三倍體牙鲆生物學性狀和遺傳多樣性分析.pdf

1、AnalysisofthebiologicaltraitsandgeneticdiversityoftriploidoliveflounderParalichthysolivaceusThesissubmittedto(墓ngdaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofAgronomy1一一LiuHui(CollegeofAnim

2、alScienceandVeterinaryMedicine)Supervisor：LiZhenYouFengZhuXiangpingQingdaoChinaJune，2014青島農業(yè)大學碩士學位論文摘要三倍體牙鲆生物學性狀和遺傳多樣性分析摘要本研究對冷休克誘導的三倍體及對照組牙鲆的生長狀況、營養(yǎng)成分以及骨骼形態(tài)進行了比較和分析；同時，采用微衛(wèi)星分子標記技術對這兩個群體的遺傳多樣性進行了研究。1、通過定期測量二倍體和三倍體的全長、體重等

3、生長性狀，比較了不同倍性牙鲆的生長情況。在孵化后的11個月內，三倍體的全長和體重均高于二倍體，其中2、5、9月齡的三倍體全長和體重均顯著高于二倍體(尸005)。2、用x光照相技術對牙鲆骨骼形態(tài)進行觀察。發(fā)JEYY養(yǎng)殖條件下，二倍體對照組和三倍體組均有脊椎畸形現(xiàn)象，常見的脊椎畸形有4種：椎體聚合、椎體單面壓縮、椎體雙面壓縮和椎體移位，其中椎體聚合是最常見的脊椎畸形，567％的三倍體和333％的二倍體都出現(xiàn)椎體聚合：在二倍體和三倍體中，第8

4、16塊和尾部最后10塊區(qū)域內的椎骨畸形率均較高?？傮w來說，三倍體牙鲆的骨骼畸形率顯著高于二倍體(三倍體，600％；二倍體，333％，P005)，三倍體發(fā)生脊椎畸形的個體數(shù)和各種畸形出現(xiàn)的次數(shù)也均高于二倍體。3、對三倍體牙鲆肌肉的營養(yǎng)成分進行測定，并與二倍體進行比較。結果表明，二倍體和三倍體肌肉營養(yǎng)成分總體差異不大，其中水分、蛋白質、脂肪、灰分含量均沒有顯著差異。二倍體和三倍體含有相同種類的氨基酸和脂肪酸。三倍體肌肉中的蛋白質、飽和脂肪酸

5、、多不飽和脂肪酸和必需氨基酸含量高于二倍體，但是差異并不顯著。三倍體的16：00、20：4∞6、EPA三種脂肪酸含量顯著低于二倍體儼005)，Thr、Gly、Arg、18：1c07、20：2國6、DHA含量顯著高于二倍體(尸005)。4、采用微衛(wèi)星遺傳標記技術對冷休克誘導的三倍體群體及二倍體對照群體進行比較分析，取培育至11月齡三倍體及同期二倍體對照矛鲆個體各32尾，通過高鹽法提取肌肉組織總DNA，利用篩選得到的21對微衛(wèi)星引物進行PC

6、R擴增，并經(jīng)14％聚丙烯酰胺凝膠電泳進行分型后，進行人工判讀和分析。結果顯示，21個微衛(wèi)星位點均為多態(tài)，二倍體和三倍體群體的平均等位基因數(shù)a)、基因型6數(shù)、平均有效等位基因數(shù)池)、平均觀測雜合度(㈨和平均期望雜合度(玩)分別為56和50，190和142，37和28，0613和0868。0681和O629。二倍體和三倍體群體的多態(tài)信息含量(PIC)分別為O642和O589，個體識別率㈤為O660和0609，非父排除率㈣為0482和0399