植物保護(hù)專業(yè)畢業(yè)論文番茄白粉

1、本科畢業(yè)論文論文題目番茄防御酶活性與番茄抗白粉病相關(guān)性研究學(xué)院草業(yè)學(xué)院專業(yè)植物保護(hù)畢業(yè)屆別姓名指導(dǎo)教師職稱大學(xué)教務(wù)處制年六月番茄防御酶活性與番茄抗白粉病相關(guān)性研究番茄防御酶活性與番茄抗白粉病相關(guān)性研究摘要:植物在病害或者環(huán)境脅迫條件下會(huì)產(chǎn)生酶促性的保衛(wèi)性生化反應(yīng)，酶活性測(cè)定表明：未接種番茄幼苗中各品種PAL活性無(wú)明顯變化，接種白粉菌后抗病品種和感病品種的PAL活性均有升高；未接種番茄幼苗2并于病害特征明顯后（高感品種發(fā)病率達(dá)到50%時(shí)）

2、，調(diào)查統(tǒng)計(jì)各品種發(fā)病率和病情指數(shù)。1.2.2酶液提取及活性測(cè)定1.2.2.1POD和PPO活性檢測(cè)方法實(shí)驗(yàn)所需化學(xué)試劑：0.05moll磷酸緩沖液(PH為5.5)；0.05mo11愈創(chuàng)木酚溶液2%的雙氧水溶液；0.lmol1的兒茶酚溶液；20%三氯乙酸溶液。實(shí)驗(yàn)儀器用：精密數(shù)顯恒溫水浴鍋；精密酸度計(jì)；分光光度計(jì)。實(shí)驗(yàn)步驟:（1）粗酶液的制備，煎取5g葉片，剪碎后放入早置于冰浴中預(yù)冷過的研缽中，加入適量的磷酸緩沖液后研磨成勻漿，將勻漿完全

3、轉(zhuǎn)入離心管中后在3000rmin轉(zhuǎn)速下離心l0min，上清液轉(zhuǎn)入25m1容量瓶中，定容后在低溫下保存?zhèn)溆谩?2)POD活性的測(cè)定，取3支試管，依次加入2.9m10.05mo11的磷酸緩沖液；1.0m12%的H2O2；1m10.05mo11的愈創(chuàng)木酚溶液，將其中一支試管在沸水中煮5min為對(duì)照。作兩組重復(fù)實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)體系在加入酶液后立即于37℃水浴中保溫1Smin，然后迅速轉(zhuǎn)入冰浴中，立即加入2.0m120%三氯乙酸溶液終止反應(yīng)，然后將反應(yīng)

4、混合溶液在5000rmin轉(zhuǎn)速下離心10min，適當(dāng)稀釋后在分光光度計(jì)上470nm波長(zhǎng)下檢測(cè)吸光值。(3)PPO活性檢測(cè)與POD基本相似，只是反應(yīng)體系為3.9m1磷酸緩沖液1ml兒茶酚和0.1ml酶液，水浴中的反應(yīng)時(shí)間為10min，在525nm波長(zhǎng)下檢測(cè)吸光值。酶活力計(jì)算：以每分鐘在該波長(zhǎng)下變化0.01為1個(gè)酶活力單位，計(jì)算公式如下：酶活力(U)=△AD0.01wt單位為:Ugfw1.2.2.2PAL活性測(cè)定取供試番茄葉片1g加PVP0

5、.1g5mM巰基乙醇硼酸緩沖液4mL和少量石英砂于研缽中研磨成勻漿4℃下8000rmin離心15min取上清液0.1mL加底物0.02M苯丙氨酸硼酸緩沖液(pH8.8)3mL蒸餾水2.9mL30℃保溫30min對(duì)照以蒸餾水代底物290nm比色以每min在290nm處吸收變化0.01所需酶量為一單位(相當(dāng)于每毫升反應(yīng)液中形成1μg肉桂酸)。2結(jié)果與分析2.1供試品種間PAL（苯丙氨酸解氨酶）活性與白粉病抗性的關(guān)系2.1.1PAL活性的在品

6、種間的動(dòng)態(tài)變化PAL活性測(cè)定結(jié)果表明(圖1)未接種番茄幼苗中各品種PAL活性無(wú)明顯變化，接種白粉菌后抗病品種和感病品種的PAL活性均有升高并且均出現(xiàn)兩個(gè)峰值，第一個(gè)峰值出現(xiàn)在0.5d~1d，此峰幅度均小，最高為134.70Ug?hFW（高抗品種TOMO629D，0.5d），比其對(duì)照平均值升高24.3%；第二峰均在第7d，此峰幅度較大，高抗品種TOMO629D酶活性最高（186.40Ug?hFW），比其對(duì)照均值升高72.1%。接種第10d