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文檔簡介
1、目的 應用間接免疫熒光方法,以不同動物及人組織為底物檢測大皰性皮膚病的循環(huán)抗體沉積情況,從中篩選出敏感性強且容易獲取的底物,為天皰瘡、大皰性類天皰瘡靶抗原分子水平的研究,如免疫印跡研究,靶抗原的表位研究等提供材料來源.方法 一、實驗材料:1.病例資料:天皰瘡患者血清10例,大皰性類天皰瘡患者血清5例,所有病例均來自中國醫(yī)科大學第一臨床學院皮膚科,均經(jīng)臨床、病理及免疫病理證實.2.對照資料:正常人血清3例.來自本院血庫健康獻血員.以上血清
2、均以每份20μl分裝后置于-30℃冰箱保存待檢.3.底物資料:實驗所需動物(豚鼠、小鼠、大鼠、家兔)均購自中國醫(yī)科大學動物實驗中心,斷頸處死后分別取食道、小腸、膀胱、舌等組織,切成0.8×0.8cm大小,立即OCT包埋,液氮速凍,置于-70℃冰箱中保存?zhèn)溆?正常人皮膚取自本院外科整形手術(shù)切除多余的皮膚,人臍帶取自解放軍第二零二醫(yī)院產(chǎn)房,均用上述方法保存?zhèn)溆?4.試劑:FITC標記的羊抗人IgG抗體,稀釋為1:80.二、染色方法:間接免疫
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