P4VP-b-PEG-b-P4VP嵌段共聚物用于毛細(xì)管電泳分離堿性蛋白質(zhì).pdf

1、復(fù)雜生物體系中的蛋白質(zhì)的分離分析是一項(xiàng)具有挑戰(zhàn)性的任務(wù)，是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究中的一個重要部分，需要最先進(jìn)的分離技術(shù)和復(fù)雜精細(xì)的儀器裝置。毛細(xì)管區(qū)帶電泳（capillary zone electrophoresis，CZE）及其衍生出的一系列分離技術(shù)不僅具有分離效率高、分析時間短的優(yōu)點(diǎn)，而且對樣品和試劑消耗極少，非常適合蛋白質(zhì)的分離分析，在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中有巨大的應(yīng)用潛力。利用毛細(xì)管電泳（capillary electrophoresis，

2、CE）技術(shù)分離蛋白質(zhì)的應(yīng)用研究，主要集中于人體體液、農(nóng)產(chǎn)品和藥物的分析上，主要面對的問題是被分析蛋白在毛細(xì)管壁的吸附問題。毛細(xì)管壁對蛋白質(zhì)的吸附會造成一系列危害：如樣品回收率降低，基線不穩(wěn)定，結(jié)果的重復(fù)性變差，定性定量困難等，最終還將極大地影響毛細(xì)管柱的使用壽命。因此人們一直在探索各種方法，以減小毛細(xì)管電泳過程中的蛋白質(zhì)吸附現(xiàn)象，提高分離效率，物理吸附涂層方法由于涂層的制作簡單且具備一般分離所需的穩(wěn)定性而備受青睞。本文對陽離子聚合物物理

3、涂層的設(shè)計(jì)合成與其在分離堿性蛋白質(zhì)時的效果及機(jī)理進(jìn)行了研究。主要內(nèi)容如下：
　　 ⑴使用原子轉(zhuǎn)移自由基聚合（ATRP）方法合成了具有不同聚（4-乙烯基吡啶）（P4VP）嵌段長度的聚（4-乙烯基吡啶）-b-聚乙二醇-b-聚（4-乙烯基吡啶）（P4VP-b-PEG-b-P4VP）三嵌段聚合物，并用核磁共振氫譜及凝膠滲透色譜對其結(jié)構(gòu)及分子量分布進(jìn)行了表征。
　　 ⑵將P4VP-b-PEG-b-P4VP用作毛細(xì)管內(nèi)壁的物理涂層材

4、料，對堿性混合蛋白質(zhì)進(jìn)行了分離，并研究了緩沖液pH對涂層性能的影響，比較了不同P4VP嵌段長度的三嵌段聚合物涂層的性能，以及和兩嵌段聚合物涂層相比的優(yōu)缺點(diǎn)。三嵌段聚合物P4VP-b-PEG-b-P4VP具有pH敏感性，通過緩沖液pH的調(diào)控可以控制電滲流的速度，調(diào)節(jié)待分析組分的分離度和分離時間。
　　 ⑶測量了裸管和三嵌段聚合物涂層管中蛋白質(zhì)與毛細(xì)管壁間的靜電相互作用，證明了陽離子聚合物涂層對堿性蛋白質(zhì)吸附的屏蔽作用，并進(jìn)一步測算