滸苔(Ulva prolifera)生殖遺傳學(xué)的初步研究.pdf

1、滸苔(Ulva prolifera)屬于綠藻門(Chlorophyta)、綠藻綱(Chlorphyceae)、石莼目(Ulvales)、石莼科(Ulvaceae)、石莼屬(Ulva)，是引起大規(guī)模綠潮暴發(fā)的致因種之一。近些年來(lái)，綠潮滸苔的發(fā)生范圍和頻率呈遞增趨勢(shì)，引起全世界的廣泛關(guān)注和學(xué)術(shù)界的研究熱潮。
　　 通過(guò)對(duì)2010-2011年間采自于蘇北海域的46個(gè)群體共135個(gè)滸苔(Ulvaprolifera)及緣管滸苔(Ulva

2、linza)的單株藻體做生殖細(xì)胞的放散測(cè)試，對(duì)鞭毛數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)以確定藻體的世代類型，研究發(fā)現(xiàn)：(1)滸苔和緣管群體內(nèi)同時(shí)存在孢子體世代和配子體世代，主要由于單性生殖和配子融合生殖導(dǎo)致的；(2)不同采樣時(shí)間和采樣地點(diǎn)，其孢子體世代和配子體世代比例不同，顯示出其存在著連續(xù)生殖現(xiàn)象。
　　 本文發(fā)現(xiàn)了一種新型的滸苔單倍體生活史，并對(duì)這種生活史進(jìn)行了相關(guān)研究。在大量滸苔單株培養(yǎng)中，發(fā)現(xiàn)編號(hào)為200910096的孢子體藻體，其放散出的四鞭

3、毛、負(fù)趨光性的孢子，其萌發(fā)藻體成熟后可放散四鞭毛、負(fù)趨光性的生殖細(xì)胞，并不經(jīng)過(guò)融合生殖發(fā)育為單倍體藻體，形成了一個(gè)連續(xù)循環(huán)的生活史類型。在本實(shí)驗(yàn)中(1)對(duì)連續(xù)4個(gè)子代藻體放散的生殖細(xì)胞鞭毛數(shù)目和趨光性進(jìn)行了檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)生殖細(xì)胞都為四鞭毛，且都具有負(fù)趨光性；(2)通過(guò)蘇木精染色技術(shù)，對(duì)各子代藻體的體細(xì)胞染色體進(jìn)行核型鑒定，發(fā)現(xiàn)藻體都為單倍體(n=8)；(3)對(duì)子二代、子三代和子四代的ITS序列進(jìn)行擴(kuò)增測(cè)序結(jié)果顯示，三代的ITS序列全部相同。

4、以上研究表明了這種生活史是穩(wěn)定存在的，且不同于之前發(fā)現(xiàn)的滸苔自然生活史、單性生殖生活史和無(wú)性生殖生活史。
　　 為研究滸苔有性生殖的遺傳模式，本文以采自于不同地區(qū)的7個(gè)滸苔群體為研究對(duì)象，每個(gè)群體取4個(gè)單株藻體，提取全基因組DNA，對(duì)定位于葉綠體基因組的rbcL序列和定位于核基因組的ITS序列進(jìn)行擴(kuò)增，每個(gè)單株都挑取4個(gè)以上的克隆進(jìn)行測(cè)序，共獲得了142條rbcL序列和130條ITS序列，對(duì)各序列的長(zhǎng)度、變異位點(diǎn)和信息位點(diǎn)數(shù)、群