小柴胡湯預(yù)處理對(duì)大鼠肝內(nèi)膽管上皮I-R損傷保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的：通過(guò)觀察中藥小柴胡湯預(yù)處理對(duì)肝臟缺血再灌注損傷大鼠肝內(nèi)膽管上皮的病理變化、相關(guān)生化指標(biāo)(Glu、GGT、ALP)及膽管上皮細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)的變化，探討在肝臟缺血再灌注損傷時(shí)肝內(nèi)膽管損傷的機(jī)制及防護(hù)措施的理論依據(jù)；為肝膽手術(shù)特別是肝移植術(shù)后膽道并發(fā)癥的防治提供理論依據(jù)。 方法：采用大鼠原位肝缺血再灌注模型，膽總管插管連續(xù)引流膽汁。將48只Wistar雄性大鼠隨機(jī)分成4組：假手術(shù)組(S0組)、實(shí)驗(yàn)組1(EM1組)、實(shí)驗(yàn)組2

2、(EM2組)和小柴胡湯預(yù)處理組(XP組)；觀察在不同時(shí)限下(缺血30min，再灌注60min和缺血30min，再灌注120min)膽汁與血清中堿性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)的活性變化、膽汁中葡萄糖含量(Glu)變化、肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的病理形態(tài)和凋亡指數(shù)(AI)變化，以及中藥小柴胡湯灌胃預(yù)處理對(duì)此缺血再灌注損傷的影響。 結(jié)果： 1.缺血再灌注損傷導(dǎo)致膽汁中Glu含量、GGT、ALP活性顯著升高(P<0.0

3、1)；小柴胡湯預(yù)處理組(XP組)較實(shí)驗(yàn)組2(EM2組)膽汁中Glu含量、GGT、ALP活性升高幅度均小，差異具有高度顯著性(P<0.01)；缺血30min，再灌注60min組(EM1組)與假手術(shù)組(S0組)大鼠血清中GGT、ALP活性無(wú)顯著性差異(P>0.05)；膽管上皮細(xì)胞的凋亡指數(shù)(AI)在缺血再灌后明顯升高，差異具有高度顯著性(P<0.01)： 2.膽汁中與血清中GGT、ALP活性升高不同步：從缺血再灌注前(S0組)，到缺

4、血灌注后60min(EM1組)，血清中GGT、ALP活性無(wú)顯著變化(P>0.05)，相比較而言，從缺血再灌注前(S0組)，到缺血再灌注后60min(EM1組)，膽汁中GGT、ALP活性升高較為顯著(P<0.01)；從缺血再灌注后60min到120min，膽汁中GGT、ALP活性無(wú)顯著變化(P>0.05)； 3.缺血再灌注損傷后的120min之內(nèi)，膽汁中ALP與GGT活性、Glu含量以及發(fā)生凋亡的膽管上皮細(xì)胞數(shù)量能反映膽管損傷情況

5、，小柴胡湯預(yù)處理后能減輕膽管上皮細(xì)胞損傷：膽汁中Glu含量、膽汁GGT、ALP活性升高幅度降低，發(fā)生凋亡膽管上皮細(xì)胞數(shù)量也明顯減少。 4.各組標(biāo)本行HE染色，光鏡下觀察：各組肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞排列整齊，無(wú)明顯變形、脫落等改變；細(xì)胞基本形態(tài)完整，胞漿染色均勻，細(xì)胞核染色無(wú)明顯差異，也無(wú)明顯固縮變形。 結(jié)論：在缺血再灌后膽汁中的相關(guān)生化指標(biāo)水平能夠反映肝內(nèi)膽管上皮損傷情況；肝臟缺血再灌注損傷能促進(jìn)肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞凋亡的發(fā)生，小