3-1動物微生物--病毒

1、病 毒,3000BC，埃及孟非思壁畫中長老患小兒麻痹癥 poliovirus,人類認(rèn)識病毒的歷史 人類認(rèn)識病毒：從認(rèn)識病毒性疾病開始的; 人類研究病毒：從研究植物煙草花葉病病毒開始的; 病毒的發(fā)現(xiàn) 1892年：俄國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)煙草花葉病病原體可通過 除菌濾器； 1898年：荷蘭細(xì)菌學(xué)家證實(shí)了煙草花葉病是由濾過 性病原體引起

2、的； 德國病毒學(xué)家發(fā)現(xiàn)了口蹄疫病原體有相同 的特性。,Fig. Leaf of tobacco and EM of tobacco mosaic virus.,病毒的概念：病毒是一類體積微小、結(jié)構(gòu)簡單，只含一種類型核酸(RNA或DNA），必須在活的易感細(xì)胞內(nèi)以復(fù)制的方式進(jìn)行增殖的非細(xì)胞型微生物。,體積微小，電子顯微鏡觀察；可通過濾菌器 結(jié)構(gòu)簡單：非細(xì)胞結(jié)構(gòu) 基因組：

3、只有一種核酸（RNA或DNA）嚴(yán)格活細(xì)胞內(nèi)寄生以復(fù)制方式繁殖對抗生素不敏感，耐冷不耐熱,病毒的特點(diǎn),病毒引起疾病的特點(diǎn),涉及面廣：75%由病毒引起；傳染性強(qiáng)、傳播迅速：如流感病毒；病死率高：如狂犬病病毒；后遺癥嚴(yán)重：如脊灰病毒；持續(xù)感染：如乙肝病毒；引起腫瘤：如艾滋病毒；致畸性：如風(fēng)疹病毒；特效藥少，對抗生素不敏感；預(yù)防是重點(diǎn)。,一、病毒的大小與形態(tài)：,病毒的大?。阂詎m計(jì)量： 大病毒200-

4、300nm 中病毒100nm~ 小病毒＜50nm測量方法：電鏡/超濾法/超速離心法 X射線衍射,第一節(jié) 病毒的基本性狀,微生物的大小比較,,,,,,,,,,,,,,,葡萄球菌(1000nm）,,,,,,,,,牛痘病毒300×

5、250nm,A,B,C,D,E,F,G,立克次體450nm,,,衣原體390nm,A、大腸桿菌噬菌體 ( 65 ×95nm ),B、腺病毒 (70nm ),C、脊髓灰質(zhì)炎病毒 (30nm ),D、乙腦病毒 ( 40nm ),E、蛋白分子 (10nm ),F、流感病毒 ( 100nm ),G、煙草花葉病毒,病毒的形態(tài)多數(shù)病毒呈球形或近似球形

6、，少數(shù)可為子彈狀、磚塊狀，噬菌體可呈蝌蚪狀, 植物病毒多數(shù)為桿狀,A. 痘病毒 （磚塊狀）B. 輪狀病毒C. HBVD. 噬菌體E. 流感病毒F. 狂犬病毒（子彈狀）,HBV,HIV,二、病毒的結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成1、病毒的核心 由DNA或RNA組成。是決定病毒遺傳、變異、增殖、傳染等生命活動的基礎(chǔ)物質(zhì)。2、病毒的衣殼：是由許多蛋白質(zhì)亞單位，即多肽鏈構(gòu)成的殼粒組成。作用：保護(hù)病毒核酸免受核酸酶的破壞；能吸附于易感細(xì)胞

7、表面，協(xié)助病毒侵入細(xì)胞引起感染；具有抗原性。3、病毒的包膜：由類脂、蛋白質(zhì)和糖類構(gòu)成。作用：保護(hù)病毒衣殼；并與病毒吸附宿主細(xì)胞有關(guān)；具有抗原性。,病毒體結(jié)構(gòu)模式,病毒的結(jié)構(gòu),核心：核酸衣殼：由殼粒（多肽）組成包膜：由宿主細(xì)胞膜或核膜組成 鑲嵌有包膜子粒（刺突）,,,殼粒組成衣殼時，可形成三種對稱方式,①20面體立體對稱：,二十面體對稱型 (e.g., adenovirus),②螺旋對稱：,( to

8、bacco mosaic virus),,nucleic acid,,protein,③復(fù)合對稱：,bacteriophage poxvirus,三、病 毒 的 增 殖,1、病毒的復(fù)制 病毒的增殖方式稱為復(fù)制。 其過程可分為：吸附、穿入、脫殼、生物合成及成熟釋放等五個步驟。2、包涵體： 某些病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)增殖后，能在胞核或胞質(zhì)內(nèi)形成圓形或橢圓形、嗜酸性或嗜堿性的斑塊，成為包涵體。,

9、,病毒的增殖過程,四、病毒的干擾現(xiàn)象1、干擾現(xiàn)象：兩種病毒同時或短期內(nèi)先后感染同一動物或組織、細(xì)胞時，一種病毒抑制另一種病毒復(fù)制增殖的現(xiàn)象，稱為病毒的干擾現(xiàn)象。 該現(xiàn)象在異種病毒、同種病毒之間均可發(fā)生。在預(yù)防接種時，為避免預(yù)苗接種無效，應(yīng)注意干擾現(xiàn)象的發(fā)生。。,五、病毒的抵抗力與變異性,病毒的滅活：病毒受理化因素作用后失去感染性，稱為滅活。滅活的病毒仍保留抗原性、紅細(xì)胞吸附、血凝、紅細(xì)胞融合等活性。,物理因素：,１．

10、耐冷不耐熱，56℃ 30分鐘可使其滅活，貯藏在–70℃以下保存數(shù)月或數(shù)年。,２．對電離輻射和紫外線敏感。,3．PH 6-8穩(wěn)定，9病毒會迅速滅活。,2.有包膜病毒對脂溶劑敏感。,3.對甘油抵抗力強(qiáng),用于送檢材料的保存。,化學(xué)因素,1.對氧化劑、鹵素、醇類敏感。,病毒的抵抗力,一、耐冷怕熱二、紫外線敏感三、氧化劑敏感四、包膜病毒對脂溶劑敏感五、耐甘油,第二節(jié) 病毒的的致病性與免疫性,一、病毒的感染方式與類型病毒的感染：

11、病毒侵入機(jī)體并在易感細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖，與機(jī)體發(fā)生相互作用的過程,病毒的感染和傳播方式：,一、水平傳播,病毒在人群不同個體間的傳播,,,水平傳播,1、經(jīng)皮膚傳播：昆蟲叮咬——乙腦病毒2、經(jīng)呼吸道傳播——流感病毒3、經(jīng)消化道傳播——甲肝病毒4、性傳播——HIV5、血液傳播——HIV，HBV6、多途徑傳播,,垂直傳播,通過胎盤或產(chǎn)道，病毒由母親傳給胎兒的方式,胎盤：風(fēng)疹病毒、HIV、HBV,產(chǎn)道:HIV,2.病毒感染的類型,病毒感染

12、,隱性感染,顯性感染,持續(xù)性感染,慢性感染,潛伏感染,慢發(fā)病毒感染（遲發(fā)感染）,,,急性感染,,持續(xù)性感染,病毒感染的類型,病毒數(shù)量少，毒力弱，機(jī)體免疫力強(qiáng)——隱性感染病毒數(shù)量多，毒力強(qiáng)，機(jī)體免疫力弱——顯性感染,病毒感染的類型,不發(fā)病，但機(jī)體可獲得特異性免疫 向外播散病毒，成為重要傳染源,急性感染：病愈后體內(nèi)無病毒 持續(xù)性感染,隱性感染,顯性感染,,,,,,,,慢性感染：感染后病毒未清除,病

13、程長，病毒可檢出 如HBV,潛伏感染：在組織器官內(nèi)不復(fù)制，無癥狀,可反復(fù)激活，急性發(fā)作病毒只有在急性發(fā)作時才被檢出如單純胞疹病毒,慢發(fā)病毒感染：,潛伏期長，發(fā)病后為亞急性進(jìn)行性直至死亡,HIV,,,,,,,,,持續(xù)性感染,二、病毒的致病性,直接損害宿主細(xì)胞1、溶解細(xì)胞作用2、細(xì)胞膜改變3、細(xì)胞轉(zhuǎn)化4、細(xì)胞凋亡,病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖引起細(xì)胞裂解死亡多見于無包膜病毒：脊灰病毒、鼻病毒、腺病毒,1、影響細(xì)胞的生命活力,（1

14、）溶細(xì)胞效應(yīng)（殺細(xì)胞性感染）：,,,,,,CPE: cytopathic effect,溶細(xì)胞感染,（2）細(xì)胞膜改變 非溶細(xì)胞性病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖后雖不引起細(xì)胞溶解死亡，但能引起宿主細(xì)胞改變。①引起感染細(xì)胞與未感染細(xì)胞融合，病毒從感染細(xì)胞進(jìn)入臨近正常細(xì)胞，形成多核巨細(xì)胞。②細(xì)胞膜出現(xiàn)新抗原。③細(xì)胞膜通透性異常。,穩(wěn)定狀態(tài)感染,,,,,,新抗原,,,,細(xì)胞核,原因：病毒基因的整合,,,,細(xì)胞核,,,3、細(xì)胞轉(zhuǎn)化：細(xì)

15、胞癌變,4、細(xì)胞凋亡,,2、抗病毒免疫反應(yīng)導(dǎo)致宿主的免疫損傷（1）體液免疫的損害作用:（2）細(xì)胞免疫的損害作用:（3） 免疫系統(tǒng)的功能被抑制:,三、抗病毒免疫（一）天然免疫1、屏障作用2、巨噬細(xì)胞的作用3、干擾素——獲得性非特異性免疫（二）抗病毒的體液免疫1、中和作用;2、調(diào)理作用；（三）抗病毒的細(xì)胞免疫,,（四）、干擾素：定 義：由病毒或其他干擾素生劑刺激機(jī)體細(xì)胞所產(chǎn)生的一種具有抗病毒等作用的糖蛋白。種 類：

16、 ?-干擾素 人白細(xì)胞； ?-干擾素 人成纖維細(xì)胞 ； ?-干擾素 T細(xì)胞抗病毒特點(diǎn)：種的特異性、間接性、廣譜性抗病毒機(jī)理：細(xì)胞受干擾素作用后，合成抗病毒蛋白抗病毒意義：早期中斷病毒復(fù)制，阻止病毒擴(kuò)散,第三節(jié) 病毒感染的檢查和防止原則,一、病毒感染的檢查（一）標(biāo)本的采取 首先應(yīng)注意標(biāo)本采集與送檢的特殊性，其主要原則是（1）用于分離病毒或檢測病毒及其核酸的標(biāo)本，在采集和送檢時，應(yīng)根據(jù)病毒的嗜組織性，采集不

17、同部位的標(biāo)本。（2）用于分離培養(yǎng)的標(biāo)本，應(yīng)加抗生素抗菌處理，并做到無 菌操作。（3）標(biāo)本應(yīng)冷藏或置于50%甘油鹽水中立即送檢，或置于-70Co低溫保存。（4）欲檢查病毒抗體，則應(yīng)分別取早期和恢復(fù)期雙份血清，以檢查抗體效價的變化。,（二）形態(tài)學(xué)檢查1、普通光學(xué)顯微鏡檢查2、電子顯微鏡檢查,（三）病毒的分離培養(yǎng)動物接種-動物模型雞胚接種細(xì)胞培養(yǎng),器官培養(yǎng),移植培養(yǎng),細(xì)胞培養(yǎng),原代細(xì)胞培養(yǎng),二倍體細(xì)胞培養(yǎng),傳代細(xì)胞培養(yǎng),,,組織培養(yǎng)

18、,,,（四）免疫學(xué)檢查,中和試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),血凝抑制試驗(yàn),免疫熒光技術(shù),,,,,二 、 病毒感染的防治原則（一）免疫學(xué)預(yù)防和治療1、人工主動免疫,滅活疫苗：,乙腦疫苗,狂犬疫苗,流感滅活疫苗,HAV等,減毒活疫苗：,脊髓灰質(zhì)炎疫苗,麻疹疫苗,腮腺炎疫苗,風(fēng)疹疫苗,HAV疫苗,其他疫苗：基因工程疫苗，核酸疫苗 ，亞單位疫苗等,,,,,2、人工被動免疫 常用的生物制劑有胎盤球蛋白、丙種球蛋白、轉(zhuǎn)移因子等。

19、 注射丙種球蛋白對甲型肝炎、麻疹、脊髓灰質(zhì)炎等有緊急預(yù)防作用，可使接觸者不出項(xiàng)癥狀或出項(xiàng)癥狀輕微。,病毒,穿入,,,脫殼,,核酸復(fù)制、轉(zhuǎn)錄 及蛋白質(zhì)合成,,裝配,,吸附,釋放,,（二）藥物和生物制劑防治,金剛烷胺-------抑制病毒脫殼-----預(yù)防感冒核苷類藥物------皰疹凈，阿昔洛韋，AZT病毒蛋白酶的抑制物----indinavir其他-----干擾素及干擾素誘生劑，中草藥抗病毒基因治療----asO