細(xì)胞觀察-顯微鏡門戶-中國(guó)顯微圖像網(wǎng)

1、細(xì)胞觀察,倒置顯微鏡觀察：活細(xì)胞觀察普通光學(xué)顯微鏡觀察：化學(xué)染色標(biāo)本 如HE染色，免疫組化染色標(biāo)本等掃描電鏡觀察：細(xì)胞表面形貌透射電鏡觀察：細(xì)胞內(nèi)部超微結(jié)構(gòu),倒置相差顯微鏡觀察,原理　　　活細(xì)胞無(wú)色透明，當(dāng)光波通過(guò)它時(shí)，顏色和亮度變化不大?！　　∠嗖铒@微鏡是利用細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)密度的不同而對(duì)光產(chǎn)生折射率有差異的原理，使肉眼不能分辨的相位差變?yōu)榭煞直娴恼穹睿疵靼挡睿?倒置相差顯微鏡觀察,調(diào)節(jié)光軸,倒置相差顯微鏡觀察,合軸調(diào)節(jié)

2、,倒置相差顯微鏡觀察(暗反差),,倒置相差顯微鏡觀察(明反差),,活細(xì)胞熒光染色觀察,活細(xì)胞丫啶橙染色呈綠色凋亡細(xì)胞與溴化乙錠共染呈橙色,掃描電鏡觀察,,,透射電鏡觀察,,血球計(jì)數(shù)板法,制備細(xì)胞懸液：細(xì)胞密度＞104/ml, 細(xì)胞過(guò)多時(shí)需適當(dāng)稀釋,單個(gè)細(xì)胞率>95%。加樣：混懸細(xì)胞，取少許細(xì)胞懸液，從計(jì)數(shù)池一側(cè)加入，不要溢出或出現(xiàn)氣泡。計(jì)數(shù)：10倍物鏡下計(jì)數(shù)四角大方格內(nèi)的細(xì)胞，壓線者只計(jì)左邊線和上邊線。計(jì)算：細(xì)胞數(shù)/ml=

3、（4四大格細(xì)胞總數(shù)／4）×104×稀釋倍數(shù),細(xì)胞密度調(diào)整,稀釋公式：C1·V1＝C2·V2稀釋前細(xì)胞密度C1，溶液體積V1稀釋后細(xì)胞密度C2，溶液體積V2,細(xì)胞活力測(cè)定－臺(tái)盼藍(lán)染色法,制備單個(gè)細(xì)胞懸液：105～106／ml0.4%臺(tái)盼藍(lán)染色1 min (9滴細(xì)胞懸液＋1滴0.4%臺(tái)盼藍(lán))， 3min 內(nèi)計(jì)數(shù)用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板鏡下分別計(jì)數(shù)活細(xì)胞（染料拒染）和死細(xì)胞（呈淡藍(lán)色）計(jì)算細(xì)胞活力：

4、 活細(xì)胞率（％）＝［活細(xì)胞數(shù)／（活細(xì)胞數(shù)＋死細(xì)胞數(shù)）］×100,,細(xì)胞生長(zhǎng)曲線測(cè)定－計(jì)數(shù)法,,,細(xì)胞ＨＥ染色,細(xì)胞標(biāo)本制備　懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞：涂片法　貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞：鋪片法（細(xì)胞生長(zhǎng)在蓋玻片上）細(xì)胞固定　取出細(xì)胞片，PBS浸洗，95％酒精固定15min（４℃下可保存１周）,細(xì)胞ＨＥ染色,PBS洗１次蘇木精染5～10min自來(lái)水漂洗稀鹽酸酒精分色約3秒淡氨水使胞核藍(lán)化數(shù)秒自來(lái)水漂洗伊紅染5～10min過(guò)70％、

5、80％ 、90％酒精，各1min過(guò)95%酒精2次，各1min；100％酒精2次，各1min過(guò)二甲苯3次，各1min，中性樹(shù)脂封片,細(xì)胞HE染色觀察,,,細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)習(xí),8人一組，提供2塊計(jì)數(shù)板提供的細(xì)胞懸液密度為106／ml,4倍稀釋計(jì)數(shù)(3份培養(yǎng)液＋1份細(xì)胞懸液)按10倍稀釋方法，制備3種密度的細(xì)胞懸液，即105、104 、103 ／ml，稀釋方法：9份培養(yǎng)液＋1份細(xì)胞懸液， 根據(jù)提供的移液器（50 、 100 、 200