藥學(xué)獸醫(yī)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)

1、獸醫(yī)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn),山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院主講：劉遠(yuǎn)飛,動(dòng)物醫(yī)學(xué)、制藥專業(yè),本課程實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,實(shí)驗(yàn)一 藥理實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)實(shí)驗(yàn)二  不同給藥途徑對(duì)藥物效應(yīng)的影響實(shí)驗(yàn)三 藥物的協(xié)同作用和拮抗作用實(shí)驗(yàn)四 動(dòng)物機(jī)能狀態(tài)對(duì)藥物作用的影響 實(shí)驗(yàn)五 利多卡因和普魯卡因的表面麻醉作用觀察實(shí)驗(yàn)六 藥物敏感性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)七 磺胺類藥物內(nèi)服給藥后的血中藥物濃度測(cè)定實(shí)驗(yàn)八  

2、0;    鏈霉素急性毒性反應(yīng)及解救實(shí)驗(yàn)九 有機(jī)磷酸酯類中毒及解救,實(shí)驗(yàn)一 藥理實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí),目的掌握基本操作，鍛煉動(dòng)手、動(dòng)腦能力；更好地掌握藥理學(xué)基本理論知識(shí)；培養(yǎng)科學(xué)思維,基本要求 實(shí)驗(yàn)前：預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容并復(fù)習(xí)相關(guān)理論知識(shí)； 實(shí)驗(yàn)時(shí) 實(shí)驗(yàn)器材要妥善保管； 實(shí)驗(yàn)操作按步驟進(jìn)行，仔細(xì)觀察實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的現(xiàn)象，實(shí)事求是地做好記錄； 注意節(jié)約實(shí)驗(yàn)藥品； 維持良好的課堂紀(jì)律。 實(shí)

3、驗(yàn)后各組同學(xué)將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死，實(shí)驗(yàn)臺(tái)擦干凈，將實(shí)驗(yàn)方盤送回準(zhǔn)備室；值日生搞好實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生，將死亡動(dòng)物送至指定場所；書寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告。,實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書寫 題目 目的 原理 材料：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，器材，藥品 方法：用自己的語言簡單扼要描述出來； 結(jié)果：要求真實(shí)、清楚； 討論：將實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行比較、分析；實(shí)驗(yàn)中有哪些不足之處；結(jié)果異?；蚴〉脑颍?結(jié)論：將實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行歸納總結(jié)，應(yīng)帶有提示性質(zhì)。,實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本原則隨機(jī)原則使每一實(shí)驗(yàn)對(duì)象

4、都有同等的機(jī)會(huì)抽到實(shí)驗(yàn)組或?qū)φ战M中，除處理因素外其他因素盡可能均衡一致，從而抵消非實(shí)驗(yàn)因素的影響。對(duì)照原則組間對(duì)照：陰性對(duì)照，陽性對(duì)照，同因素不同水平對(duì)照；自身前后對(duì)照重復(fù)原則,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物動(dòng)物的選擇 小白鼠：適用于需大量動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)，如某些藥物的篩選，半數(shù)致死量的測(cè)定。也較適用于避孕藥實(shí)驗(yàn)、抗炎鎮(zhèn)痛藥實(shí)驗(yàn)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥實(shí)驗(yàn)、抗腫瘤藥及抗衰老藥實(shí)驗(yàn)等。 大白鼠：比較適用于抗炎藥物實(shí)驗(yàn)，血壓測(cè)定、利膽、利尿藥實(shí)驗(yàn)，也可用于進(jìn)行亞

5、急性和慢性毒性實(shí)驗(yàn)。,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物動(dòng)物的選擇 豚鼠：因其對(duì)組胺敏感，并易于致敏，故常被選用于抗過敏藥、平喘藥和抗組胺藥的實(shí)驗(yàn)。也常用于離體心臟、心房、腸管實(shí)驗(yàn)。又因它對(duì)結(jié)核敏感，常用于抗結(jié)核病藥的實(shí)驗(yàn)。 家兔：常用于觀察研究腦電生理作用，藥物對(duì)小腸的作用。由于家兔體溫變化敏感，也常用于體溫實(shí)驗(yàn)，用于熱原檢查。 狗：狗是記錄血壓，呼吸最常用的大動(dòng)物。還可利用狗做成胃瘺、腸瘺，以觀察藥物對(duì)胃腸蠕動(dòng)和分泌的影響。在進(jìn)行慢性毒性實(shí)驗(yàn)時(shí)，也常

6、采用狗。,動(dòng)物捉拿及固定方法小白鼠 右手提起鼠尾, 左手拇指和食指捏住雙耳及頭部皮膚，無名指、小指和掌心夾其背部皮膚及尾部,便可將小鼠完全固定。如圖1。 單手捉持，用拇指和食指抓住小鼠尾巴，用小指、無名指和手掌壓住尾根部，再用騰出的拇指、食指及中指抓住鼠雙耳及頭部皮膚而固定。如圖2。,圖2,圖1,動(dòng)物捉拿及固定方法豚鼠 豚鼠性情溫和不咬人，用手握住軀干即可。 家兔 可用一手抓住家兔頸背部皮膚，

7、將兔提起，另一手托其臀部，使兔呈坐位姿勢(shì)。在進(jìn)行仰位手術(shù)操作時(shí)，可用繩帶將其四肢仰位捆綁在兔手術(shù)臺(tái)上。頭部用兔頭固定夾固定。,動(dòng)物的給藥方法小白鼠灌胃法（i.g.）：以左手固定小鼠后，使其腹部朝上，頸部伸直。右手持配有灌胃針頭的注射器，自口角插入口腔，再從舌面沿上腭進(jìn)入食道。小鼠灌胃容量一般為0.1-0.3m1／10g。,動(dòng)物的給藥方法小白鼠 腹腔注射(i.p.)：以左手固定小鼠，方法同灌胃，右手持注射器，取30度角將針頭從下腹

8、部向頭端刺入腹腔。進(jìn)針部位不宜過高，刺入不宜太深，以免傷及內(nèi)臟。小鼠腹腔注射量一般為0.1-0.3ml／l0g。,×,√,肌肉注射（i.m.）：小鼠因肌肉較少，很少采用肌肉注射，若有需要可注射于股部肌肉，多選后腿上部外側(cè)，一處注射量不超過0.1mL 。,動(dòng)物的給藥方法小白鼠 皮下注射(s.c.)：用左手固定小鼠后，右手持注射器于拇指和食指捏起的皮膚處進(jìn)針即可。 靜脈注射(i.v.)：將小鼠置于特制的固定筒內(nèi)或倒置的大漏斗

9、下，讓其尾部露出。用酒精或二甲苯涂擦尾部，或?qū)⑹笪苍?0'C熱水中浸泡半分鐘使血管擴(kuò)張。左手拉尾端，右手持注射器將針頭刺入尾靜脈，推入藥液。,動(dòng)物的給藥方法家兔 灌胃：需兩人合作進(jìn)行。一人取坐位用兩腿夾持兔身，左手握家兔雙耳，右手抓住兩前肢。另一人將木制開口器橫插家兔口內(nèi)，壓住舌頭并固定之。取8號(hào)導(dǎo)尿管從開口器中部小孔插入食道。插管時(shí)如誤入氣管會(huì)出現(xiàn)動(dòng)物的掙扎和呼吸困難。也可將導(dǎo)尿管的外端浸入水中，如有氣泡吹出，表示插在氣管

10、內(nèi)，此時(shí)應(yīng)拔管重插。當(dāng)判明導(dǎo)尿管在食道以內(nèi)后，用注射器接通導(dǎo)尿管將藥液推入。,動(dòng)物的給藥方法家兔 皮下、肌肉、腹腔注射：給藥方法基本上同小鼠，唯針頭可稍大，給藥量可稍多。皮下與肌內(nèi)為0.5-1.0/mg，腹腔為1.0-5.0ml/mg 靜脈注射：將家兔置固定箱內(nèi)，撥去耳殼外緣的毛，選擇一條比較明顯的耳緣靜脈（兔耳外緣的血管為靜脈，中央的血管為動(dòng)脈，如圖） ，用酒精棉球涂擦皮膚，使血管顯露。用左手拇指和中指捏住兔的耳尖部，食指墊在兔

11、耳注射處的下面，右手持注射器，將針頭從近耳尖處刺入，當(dāng)確認(rèn)針頭在血管中后，將藥液推入。,實(shí)驗(yàn)二  不同給藥途徑對(duì)藥物效應(yīng)的影響,實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察不同給藥途徑對(duì)藥物效應(yīng)的影響。 實(shí)驗(yàn)材料 l.0ml注射器、針頭、小鼠灌胃針頭、燒杯、普通天平、3.5％硫酸鎂溶液,觀察指標(biāo) 動(dòng)物活動(dòng)增加情況、呼吸急促、反射亢進(jìn)、震顫、驚厥及死亡時(shí)間、炭末推進(jìn)率等。 實(shí)驗(yàn)方法 取禁食12h的昆明種小鼠3只，稱重，分別標(biāo)為對(duì)照組、灌胃組和

12、腹腔注射組按以下給藥： A：對(duì)照組：灌胃給生理鹽水0.2ml/10g； B：灌胃組：灌胃給3.5％硫酸鎂溶液0.2ml/10g； C：腹腔注射組：腹腔注射給3.5％硫酸鎂溶液0.2ml/10g。,給藥后注意觀察動(dòng)物的活動(dòng)情況，是否有肌肉松弛的表現(xiàn)。 15min后每只小鼠均灌胃給予5%炭末阿拉伯膠混懸液0.2ml。 炭末灌胃后15min，將小鼠脫臼處死，剖開腹腔，取出胃腸道。剪去附著在腸管上的腸系

13、膜,將腸管不加牽引地輕輕地平鋪在玻璃板上(玻璃板上滴少許鹽水)。以幽門為起點(diǎn),測(cè)量炭末在腸管內(nèi)的移動(dòng)距離和小腸(自幽門至回盲部)的全長,計(jì)算每只小鼠炭末的移動(dòng)距離占小腸全長百分率，比較3組動(dòng)物的活動(dòng)狀況和胃腸炭末推進(jìn)率有何不同。,實(shí)驗(yàn)結(jié)果 實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入下表中,不同途徑對(duì)藥物效應(yīng)的影響,,思考討論題  灌胃和腹腔注射給硫酸鎂的效應(yīng)有哪些不同？為什么？本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)臨床用藥有何提示？,實(shí)驗(yàn)三 藥物的協(xié)同作用和拮抗作用,目的

14、觀察激動(dòng)劑與拮抗劑之間的相互作用 材料兔子１只，0.05%硫酸阿托品注射液,0.1%鹽酸腎上腺素注液,0.2%硝酸毛果蕓香堿注射液,方法 取兔放于兔固定箱內(nèi)固定，避免陽光直射眼睛，用毛剪剪去兔兩眼睫毛，然后用瞳孔量尺測(cè)量瞳孔大小，連續(xù)三次，取平均值。 在兔左眼滴入０.2%毛果蕓香堿3滴，滴藥時(shí)用姆指和食指將下眼瞼提起,使成囊狀,再用中指壓住鼻淚管開口處,防止藥液流入鼻淚管而不起作用，再用右手滴入藥液。15分鐘后再測(cè)量瞳孔大小，連

15、續(xù)三次，取平均值，并進(jìn)行比較。 滴入毛果蕓香堿20分鐘后，分別在兩眼滴入0.1%腎上腺素3滴，15分鐘后測(cè)量兩瞳孔大小，連續(xù)3次，取平均值并進(jìn)行比較。 滴入腎上腺素15分鐘后，分別于兩眼滴入0.05%硫酸阿托品注射液3滴，15分鐘后觀察兩眼瞳孔變化，并測(cè)量其大小，連續(xù)3次，并取平均值,記錄,討論題 從實(shí)驗(yàn)結(jié)果中如何說明藥物的協(xié)同作用和拮抗作用？,實(shí)驗(yàn)四  動(dòng)物機(jī)能狀態(tài)對(duì)藥物作用的影響,實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私鈾C(jī)體在肝、

16、腎功能正常或異常時(shí)，對(duì)某些藥物的作用可能產(chǎn)生影響，從而認(rèn)識(shí)臨床用藥時(shí)應(yīng)該注  意的有關(guān)問題。實(shí)驗(yàn)要求掌握小白鼠肝、腎損傷病理模型的制備；掌握它們大體解剖的病理變化。認(rèn)識(shí)動(dòng)物機(jī)能狀態(tài)對(duì)藥物體內(nèi)過程的影響，從而引起藥物作用的變化，引申臨床用藥時(shí)的注意事項(xiàng)。,實(shí)驗(yàn)儀器、設(shè)備儀器：注射器，針頭，天平，鼠籠。藥物：四氯化碳、氯化高汞。濃度與注射劑量？實(shí)驗(yàn)內(nèi)容給健康小白鼠注射四氯化碳，造成肝損傷，后用硫噴妥鈉注射，與健康小白

17、鼠對(duì)照， 比較它們麻醉出現(xiàn)及維持的時(shí)間的不同；給健康小白鼠注射氯化高汞，造成腎損傷，后用鏈霉素注射， 與健康小白鼠對(duì)照，比較它們活動(dòng)情況的差異；解剖所有小白鼠，分別觀察它們肝和腎的病理變化，并與健康小白鼠比較。,實(shí)驗(yàn)五  利多卡因和普魯卡因的表面麻醉作用觀察,實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私饫嗫ㄒ蚝推蒸斂ㄒ虻谋砻媛樽碜饔玫牟町?，認(rèn)識(shí)如何選擇麻醉藥。實(shí)驗(yàn)要求掌握滴眼給藥的方法；在相同的時(shí)間點(diǎn)內(nèi)，分別觀察給予兩藥后，左、右眼表面

18、麻醉的情況；結(jié)合兩藥的藥理特性對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，并了解作為表面麻醉時(shí)臨床選藥的依據(jù)。實(shí)驗(yàn)儀器、設(shè)備儀器：固定箱，剪刀，滴管。,實(shí)驗(yàn)內(nèi)容取兔1只，放入兔固定箱內(nèi)，剪去睫毛，用兔須觸試角膜表面，觀察并記錄眨眼反射情況。在兔的左眼滴入利多卡因溶液；在右眼滴入普魯卡因溶液。均為1%。在給藥后2、5、10、20、30、40分鐘分別觀察比較兩眼的眨眼反射的差異。,實(shí)驗(yàn)六 藥物敏感性實(shí)驗(yàn),學(xué)習(xí)內(nèi)容藥物敏感實(shí)驗(yàn)——紙片法定量藥敏實(shí)驗(yàn)

19、——試管二倍稀釋法學(xué)習(xí)要求掌握兩種藥物敏感實(shí)驗(yàn)的原理、方法及注意事項(xiàng)。,抗菌藥物敏感性試驗(yàn)（AST，簡稱藥敏試驗(yàn)）：用于測(cè)試抗菌藥物在體外對(duì)病原微生物有無抑制作用。常用最低抑菌濃度（MIC）表示，即體外能夠抑制細(xì)菌生長的最低藥物濃度。通常根據(jù)MIC結(jié)合常用劑量時(shí)體內(nèi)該藥所能達(dá)到的血藥濃度，劃定細(xì)菌對(duì)各種抗生素敏感或耐藥的界限，給出S（敏感）、I（中介）、R（耐藥）等定性的結(jié)果，方便臨床用藥。 檢測(cè)病原菌對(duì)各種抗生素的敏感性，指導(dǎo)

20、臨床合理用藥。 用于流行病學(xué)調(diào)查及院內(nèi)感染的監(jiān)控，控制和預(yù)防耐藥菌株的流行。 為經(jīng)驗(yàn)用藥提供參考依據(jù)。方法：擴(kuò)散法（紙片法）、稀釋法（有瓊脂稀釋法和液體稀釋法）,藥敏紙片的人工制作定性濾紙用打孔器打成直徑6mm的圓片，每100片放入一小瓶中，160℃干熱滅菌1---2小時(shí)，或用高壓滅菌（6.8kg30min）后在60℃條件下烘干。（此應(yīng)提前做好）抗菌藥物的濃度（指有效藥物濃度）青霉素 200U/ml 其它抗菌藥物 1000ug/

21、ml磺胺類藥物10mg/ml 中草藥制劑 1g/ml慶大霉素4萬單位/ml，稀釋為1000單位/ml。（臨床上可按照藥品使用說明書，如上面標(biāo)明5克本品可拌50千克飼料，其換算方法為l克本品可拌10千克飼料，也就是1克本品拌l0000克飼料，相當(dāng)于藥品濃度為l克本品加l0000毫升蒸餾水。）,用無菌操作法將欲測(cè)的抗菌藥物溶液1ml，加入100片紙片中，置冰箱內(nèi)1—2小時(shí)，用下列方法烘干：培養(yǎng)皿烘干法：將浸有抗菌藥液的紙片攤

22、平在培養(yǎng)皿中，于37℃的溫箱內(nèi)保持2--3小時(shí)即可干燥，或放在無菌室內(nèi)過夜干燥。將制好的各種藥物紙片裝入無菌小瓶中，置冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆?。并用?biāo)準(zhǔn)敏感菌株做敏感性實(shí)驗(yàn)，記錄抑菌環(huán)的直徑。干燥的藥敏紙片可保存6個(gè)月。使用前用標(biāo)準(zhǔn)的敏感菌株做藥物敏感實(shí)驗(yàn)，若抑菌環(huán)比原來小，則表明該紙片已失效。,紙片法每組約7-8個(gè)平皿（每人1個(gè)），每個(gè)平皿約20毫升瓊脂培養(yǎng)基，即約200ml。按照每組500毫升瓊脂培養(yǎng)基、100毫升肉湯培養(yǎng)基準(zhǔn)備。每平

23、皿約4張紙片，每班約240張以上。將瓊脂培養(yǎng)基熔融后，每個(gè)平皿倒入約20毫升，晾干后，用玻棒蘸含菌棉球（玻棒、棉球均事先消毒）涂抹均勻后晾干。用鑷子夾紙片，每個(gè)平皿貼4張紙片，要使紙片全部緊貼培養(yǎng)基。為保證均勻，可于平皿背部劃出貼紙片點(diǎn)。36攝氏度培養(yǎng)過夜。測(cè)量寬度。,試管稀釋法每組2排試管，每排10支。共80支。將慶大霉素用肉湯稀釋液成64微克/毫升。每班20毫升即可。挑選10支無菌試管編號(hào)1—10。無菌加入1.0毫升肉

24、湯至第2到10管內(nèi)。將64微克/毫升慶大霉素液體，分別加1.0毫升至第1、2管，將第2管混合后取1.0毫升至第3管，依次至第9管，再從第9管取1.0毫升丟去，第10管不加抗生素作陽性對(duì)照。,試管稀釋法另準(zhǔn)備肉湯管不加抗生素、細(xì)菌作陰性對(duì)照。第1—10管分別加入已增菌6小時(shí)的細(xì)菌濃度約為105-106cfu/ml菌液1.0毫升（細(xì)菌菌齡為16-18小時(shí)，McFarland No 0.5管 細(xì)菌濃度1.5×108cfu/ml

25、，然后用用肉湯1：200稀釋）。培養(yǎng)和結(jié)果判讀：35℃培養(yǎng)16-24小時(shí)，肉眼觀察有無細(xì)菌生長。陽性可見混濁生長，陰性可見澄清。最終各試管慶大霉素濃度： 32 16 8 4 2 1 0.5 0.25 0 微克/毫升,實(shí)驗(yàn)七 磺胺類藥物內(nèi)服給藥后的血中藥物濃度測(cè)定,目的了解磺胺嘧啶非血管內(nèi)一次給藥后血藥濃度隨時(shí)間變化的規(guī)律。 原理已知磺胺嘧啶等磺胺類藥物在酸性環(huán)境下其苯環(huán)上的氨基（—NH2）將被離子化而生

26、成銨類化合物（—NH3+）。后者與亞硝酸鈉反應(yīng)可發(fā)生重氮化反應(yīng)進(jìn)而生成重氮鹽（—N＝N+—）。該化合物在堿性條件下可與麝香草酚生成橙黃色化合物。在525nm波長下比色，其光密度與磺胺嘧啶的濃度成正比。,根據(jù)上述原理,在給受試家兔一次靜脈注射一定劑量的磺胺嘧啶后,于不同時(shí)間點(diǎn)采集其靜脈血樣,采用比色法對(duì)各樣品中磺胺嘧啶的血藥濃度進(jìn)行定量分析,并以血藥濃度對(duì)相應(yīng)時(shí)間作圖,從而獲得磺胺嘧啶的靜脈給藥后的藥時(shí)曲。,動(dòng)物3kg左右家兔一只藥品

27、20％磺胺嘧啶（sulfadiazine，SD）、7.5％三氯醋酸、0.1％SD標(biāo)準(zhǔn)液、0.5％亞硝酸鈉、0.5％麝香草酚（用20％NaOH配制）、1000u/mL肝素生理鹽水、3％戊巴比妥鈉、蒸餾水。器材721分光光度計(jì)、離心機(jī)、磅秤、手術(shù)器械、動(dòng)脈夾、尼龍插管（或玻璃插管、硅膠管）、兔手術(shù)臺(tái)、注射器（5mL）及針頭、移液器（0.01～1mL）、吸頭、試管、離心管、試管架、玻璃記號(hào)筆、藥棉、紗布、計(jì)算機(jī)。,方法與步驟血中藥物濃

28、度測(cè)定麻醉：全麻或局麻均可。取兔一只（實(shí)驗(yàn)前禁食12小時(shí)不禁水），記錄體重和性別，耳緣靜脈注射3％戊巴比妥鈉0.8～1.0 mL/kg麻醉，仰位固定于兔手術(shù)臺(tái)上。手術(shù)：頸部手術(shù)區(qū)剪毛，切皮約6cm左右，鈍性分離皮下組織和肌肉，氣管插管，分離出頸總動(dòng)脈約2～3 cm左右，在其下穿兩根細(xì)線，結(jié)扎遠(yuǎn)心端，保留近心端。耳緣靜脈注射1000u/mL肝素1 mL/kg。插管：用動(dòng)脈夾夾住動(dòng)脈近心端，再于兩線中間的一段動(dòng)脈上剪一“V”型切口，

29、插入尼龍管，用線結(jié)扎牢固，以備取血用。,方法與步驟血中藥物濃度測(cè)定取血：打開動(dòng)脈夾放取空白血樣0.4mL，分別放入1號(hào)管（空白管）和2號(hào)管（標(biāo)準(zhǔn)管）各0.2mL搖勻靜置。而后腹腔注射20％SD 1.5mL/kg，分別于注射后5、15、30、45、75、120、180、240、300分鐘時(shí)由動(dòng)脈取血0.2mL加到含有7.5％三氯醋酸2.7mL的試管中搖勻。標(biāo)準(zhǔn)管加入0.1％SD標(biāo)準(zhǔn)液0.1mL，其余各管加蒸餾水0.1mL搖勻。顯色：

30、將上述各管離心5分鐘（1500-2000轉(zhuǎn)/分），取上清液1.5mL，加0.5％亞硝酸鈉0.5mL，搖勻后，再加入0.5％麝香草酚1mL后溶液為橙色。測(cè)定：于分光光度計(jì)在525nm波長下測(cè)定各樣品管的光密度值。計(jì)算血中藥物濃度：根據(jù)同一種溶液濃度與光密度成正比的原理，可用空白血標(biāo)準(zhǔn)管濃度及其光密度值求算出樣品管的磺胺藥物濃度。,結(jié)果與處理 將所得數(shù)據(jù)用計(jì)算機(jī)軟件繪制藥物的藥時(shí)曲線。注意事項(xiàng)每次取血前要先將插管中的殘血放掉。

31、每吸取一個(gè)血樣時(shí)，必須更換吸量管，若只用一支吸量管時(shí)必須將其中的殘液用生理鹽水沖凈。將血樣加到三氯醋酸試管中應(yīng)立即搖勻，否則易出現(xiàn)血凝塊。,實(shí)驗(yàn)八       鏈霉素急性毒性反應(yīng)及解救,實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察鏈霉素對(duì)小白鼠的毒性反應(yīng)，掌握其中毒機(jī)理；觀察氯化鈣的對(duì)抗作用，掌握其解毒機(jī)理。實(shí)驗(yàn)要求加深對(duì)抗菌藥物鏈霉素中毒機(jī)理的認(rèn)識(shí)；加深對(duì)氯化鈣藥理作用的認(rèn)識(shí)，從而認(rèn)識(shí)到氯化鈣作

32、為同類中毒機(jī)理引起的中毒的解毒藥的臨床意義。,實(shí)驗(yàn)儀器、設(shè)備注射器，針頭藥物：小白鼠腹腔注射鏈霉素。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容正常小白鼠六只，分為三組：a組小白鼠兩只，腹腔注射鏈霉素；b組小白鼠兩只，腹腔注射鏈霉素，出現(xiàn)中毒反應(yīng)后，再腹腔注射氯化鈣，觀察其反應(yīng)。c組小白鼠兩只，腹腔注射生理鹽水，作對(duì)照。觀察各組小白鼠的變化，分析中毒原因及氯化鈣對(duì)抗的原理。,實(shí)驗(yàn)九 有機(jī)磷酸酯類中毒及解救,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?有機(jī)磷酸酯類中毒的癥狀和血液膽堿酯酶活

33、力的抑制情況。握較阿托品和解磷定解救有機(jī)磷酸酯類中毒的作用原理。,實(shí)驗(yàn)原理 有機(jī)磷酸酯類中毒后，膽堿酯酶(chE)活性受到抑制，失去水解乙酰膽堿(Ach)的能力，Ach在體內(nèi)蓄積，引起一系列中毒癥狀(M樣、N樣和中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀)?？鼓憠A藥阿托品能拮抗Ach的作用，解除有機(jī)磷酸酯類中毒M樣癥狀。膽堿酯酶復(fù)活藥解磷定能使被有機(jī)磷酸酯類抑制的膽堿酯酶活性恢復(fù)，對(duì)M及N樣癥狀有效。兩藥合用可提高解救效果。,實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：家兔，2.5

34、～3.0kg儀器設(shè)備：恒溫水浴，分光光度計(jì)，試管架，中試管，吸管(0.2ml,lml，2ml，5m1)，濾紙，漏斗，兔盒，注射器(5ml，10m1)，測(cè)瞳孔尺，刀片，采血杯，動(dòng)脈夾，棉球。藥品：0.1％硫酸阿托品(atropine sulfate)，5％敵百蟲(dipterex)，1％肝素(heparin)，2.5％解磷定(pyraloxime methoiodide，PAM)。,實(shí)驗(yàn)方法家兔2只，稱重，觀察并記錄活動(dòng)情況、呼吸

35、(頻率、有無呼吸困難，呼吸道有無分泌等)、瞳孔大小、唾液分泌、大小便、肌張力及有無肌震顫等。用酒精棉球擦拭兔耳處緣靜脈，當(dāng)其充血明顯時(shí)，用刀片橫斷耳緣靜脈，使血液(0.5～1.0m1)自然流人采血杯(杯內(nèi)預(yù)先滴人2滴heparin，自然于燥后備用)中，并輕輕振蕩采血杯，防止凝血。依上述方法取甲乙兩兔耳靜脈血各一份，供測(cè)正常膽堿酯酶活性用。分別給甲乙兩兔耳緣靜脈注射5％dipterex 75mg／kg。按前述指標(biāo)觀察并記錄中毒癥狀。待