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文檔簡介
1、浙江大學博士學位論文EGCG與銅離子的相互作用及其細胞生物學行為姓名:于海寧申請學位級別:博士專業(yè):茶學指導教師:沈生榮20040201摘要據調查,在歐美,人類因患前列腺癌引起的死亡率現已位居第二,僅次于肺癌。據流行病學調查、細胞和動物實驗研究初步證實E G C G 具有一定的預防、治療前列腺癌的作用。銅離子是人體必需的微量元素,過量積累或缺乏會導致多種疾病的發(fā)生,包括癌癥。金屬離子與兒茶素的相互作用是近年來茶葉生物化學和生物無機化學的
2、研究熱點,而銅離子與E G C G 的相互作用及其細胞生物學行為至今國內外少有報道。本文利用前列腺癌細胞( 包括激素依賴型前列腺癌細胞L N C a P 和非激素依賴型前列腺癌細胞P C 一3 ) 培養(yǎng)體系研究了E G C G 、C u ”對前列腺癌細胞生長的影響和損傷機理;E G C G 與C u 2 + 共存對前列腺癌細胞生長的影響,及兩者生物學活性的變化;細胞培養(yǎng)條件下E G C G 含量變化速度;E G C G 、C u 2 +
3、 存在及兩者共存時,F - 1 2 培養(yǎng)液發(fā)光強度的動態(tài)變化和自由基的產生情況。M T T 法實驗結果發(fā)現,E G C G 與C u 2 + 均能抑制L N C a P 細胞和P C .3 細胞的生長,并與劑量呈正相關,E G C G 與C u 2 + 抑制作用的最佳作用時間均為2 4 小時;加入C u “,只有E G C G 與c u ”的相對濃度較高時,E G c G 對c u 2 + 誘導的L N C a P 細胞毒性有一定的抑制
4、作用,否則促進細胞死亡;在P c 一3 細胞培養(yǎng)體系中,c u ”存在下,E G C G 對C u ”誘導的P C - 3 細胞的毒性明顯減弱;L N C a P 細胞培養(yǎng)體系中,當后加入C u ”時,C u 2 + 對E G C G 誘導的細胞毒性有極顯著促進作用,在同樣水平下,C u 2 + 對E G C G 誘導的P C - 3 細胞毒性無顯著影響。增加P C .3 細胞體系中E G C G的濃度,C u 2 + 對E G C G
5、 誘導的P C .3 細胞毒性有促進作用。而在E G C G 存在下,C u 2 + 對L N C a P 細胞的毒性顯著降低。P C 3 細胞體系中,低濃度E G C G 對c u 2 +誘導的細胞毒性明顯減弱,但高濃度E G C G 對低濃度C u 2 + 誘導的P C .3 細胞的毒性無影響,只有高濃度C u 2 + 誘導的P C .3 細胞的毒性才能被抑制。當后加入E G C G時,只有E G C G 與C u z + 濃度比達
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