磨盤草微量元素的初級(jí)形態(tài)分析

1、<p>　　磨盤草微量元素的初級(jí)形態(tài)分析</p><p>　　作者：張燕，張洪斌，陳忠蔭，林偉，胡海強(qiáng)</p><p>　　【摘要】 　　目的對(duì)磨盤草微量元素的初級(jí)形態(tài)進(jìn)行分析。方法用電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定了磨盤草中Ca，Mg，Zn，F(xiàn)e，Mn，Cu，Ni，Cr的含量，并進(jìn)行了初級(jí)形態(tài)研究。結(jié)果初級(jí)形態(tài)結(jié)果表明，8種元素在原藥中的含量特征如下：Ca&gt;Mg&am

2、p;gt;Zn&gt;Fe&gt;Mn&gt;Cu&gt;Ni&gt;Cr；總提取率中Mg超過(guò)了50%，其次是Ni（39.05%），其他元素均在35%以下；各元素殘留率中，Zn、Cu、Ca的頭煎殘留率最高（86.48%，80.63%，80.54%)，Mg的頭煎殘留率最低(60.08%)；Cu的顆粒吸附率最高。結(jié)論為進(jìn)一步探討磨盤草微量元素與藥效之間的關(guān)系提供了參考依據(jù)。 </p>&

3、lt;p>　　【關(guān)鍵詞】 磨盤草； 微量元素； 初級(jí)形態(tài)</p><p>　　Abstract：ObjectiveTo analyze the primary speciation of trace elements in Abutilon indicum (L.) Sweet. MethodsThe contents of Ca, Mg, Zn, Fe, Mn, Cu, Ni and Cr of Abu

4、tilon indicum (L.) Sweet were determined by ICP-MS，and their primary speciation was studied. ResultsThe results of primary speciation showed that the content characters of eight trace elements in primary sample were as f

5、ollows: Ca&gt;Mg&gt;Zn&gt;Fe&gt;Mn&gt;Cu&gt;Ni&gt;Cr. The total extraction rate of Mg was more than 50% , the next </p><p>　　Key words：Abutilon indicum (L.) Sweet; Trace elements

6、; Primary speciation</p><p>　　研究和開(kāi)發(fā)中草藥內(nèi)的微量元素是現(xiàn)代中醫(yī)臨床的重要課題?，F(xiàn)代研究表明，中草藥中的微量元素的含量與形態(tài)影響其藥理、毒理、生物學(xué)活性和生物利用率［1］， 因此對(duì)元素作用的研究，不但要對(duì)元素的總量進(jìn)行分析，更重要的是對(duì)元素的存在形態(tài)進(jìn)行研究［2］。磨盤草Abutilon indicum (L.) Sweet為錦葵科苘麻屬植物，為一年生或多年生亞灌木狀草本，全

7、草入藥。甘淡平，疏風(fēng)清熱、益氣通竅、祛痰、利尿，用于治療感冒、久熱不退、流行性腮腺炎、耳鳴、耳聾、肺結(jié)核、小便不利。全草含有萜類、甾類、酚類、黃酮苷、氨基酸、有機(jī)酸和糖等。生于砂地、曠野或路旁，分布于廣西、廣東、海南、貴州、云南、福建、臺(tái)灣等地［3］。目前對(duì)磨盤草的研究集中在藥理作用、化學(xué)成分方面［4，5］，而對(duì)磨盤草微量元素形態(tài)分析的研究未見(jiàn)報(bào)道。因此，本研究結(jié)合中草藥中微量元素形態(tài)分析的層次模式，用ICP-MS法對(duì)磨盤草的8種微量元

8、素進(jìn)行了初級(jí)形態(tài)分析,計(jì)算了有關(guān)形態(tài)分析參數(shù)，為磨盤草藥效功能的進(jìn)一步的開(kāi)發(fā)與利用、探究微量元素的含量和形態(tài)與藥效之間的關(guān)系提供科學(xué)依據(jù)。</p><p><b>　　1 器材</b></p><p>　　1.1 儀器X7型電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(美國(guó)熱電公司)；1810-B型石英雙重純水蒸餾器（上海雷磁儀器廠）；FA1604型電子天平（上海天平儀器廠）；TG16

9、臺(tái)式高速離心機(jī)（湖南儀器儀表總廠離心機(jī)廠）；SKP-01電熱恒溫干燥箱（湖北省黃石市醫(yī)療器械廠）；0.45 μm濾膜（上海市新亞凈化器件廠）。</p><p>　　試驗(yàn)中所用玻璃器皿均用10% HNO3浸泡清洗。</p><p>　　1.2 試劑HNO3，HClO4均為優(yōu)級(jí)純；實(shí)驗(yàn)水均為二次蒸餾水；鎂、鈣、鐵、鋅、鉻、錳、鎳、銅標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(濃度均為100 mg·L-1)，使用時(shí)

10、配制至所需濃度。</p><p>　　1.3 材料磨盤草（采自五指山市文化村）,經(jīng)瓊州學(xué)院生命科學(xué)系林偉教授鑒定為磨盤草Abutilon indicum (L.) Sweet全草。</p><p><b>　　2 方法</b></p><p><b>　　2.1 樣品制備</b></p><p&g

11、t;　　2.1.1 干樣的制備 將磨盤草用二次蒸餾水洗凈，置于60℃烘箱中烘干至恒重，在藥物粉碎機(jī)上粉碎，過(guò)40目篩，得到原藥樣品。</p><p>　　2.1.2 煎液制備將原藥樣品準(zhǔn)確稱取50 g（原藥A）置于燒杯中加二次蒸餾水250 ml，浸泡1 h，煮沸，然后用文火保持微沸40 min。稍冷，用4層紗布濾擰，再用約20 ml熱二次蒸餾水淋洗3次，濾液濃縮后定容于50 ml容量瓶中，得到頭煎殘?jiān)麭和相當(dāng)

12、于原藥1.00 g·ml-1頭煎液C。</p><p>　　殘?jiān)麭烘干稱重，1/5留著用于直接測(cè)試的頭渣B試樣。另4/5加二次蒸餾水100 ml，煮沸，文火保持微沸30 min，用紗布過(guò)濾同前操作，得殘?jiān)麯及二煎液E。E濃縮定容于40 ml（E為相當(dāng)于原藥1.00 g·ml-1二煎液）。將殘?jiān)麯烘干稱重，作為測(cè)定的二煎殘?jiān)麯試樣。</p><p>　　取C、E溶液各25

13、 ml，充分混勻，高速離心之后，離心液用0.45 μm微孔濾膜抽濾，濾液為F (相當(dāng)于原藥0.50 g·ml-1 )，即可溶態(tài)。離心及濾膜上殘?jiān)娓?，?zhǔn)確稱重，得到用于測(cè)試的顆粒物G試樣。</p><p><b>　　2.2 樣品分析</b></p><p>　　2.2.1 測(cè)定條件 以鎂、鈣、鐵、鋅、鉻、錳、鎳、銅等8種元素，濃度分別為0,20，50，

14、100 μg·l-1的混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，按ICP-MS儀器的優(yōu)化工作參數(shù)(見(jiàn)表1)，測(cè)定信號(hào)強(qiáng)度，建立各元素的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。表1 ICP-MS工作參數(shù)（略）</p><p>　　2.2.2 樣品測(cè)定準(zhǔn)確稱取原藥A、殘?jiān)麭、D、顆粒物G各0.5 g置于50 ml燒杯中，另取C10.00 ml、E10.00 ml分別濃縮至5ml。在A、B、D 和G，濃縮的C、E中分別加入混合酸(HNO3∶HClO4 =

15、 4∶1) 20 ml，放置過(guò)夜，在電爐上消化，加熱先產(chǎn)生棕色煙霧再蒸發(fā)至白煙冒盡，溶液澄清透亮近干，加入2%HNO3，冷卻，轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶中，定容備用。按工作條件用電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定元素含量。</p><p><b>　　3 結(jié)果</b></p><p>　　3.1 分析方法的精密度和準(zhǔn)確度采用ICP-MS建立的分析方法，標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性相關(guān)系數(shù)為0

16、.999 7～1.000 0之間。該方法測(cè)定磨盤草中微量元素含量的RSD為0.3%～4.8%。該方法測(cè)定了國(guó)家一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)灌木枝葉（GBW07603）中微量元素含量，回收率在89.2%～110.6%之間。由此可見(jiàn)，實(shí)驗(yàn)所建立的分析方法線性好，精密度高，可靠性好。表2 磨盤草浸出情況（略）</p><p>　　3.2 藥物浸出情況按初級(jí)形態(tài)分析流程得到的頭渣B、二渣D和顆粒物G烘干稱重，得到磨盤草浸出結(jié)果如表2

17、所示。其中：</p><p>　　頭煎浸出率(%) =（WA-WB）/ WA×100%</p><p>　　總浸出率(%)=(WA-WD)/WA×100%</p><p>　　3.3 初級(jí)形態(tài)分析</p><p>　　3.3.1 初級(jí)形態(tài)測(cè)定結(jié)果在測(cè)出磨盤草原藥中微量元素種類和含量的基礎(chǔ)上，再測(cè)定按初級(jí)形態(tài)分析流程制備

18、的試樣中各成分的含量。結(jié)果見(jiàn)表3。表3 初級(jí)形態(tài)分析測(cè)定結(jié)果（略）</p><p>　　3.3.2 形態(tài)分析參數(shù)根據(jù)周天澤對(duì)形態(tài)分析的探討［6］，各形態(tài)分析參數(shù)導(dǎo)出如下:令Wi、Pi(i=A、B......G)分別表示某級(jí)份的總重量及某元素在該級(jí)份中的含量。</p><p>　　頭煎提取率T1= (WC×PC)/(WA×PA)×100%；二煎提取率T2=

19、(WE×PE)/(WA×PA)×100%；頭煎殘留率L1= (WB×PB)/(WA×PA)×100%；二煎殘留率L2= (WD×PD)/(WA×PA)×100%；顆粒吸附率U=(WG×PG)/(WA×PA)×100%；總提取率T = T1+T2；頭煎浸留比Q1= T1/L1；二煎浸留比Q2= T2/L2；總浸留比Q =

20、 T/L2。</p><p>　　本實(shí)驗(yàn)固體級(jí)份單位為g，液體級(jí)份體積以ml計(jì)，含量單位均為μg/g或μg/ml。同時(shí)根據(jù)物料平衡，T1+L1=T1+T2+L2=100%。由形態(tài)分析結(jié)果算出有關(guān)參數(shù)見(jiàn)表4。表4 初級(jí)形態(tài)分析參數(shù)（略）</p><p><b>　　4 討論</b></p><p>　　初級(jí)形態(tài)分析目的是探討中草藥服用劑型中哪

21、些元素在發(fā)揮作用。中藥水煎液(湯劑)是傳統(tǒng)常用劑型，水煎液中微量元素的含量才是實(shí)際服入的量，因此研究中藥水煎液中微量元素的存在形態(tài)對(duì)探討中藥真正的有效成分及藥理作用具有重要意義。從表3的結(jié)果可見(jiàn)，8種元素在原藥、渣和煎汁中的含量差別很大。其總含量特征如下：Ca&gt;Mg&gt;Zn&gt;Fe&gt;Mn&gt;Cu&gt;Ni&gt;Cr，說(shuō)明中草藥中不同元素具有一定比例，處于

22、一個(gè)相對(duì)的元素平衡體系中。和原藥相比，除鎂外，其他元素頭渣和二渣的含量均大于原藥含量，表明這些元素以某種結(jié)合形態(tài)吸附在渣體中不易浸出，相應(yīng)鎂更易浸出。在表3的結(jié)果中，所有元素的顆粒物濃度均較大，說(shuō)明它們明顯吸附于膠體上。從顆粒物來(lái)看，鈣、鎂、鐵的濃度較高,可能與它們水解產(chǎn)生的沉淀吸附在顆粒上有關(guān)。</p><p>　　形態(tài)分析參數(shù)在于對(duì)形態(tài)作出定量的表征，反映某一元素在藥渣及煎汁中的不同分布，各參數(shù)中以提取率和浸

23、留比最重要。提取率表示該藥的實(shí)際服用部分，是其藥效或毒性的作用量，所以水煎液中微量元素提取率是制定中藥劑量或考察其毒性的重要依據(jù)。浸留比則為該元素發(fā)揮藥效的標(biāo)度，浸留比最大的元素，可以認(rèn)為是該藥中作用最大的元素［6］。表4表明，各元素頭煎提取率雖然都高于二煎提取率，但二煎提取率仍然較大，說(shuō)明傳統(tǒng)中藥煎煮方式(一般為3次)是有其科學(xué)道理的?？偺崛÷手兄挥蠱g超過(guò)了50%，其次是Ni（39.05%），其它元素的提取率較低，小于35%。而各元

24、素殘留率中，Zn，Cu，Ca的頭煎殘留率最高，其次是Mn，F(xiàn)e，Cr，Ni， Mg的頭煎殘留率最低（60.08%），表明藥渣中還有相當(dāng)多可再利用的微量元素。鎂的浸留比最大，說(shuō)明這8種元素中鎂為作用最大元素或是最特征的元素。顆粒吸附率最大的是銅，其次是錳、鐵，可能與其水解有關(guān)。</p><p>　　研究磨盤草微量元素的初級(jí)形態(tài)，可為進(jìn)一步探討磨盤草微量元素與藥效之間的關(guān)系提供依據(jù)。</p><p

25、><b>　　【參考文獻(xiàn)】</b></p><p>　?。?］弓曉峰，謝明勇，楊妙峰，等.黑靈芝中微量元素的形態(tài)分布［J］.理化檢驗(yàn)·化學(xué)分冊(cè)，2005，41（7）：461.</p><p>　　［2］胡雪梅，郭榮輝，李 暉. 川芎中鋅、錳、鐵、鈣、鎂元素的次級(jí)形態(tài)分析［J］.微量元素與健康研究, 2005, 22(1): 16.</p>

26、<p>　?。?］中華本草編委會(huì). 中華本草（第14卷）［M］. 上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999：336.</p><p>　?。?］劉娜，賈凌云，孫啟時(shí). 中藥磨盤草的化學(xué)成分［J］.沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，26(3):196.</p><p>　?。?］Matlawska I，Sikorska M. Flavonoid compounds in the flower