實(shí)驗(yàn)_柱色譜

1、實(shí)驗(yàn)10柱色譜分離實(shí)驗(yàn)報(bào)告亞甲基藍(lán)與熒光黃的分離一實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊粚?shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)并掌握色譜法的原理及其應(yīng)用。?學(xué)習(xí)并掌握柱色譜的實(shí)驗(yàn)操作技能。二實(shí)驗(yàn)原理二實(shí)驗(yàn)原理色譜法亦稱色層法，層析法等，是分離，純化和鑒定有機(jī)化合物的重要方法之一。色譜法的基本原理是利用混合物各組分在某一物質(zhì)中的吸附或溶解性能（即分配）的不同，或其它親和作用性能的差異，混合物的溶液流經(jīng)該種物質(zhì)，進(jìn)行反復(fù)的吸附或分配等作用，從而將各組分分開。色譜分離法的分類色譜分離法的分類（

2、按操作條件的不同）（按操作條件的不同）當(dāng)加入的洗脫劑流下時(shí)，由于不同化合物吸附能力不同，因而以不同的速度沿柱向下流動(dòng)，繼續(xù)洗脫時(shí)，吸附能力弱的組分隨溶劑首先流出。在連續(xù)洗脫過(guò)程中，不同組分或不同色帶就能分別收集，從而達(dá)到分離純化的目的。1吸附劑常用的吸附劑：氧化鋁，硅膠，氧化鎂，碳酸鈣，活性炭或纖維素粉。選擇吸附劑的首要條件：不與被分離物或展開劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。吸附能力與以下幾點(diǎn)有關(guān)：（1）吸附劑顆粒大小（2）吸附劑含水量柱色譜柱色譜2溶

3、劑通常根據(jù)被分離物中各組分的極性、溶解度和吸附活性等來(lái)考慮。先將帶分離的樣品溶于盡量少的非極性溶劑中，從柱頂流入柱中，依次增大溶劑的極性，將不同化合物依次洗脫。常用洗脫劑的極性：石油醚＜環(huán)己烷＜四氯化碳＜甲苯＜苯＜二氯甲烷＜氯仿＜乙醚＜乙酸乙酯＜丙酮＜乙醇＜甲醇＜水＜乙酸三實(shí)驗(yàn)步驟及注意事項(xiàng)三實(shí)驗(yàn)步驟及注意事項(xiàng)（1）取一支色譜柱，在柱子的收縮部塞一小團(tuán)脫脂棉花，注意松緊要適度。然后在棉花上鋪一層粗硅膠或石英砂。（2）將色譜柱垂直固定在鐵

4、架臺(tái)上，往柱內(nèi)加適量70%乙醇溶液，打開活塞，趕走氣泡。（3）再向柱中倒入適量70%乙醇溶液，打開活塞，控制滴速為1滴／秒，用小錐型瓶承接，同時(shí)通過(guò)漏斗慢慢裝入5gAl2O3，使其逐漸沉入底部?！驹谘b吸附劑的過(guò)程中，應(yīng)用質(zhì)軟的物體如試管夾、吸耳球等輕輕敲擊柱身，促使吸附劑裝填緊密，排除氣泡。最終應(yīng)使吸附劑的上端平整，無(wú)凹凸面?！浚?）加完吸附劑后，在吸附劑上再蓋一張直徑大小合適的小濾紙。（5）當(dāng)溶劑的液面剛好流至濾紙面時(shí)關(guān)閉二通活塞，立