褶皺臂尾輪蟲遺傳學(xué)材料屬性的初步探究.pdf

1、褶皺臂尾輪蟲(Brachionus plicatili)是輪蟲動物門(Rotifera)中的廣鹽種，廣泛分布于內(nèi)陸淡水和沿海咸水生境中。其在水生生態(tài)系統(tǒng)中占有非常重要的地位，也是海水水產(chǎn)養(yǎng)殖中重要的育苗餌料，因此具有良好的經(jīng)濟(jì)價值和研究意義。
　　 褶皺臂尾輪蟲來源廣泛、個體微小、生活力強(qiáng)、培養(yǎng)條件寬松，是一種理想的實驗室研究材料。生活史特征為孤雌生殖(parthenogenesis)和有性生殖(sexual reproduct

2、ion)世代交替進(jìn)行。在孤雌生殖階段，雌性個體經(jīng)有絲分裂產(chǎn)生非需精卵(amictic egg)，進(jìn)行“克隆生殖”；在有性生殖階段，雌性個體經(jīng)減數(shù)分裂產(chǎn)生單倍體需精卵(mictic egg)，未受精的需精卵發(fā)育成雄性個體(male)，受精的需精卵則發(fā)育形成卵殼較厚的休眠卵(resting egg)。休眠卵能抵御外界不良環(huán)境并在適宜條件下孵化進(jìn)入新一輪的孤雌生殖階段。
　　 本研究通過對褶皺臂尾輪蟲的實驗室觀察培養(yǎng)，能夠利用簡單的培

3、養(yǎng)設(shè)備和條件，實現(xiàn)實驗室人工培養(yǎng)、完成世代交替生活史、有效地誘導(dǎo)產(chǎn)生有性生殖和休眠卵的孵化；探索了適用于遺傳學(xué)研究的自交和雜交試驗方法；分別培養(yǎng)獲得連續(xù)自交后代和雜交后代；利用FIASCO法構(gòu)建褶皺臂尾輪蟲基因組微衛(wèi)星DNA(microsatellite DNA)富集文庫，篩選得到了數(shù)量較多的微衛(wèi)星DNA標(biāo)記，并選取一部分標(biāo)記設(shè)計引物，利用微衛(wèi)星DNA標(biāo)記在聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)的分型情況，對雜合親本連續(xù)自交后代純度以及雜交試驗

4、中親代位點標(biāo)記在子代中的分離規(guī)律進(jìn)行了觀察檢測。其中，在某一微衛(wèi)星位點雜合的親本經(jīng)連續(xù)自交產(chǎn)生的F4代在該位點分別出現(xiàn)純合子和雜合子，且純合子占85％左右；雜交試驗中，親代標(biāo)記在予代中發(fā)生了分離，并且符合遺傳學(xué)分離規(guī)律，從而確定了雜交試驗方法的可行性，初步探討了褶皺臂尾輪蟲染色體倍性問題。本研究認(rèn)為，褶皺臂尾輪蟲易培養(yǎng)、有良好的研究價值和經(jīng)濟(jì)價值、適用于實驗室遺傳操作，具備成為遺傳學(xué)研究材料的潛能；但是距離成為一種成熟的遺傳學(xué)研究材料甚