第四章 無(wú)性系的快速繁殖

1、第四章無(wú)性系的快速繁殖許多栽培植物都是靠無(wú)性系來(lái)繁殖的，例如果樹(shù)（柑橘、蘋果）花卉等。這些植物的基因是高度雜合的，為了在栽培過(guò)程中保持住品種的原有品質(zhì)，只有通過(guò)無(wú)性繁殖才能達(dá)到目的。其次，有些栽培植物在長(zhǎng)期進(jìn)化和人工選擇的過(guò)程也形成了無(wú)性繁殖的能力，但無(wú)性繁殖的倍數(shù)較低，為了滿足生產(chǎn)需要，我們要大量地繁殖優(yōu)良種苗。有些優(yōu)良新品種為了在生產(chǎn)中迅速推廣，也需要盡快擴(kuò)大群體，所以，就有了以組織培養(yǎng)為手段的植物無(wú)性系的快速繁殖技術(shù)。快速繁殖的高

2、速度是由以下3種因素構(gòu)成的：1較高的繁殖倍數(shù)，2較短的繁殖周期，3周年生產(chǎn)。46周一個(gè)繼代周期，34倍的增殖倍數(shù)，由一個(gè)個(gè)體可以繁殖出60006000萬(wàn)個(gè)個(gè)體，生產(chǎn)潛力巨大。第一節(jié)第一節(jié)無(wú)菌培養(yǎng)的建立無(wú)菌培養(yǎng)的建立一、外植體的選擇一、外植體的選擇根據(jù)培養(yǎng)目的和所涉及的植物種類進(jìn)行選擇，一般確定原則為：1、較大的草本或木本植物：莖段。2、較小的或叢生的草本植物：葉片、花梗、花瓣等。二、外植體的采樣和滅菌二、外植體的采樣和滅菌采樣即從原始植

3、株上采取相應(yīng)的器官作為接種的外植體。采樣的部位、地點(diǎn)和采樣時(shí)的氣候?qū)ν庵搀w的滅菌都會(huì)產(chǎn)生影響；外植體本身的發(fā)育狀況也會(huì)對(duì)滅菌產(chǎn)生影響。三、首次接種污染率的估算和對(duì)策三、首次接種污染率的估算和對(duì)策為了保持外植體的生命力，外植體的滅菌時(shí)間是有限制的，這就不可避免地帶來(lái)首次接種的污染問(wèn)題，有時(shí)污染率還會(huì)很高，限制無(wú)菌系的建立。滅菌效果為50%時(shí)，若每瓶接種3個(gè)外植體，則無(wú)污染的概率為0.53=0.125有污染的概率為0.875。最有效最經(jīng)濟(jì)的

4、辦法就是采用小容器單瓶單個(gè)接種，這可以最大限度地獲得無(wú)菌系。第二節(jié)誘導(dǎo)外植體生長(zhǎng)和分化再生力強(qiáng)的材料，獲得了無(wú)菌材料就等于建立了無(wú)菌培養(yǎng)系，而對(duì)于再生能力差的材料來(lái)說(shuō)，獲得了無(wú)菌材料還不等于建立起了無(wú)菌培養(yǎng)系，必須誘導(dǎo)外植體生長(zhǎng)和分化。一、頂芽和腋芽的發(fā)育（莖尖培養(yǎng)）一、頂芽和腋芽的發(fā)育（莖尖培養(yǎng)）植物再生的第一種方式（一）、小莖尖的培養(yǎng)外植體為莖頂0.20.3mm的區(qū)域，包含莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)和1~2對(duì)葉原基，外植體需要在解剖鏡下切割。（二）

5、普通莖尖培養(yǎng)外植體為比較大一些的莖尖，520mm的芽尖、側(cè)芽或帶節(jié)的莖切段。操作簡(jiǎn)便，易于成活，成苗時(shí)間短。（三）、外植體的發(fā)育和增殖途徑單個(gè)芽接種到培養(yǎng)基上之后，可以萌生出單個(gè)的苗或多個(gè)苗，后者在整體植株上可能決不發(fā)生。抑制頂端優(yōu)勢(shì)或誘導(dǎo)側(cè)芽萌動(dòng)，需要在培養(yǎng)基中添加細(xì)胞分裂素，促使外植體形成芽叢。原球莖最初是蘭花種子發(fā)芽過(guò)程中的一種形態(tài)學(xué)構(gòu)造，種子萌發(fā)初期，并不出現(xiàn)胚根，只是胚逐漸膨大，以后種皮的一端脹破，膨大的胚成小圓錐狀，稱原球莖

6、。（二）（二）、原球莖培養(yǎng)的意義、原球莖培養(yǎng)的意義蘭花高度雜合，種子繁殖會(huì)失去蘭花固有的品質(zhì)和風(fēng)格。將蘭花的莖尖作為外植體接種到培養(yǎng)基上后，在莖尖基部形成原球莖，將原球莖切割，會(huì)進(jìn)一步地形成原球莖，在一年內(nèi)，可以由一個(gè)個(gè)體繁殖出400萬(wàn)株基因型一致的蘭花個(gè)體，導(dǎo)致產(chǎn)生“蘭花工業(yè)”。原球莖培養(yǎng)已經(jīng)成為目前蘭花繁殖的標(biāo)準(zhǔn)方法。第三節(jié)第三節(jié)促進(jìn)中間繁殖體的增殖促進(jìn)中間繁殖體的增殖在誘導(dǎo)外植體生長(zhǎng)和發(fā)育過(guò)程所獲得的芽、不定芽、胚狀體和原球莖叫中

7、間繁殖體。在一定時(shí)期內(nèi)，讓培養(yǎng)材料以幾何級(jí)數(shù)遞增，叫中間繁殖體的增殖。增殖階段所用的培養(yǎng)基，一般與誘導(dǎo)外植體生長(zhǎng)和分化用的培養(yǎng)基相同。在無(wú)性系的快速繁殖過(guò)程中，無(wú)菌系的建立和外植體的分化再生只是快速繁殖的兩個(gè)必不可少的環(huán)節(jié)，但不是經(jīng)常要做的，而中間繁殖體的增殖卻從不停頓，視生產(chǎn)需要，確定生產(chǎn)規(guī)模。第四節(jié)第四節(jié)壯苗與生根壯苗與生根一、生根培養(yǎng)一、生根培養(yǎng)（一）生根培養(yǎng)基1、無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)1412高濃度的無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)有利于莖葉的分化，低濃度的無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)

8、有利于根的分化。2、糖12，利于組培苗由異養(yǎng)、半自養(yǎng)向自養(yǎng)轉(zhuǎn)化3、激素去掉細(xì)胞分裂素或只用低濃度的細(xì)胞分裂素，生長(zhǎng)素的濃度升高，一般使用NAA。二、光照二、光照10003000Lux，增強(qiáng)組培苗對(duì)水分脅迫和對(duì)疾病的抵抗力。三、開(kāi)瓶練苗三、開(kāi)瓶練苗增強(qiáng)對(duì)移栽后空氣濕度的適應(yīng)性。第五節(jié)組培苗出瓶種植和苗期管理一、水分一、水分1、半盆栽培2、地膜覆蓋3、加濕裝置二、栽培介質(zhì)二、栽培介質(zhì)疏松透氣，適宜的保水性，容易滅菌，不利于雜菌孳生草炭、珍珠