紅鰭笛鯛血清免疫球蛋白的部分理化特性及紅鰭笛鯛對弧菌疫苗的免疫應(yīng)答.pdf

1、采用親和層析法，分離純化紅鰭笛鯛血清免疫球蛋白(IgM)。用羊IgG免疫紅鰭笛鯛產(chǎn)生特異性抗體，免疫擴(kuò)散法測得其血清效價為1：8，將偶聯(lián)羊IgG的瓊脂糖裝柱純化紅鰭笛鯛血清中的特異性抗體。經(jīng)SDS-PAGE電泳，圖譜顯示二條主區(qū)帶，即重鏈和輕鏈。重、輕鏈分子量分別為80kD和29kD；圖譜中除二條主區(qū)帶外，無雜蛋白帶，說明純化的血清IgM的純度很高。免疫擴(kuò)散法，發(fā)現(xiàn)紅鰭笛鯛血清IgM只與兔抗紅鰭笛鯛血清IgM出現(xiàn)沉淀反應(yīng)；而人IgM只與

2、羊抗人IgM血清發(fā)生沉淀反應(yīng)，這些表明紅鰭笛鯛血清IgM與人IgM之間無免疫同源性。 收集正常生活下的非免疫紅鰭笛鯛的膽汁和皮膚粘液，比較它們與分離純化的紅鰭笛鯛血清IgM之間的同源性，發(fā)現(xiàn)膽汁和皮肽粘液都與兔抗紅鰭笛鯛血清IgM的抗血清有沉淀反應(yīng)。結(jié)果表明：膽汁和皮膚粘液中存在的IgM的某些理化性質(zhì)同血清中的IgM相似，由此推斷，紅鰭笛鯛的膽汁和皮膚粘液中IgM的來源可能與血清中IgM具有一定的免疫同源性。 采用單向

3、放射免疫擴(kuò)散法，測出紅鰭笛鯛未免向．清中TgM的含量達(dá)達(dá)13.5mg／ml，當(dāng)用羊IgG免疫紅鰭笛鯛時，血清抗體效價達(dá)到25.8mg／mL。 用溶藻弧菌的滅活全菌苗作為免疫原，分別以1×lO8<'8>cfu／mL，l×10<'9>cfu／mL和9×10<'9>cfu／mL三個濃度免疫接種紅鰭笛鯛，通過測定受免魚血清中凝集抗體效價和魚體攻毒試驗(yàn)，探討了紅鰭笛鯛對滅活的溶藻弧菌菌苗的免疫應(yīng)答狀況。結(jié)果表明為：①免疫后從第7d車開始，

4、3組免疫魚血清中都檢測到抗體。注射疫苗1×10<'8>cfu／mL和1×10<'9>cfu／mL組都在第28d抗體效價達(dá)到最高，分別為1：98.4和1：135.3；而注射疫苗9×10<'9>cfu／mL組血清抗體效價升高很快，第2周抗體效價就達(dá)到最高的水平1：384；直到第6周3組魚血清抗體效價仍然保持在較高水平。②在免疫后50天，用濃度為1.0×lO<'9>cfu／mL的溶藻弧菌懸液進(jìn)行攻毒，測得的免疫保護(hù)率分別為56％、69％、80