腸淋巴再灌注對腸缺血再灌注大鼠多器官損傷的影響.pdf

1、目的：腸缺血-再灌注(ischemia/reperfusion，I/R)損傷是嚴(yán)重創(chuàng)傷、重癥休克、外科手術(shù)等導(dǎo)致的組織器官損傷，由于腸道屏障功能障礙導(dǎo)致細(xì)菌和內(nèi)毒素移位、大量炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子釋放，從而引起遠(yuǎn)隔器官如心、肺、腎等的結(jié)構(gòu)損傷和功能障礙，誘發(fā)多器官功能障礙綜合癥(multiple organ dysfunction syndrome，MODS)，甚至多器官衰竭。因此探討其發(fā)生發(fā)展的病理生理機(jī)制及臨床防治成為危重病醫(yī)學(xué)領(lǐng)域共同

2、矚目的研究熱點。本研究提出“腸淋巴再灌注”(mesenteric lymph reperfusion，MLR)的概念，在復(fù)制大鼠腸FR損傷模型的基礎(chǔ)上，觀察MLR對腸I/R.大鼠血壓、存活率以及器官功能的影響；同時，從氧自由基、一氧化氮、中性粒細(xì)胞、膜泵功能等方面揭示MLR對腸I/R大鼠多器官損傷的作用機(jī)制，探討腸淋巴途徑在腸缺血-再灌注損傷發(fā)病學(xué)中的意義。 方法：Wistar雄性大鼠均分4組：假手術(shù)組(Sham)：僅麻醉與手術(shù)

3、；腸淋巴再灌注組(MLR)：夾閉腸系膜淋巴管(MLD)1h，再灌注2h；腸缺血再灌注組(IR)：夾閉腸系膜上動脈(SMA)1h，再灌注2h；腸淋巴再灌注+腸缺血再灌注組(MLR+IR)：夾閉MLD和SMA 1h，再灌注2h。24只大鼠用于24h存活率觀察。24只大鼠觀察3h期間平均動脈血壓(MAP)變化；再灌注2h后留取動脈血檢測AST、ALT、BUN、Cre、LDH-1、CK-MB等反映肝、腎、心肌功能與損傷的生化指標(biāo)以及pH、PaO

4、2、PaCO2等反映肺呼吸功能的血氣指標(biāo)；選擇固定位置，留取肺、肝、腎、心肌組織，制備病理切片，觀察肺、肝、腎、心肌形態(tài)學(xué)變化；同時制備肺、腎、肝、心肌勻漿，用于檢測MDA含量、SOD活性、NO水平、NOS活性、MPO活性、細(xì)胞膜ATPase活性等指標(biāo)。結(jié)果：研究結(jié)果顯示，Sham、MLR、IR、MLR+IR組大鼠24h存活率分別為100％、83.3％、66.7％、0％，前3組存活率顯著高于MLR+IR組。結(jié)扎SMA或MLD前10min

5、，各組間MAP無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)；IR組在結(jié)扎后20min、30min、40min、45min、50min、60min顯著高于MLR+IR組，于20min、35min、40min、50min顯著高于Sham組；再灌注后，MLR組和Sham組MAP變化不明顯，IR組和MLR+IR組MAP迅速下降，后逐漸回升，除45min、50min、65min其它時間點IR均顯著低于Sham組、除再灌注后45min、85min其它時間點IR均顯

6、著低于MLR組，MLR+IR組則于再灌注后所有時間均顯著低于MLR、Sham以及IR組。MLR+IR組AST、ALT、BUN、Cre、LDH-1和CK-MB均顯著高于Sham組、MLR組、IR組，且IR組的這些指標(biāo)顯著高于Sham組、MLR組；反映呼吸功能的動脈血氣指標(biāo)MLR組與Sham組均無顯著性差異(P>0.05)；與Sham組和MLR組比較，IR組動脈血pH顯著增高、PaCO2顯著降低(P＜0.05)；與Sham組、MLR組和IR

7、組比較，MLR+IR組動脈血pH及PaO2顯著降低、PaCO2顯著增高(P＜0.05-0.01)。形態(tài)學(xué)觀察顯示Sham組與MLR組肺、肝、心、腎結(jié)構(gòu)基本正常，IR組各臟器有一定的組織學(xué)損傷，而MLR+IR組則可見炎癥、出血、核濃縮、破碎等的組織學(xué)損傷。腸缺血再灌注或腸淋巴再灌注后2h，MLR組肺、腎、肝、心肌勻漿的MDA含量、SOD活性、NO含量、NOS活性、MPO活性、Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase、Mg2+-A

8、TPase以及Ca2+-Mg2+-ATPase活性均與Sham組均無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。IR組肺、腎、心肌勻漿以及MLR+IR組肺、腎、肝、心肌勻漿MDA含量均顯著高于Sham組與MLR組，且MLR+IR組肺、腎、肝、心肌勻漿MDA含量均顯著高于IR組(P＜0.01-0.05)；IR組肺、腎、心肌勻漿以及MLR+IR組肺、腎、肝、心肌勻漿SOD活性均顯著低于Sham組與MLR組，且MLR+IR組肺、腎、肝、心肌勻漿SOD活性均顯

9、著低于IR組(P＜0.01-0.05)。IR組肺、腎、肝勻漿以及MLR+IR組肺、腎、肝、心肌勻漿NO含量均顯著高于Sham組與MLR組，且MLR+IR組肺、腎、肝、心肌勻漿NO含量均顯著高于IR組(P＜0.01-0.05)；IR組肝勻漿以及MLR+IR組肺、腎、肝、心肌勻漿NOS活性均顯著高于Sham組與MLR組，且MLR+IR組肺、腎、心肌勻漿NOS活性顯著高于IR組(P＜0.01-0.05)。IR組腎、肝、心肌勻漿MPO活性顯著高

10、于Sham組，肺、腎、肝勻漿MPO活性顯著高于MLR組：MLR+IR組肺、腎、肝、心肌勻漿MPO活性均顯著高于Sham組、MLR組與IR組(P＜0.01-0.05)。IR組及MLR+IR組肺、腎、肝、心肌勻漿Na+-K+-ATPase活性均顯著低于Sham及MLR組，且MLR+IR組肺、腎、肝、心肌勻漿Na+-K+-ATPase活性均顯著低于IR組(P<0.01-0.05)；IR組肺勻漿Ca2+-ATPase、肝勻漿Mg2+-ATPas

11、e活性低于MLR組，IR組腎、肝、心肌勻漿Ca2+-ATPase活性和肺、腎、心肌勻漿Mg2+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性，以及MLR+IR組肺、腎、肝、心肌勻漿Ca2+-ATPase、Mg2+-ATPase及Ca2+-Mg2+-ATPase活性均顯著低于Sham及MLR組，且MLR+IR組肺、腎、肝、心肌勻漿Ca2+-ATPase、肺、腎、心肌勻漿Mg2+-ATPase活性及肺、心肌勻漿ca2+-Mg2+-AT