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文檔簡介
1、【研究目的】近幾年研究證明C5L2是促?;鞍?acylation-stimulatingproteinASP)的唯一功能受體,并且與糖脂代謝相關(guān),ASP-C5L2通路激活增加二?;视王;D(zhuǎn)移酶(DGAT)活性,刺激葡萄糖的吸收,抑制激素敏感性脂肪酶(HSL)的活性,還具有刺激胰島素分泌的功能,從而促進(jìn)脂肪組織甘油三酯的合成并儲存于脂肪組織。Nonalcoholicfattyliverdisease(NAFLD)是由于肝臟脂質(zhì)沉積過多
2、引起,是在肝臟中的表現(xiàn)的代謝紊亂綜合征,與糖脂代謝紊亂和炎癥有密切聯(lián)系。越來越多的研究提示高表達(dá)C5L2基因可能會減少肝臟的脂肪沉積,從而改善肝脂肪變性。有研究表明當(dāng)323位絲氨酸突變?yōu)楫惲涟彼岷蠹碨323I-C5L2使基因C5L2失去功能。本研究設(shè)想高表達(dá)C5L2基因可以緩解脂肪變性治療NAFLD,而S323I-C5L2突變對NAFLD沒有作用。
【研究方法】用高脂飼料(脂肪提供60%能量)飼養(yǎng)八周齡的Wistar大鼠,12
3、周后誘導(dǎo)NAFLD模型,重組腺相關(guān)病毒介導(dǎo)基因C5L2(rAVV-C5L2)及S323I-C5L2(rAVV-S323I-C5L2)經(jīng)尾靜脈注射入大鼠體內(nèi),從而在大鼠體內(nèi)安全地表達(dá)C5L2及S323I-C5L2基因。治療8周后,處死大鼠,檢測血漿生化指標(biāo),用Westernblot檢測C5L2蛋白在肝臟組織地表達(dá)情況,通過HE染色和肝臟甘油三酯含量評價肝臟脂肪變性,采用westernblot檢測肝臟組織IκBα/NF-κB炎癥通路各分子表
4、達(dá),Real-time方法檢測肝臟組織炎癥因子TNF-α和IL-6的mRNA水平。綜合評價C5L2基因?qū)Ω咧T導(dǎo)的NAFLD的影響。
【研究結(jié)果】(1)重組腺相關(guān)病毒介導(dǎo)人C5L2基因可以在動物體內(nèi)穩(wěn)定的表達(dá)C5L2受體;(2)在高脂組,C5L2基因過表達(dá)顯著降低血清甘油三酯(TG)、葡萄糖、FFA水平;明顯降低肝臟甘油三酯含量,減輕由高脂引起的脂肪變性;(3)在高脂組,C5L2高表達(dá)降低了TNF-α和IL-6的mRNA水平并
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