人骨髓間充質干細胞集落培養(yǎng)及其生物學特性的研究.pdf

1、第一軍醫(yī)大學碩士學位論文人骨髓間充質干細胞集落培養(yǎng)及其生物學特性的研究姓名：陳偉申請學位級別：碩士專業(yè)：血液病學指導教師：李江琪20040515序言骨髓組織除含有造血干細胞以外，還含有骨髓間充質干細胞(mesenchymalstemcells，MSCs)。早期分離培養(yǎng)時，發(fā)現(xiàn)其形狀呈成纖維細胞樣而稱其為“成纖維細胞集落形成單位”或“骨髓基質成纖維細胞”。隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)其對骨髓血系細胞起支持誘導作用，又因其來自于骨髓基質，因而稱

2、其為“骨髓基質細胞”。近來因其在不同的誘導條件下，具有向中胚層組織細胞分化的能力，如向成骨細胞、成軟骨細胞、脂肪細胞、成纖維細胞等分化的能力，又稱其為“間充質干細胞”、“間充質祖細胞”或“骨源性干細胞”。MSCs因其獨特的優(yōu)勢：易于分離和體外培養(yǎng)擴增、易于外源基因轉染和表達、向多種組織和細胞類型分化的潛能、并因與造血干細胞共同移植加快造血恢復作用及降低GVHD的作用，受到多領域科研者的青睞，認為其在組織工程和基因治療等生物醫(yī)學領域具有非

3、常廣闊的應用前景，將迎來未來醫(yī)學變革的新時代。但其目前存在的幾個基礎問題仍未完全得到解決：l、骨髓中MSCs含量極微(在1106個骨髓單個核細胞中僅有2～5個MSCs)體外需要擴增。2、分離方法：貼壁法、密度梯度離心法分離雖然簡單，花費較少，但細胞含有多種細胞成分。流式細胞儀分離得到較為純凈、均一的MSCs，但其活性則完全喪失。3、由于目前尚無MSCs的特異性標志，對MSCs的特征描述及其分離方法都是以一個細胞群體的形式進行的，并且骨髓

4、基質細胞的判斷還是以其生物學行為做回顧性判斷，現(xiàn)在似乎更多的是通過干細胞實驗結果來反推所培養(yǎng)的細胞是干細胞。4、它的生物學特性還遠未完全了解清楚。不同的培養(yǎng)方法生物學特性也會存在差異。基于以上問題，本實驗研究圍繞以下幾個方面進行。1、擬建立一條體外培養(yǎng)技術路線，設法獲得較為純凈、均～的間充質干細胞，并且便于培養(yǎng)和擴增，為廣泛深入研究hBMSCs及其在臨床的開展和應用提供依據(jù)。2、檢測臨床相關的生物學特性，探討臨床應用的可能性。3、向神經