此時，你怎么辦？（該題主要是考實驗室人員是否知道并遵守所制定的抱怨處理程序）,現場考試,二．現有一人打電話到科室，說：“我孩子在你們醫(yī)院做了一項丙肝的PCR檢測，名字叫XXX，請你告訴我檢測結果好嗎？”。如果是你剛好接了這個電話，你會怎樣去做？（該題考的是實驗室人員在患者要求以電子郵件、電話、傳真等方式傳遞報告時，是否能按相應的程序去做）,現場考試,三

58、．現有一個臨床大夫拿著幾張HBV DNA定量PCR檢驗報告單找到PCR實驗室，說：“你們的PCR結果到底準不準，我這個病人剛開始檢測，HBV DNA是5×107拷貝數/ml，用了拉米呋啶治療后二周，再檢測結果為3×107拷貝數/ml，降了不少，但再過二周檢測，又變成了6×107拷貝數/ml，升高不少，這到底是怎么回事？”，如果這個大夫剛好問的是你，你怎么辦？并如何解釋其提出的問題？(該題除了考實驗室人員是

59、否知道并遵守所制定的抱怨處理程序外，還要求其對特定PCR檢驗的批間變異有充分的認識),現場考試,四．現有你科室同事，拿了一份血清標本給你，說：“這是我一個熟人的標本，他要做HCV RNA檢測，剛好他還做生化和免疫檢測，我從生化標本分了一些出來，給你做HCV RNA?！蹦阌X得這樣行嗎？為什么？（該題主要是考實驗室人員對有關標本的收集程序是否清楚并遵守）,現場實驗,目的：考核實驗室是否按所制定的規(guī)程進行常規(guī)檢測，檢測結果是否與預期相符只是