放射性核素標記多肽K237在肺癌分子顯像和靶向治療中的實驗研究.pdf

1、[目的] 1.探討99Tcm標記多肽K237的方法，研究99Tcm-K237在健康小鼠體內(nèi)的生物分布特性及其在荷瘤小鼠體內(nèi)的顯像表現(xiàn)； 2.觀察131I標記多肽K237(131I-K237)對荷人肺癌裸鼠移植瘤的靶向治療作用。 [方法] 1.采用99Tcm直接法標記多肽K237。探索不同標記條件下產(chǎn)物的標記率、放化純和體外穩(wěn)定性。采用MTT法檢測99Tcm-K237的生物學(xué)活性，競爭結(jié)合實驗觀察99Tcm

2、-K237對人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)的親合作用。正常小鼠尾靜脈注射99Tcm-K237(2.96MBq，0.1ml)后30min和1、2、4、8及24h后處死，取血液及主要臟器，稱重并測量放射性，測定其每克組織百分注射劑量率(％ID/g)。將99Tcm-K237(5.55MBq，0.1ml)經(jīng)荷人肺癌A549裸鼠尾靜脈注射，于注射后1、2、3、5及8h行SPECT顯像，利用感興趣區(qū)技術(shù)(ROI)對腫瘤/對側(cè)相應(yīng)部位肌肉組織放射性比

3、值(T/NT)進行半定量分析。 2.采用Iodogen法標記K237，MTT法檢測131I-K237生物活性，競爭結(jié)合實驗觀察131I-K237對HUVEC的親合作用，并進行荷瘤裸鼠體內(nèi)的生物分布研究。建立表達血管內(nèi)皮生長因子受體-2(KDR)的荷人肺癌裸鼠模型；25只荷瘤鼠模型分為5組，每組5只，分別為生理鹽水對照組、131I-K237靜脈注射組、131I-K237瘤體內(nèi)注射組、K237組和131I組。注射相應(yīng)試劑后31d，比

4、較腫瘤的體積，計算抑瘤率，并通過生物化學(xué)、免疫組織化學(xué)及病理組織學(xué)等方法檢測131I-K237對腫瘤生長的抑制作用及其對正常組織器官的放射毒副作用。 [結(jié)果] 1.SnCl2·2H2O的用量為100μgK237用量為100μg、pH值6.0、反應(yīng)時間10～30min和反應(yīng)溫度4～37℃時，99Tcm-K237的標記率和放化純均>95％，且具有抑制HUVEC增殖的活性，與未標記的K237之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.83，

5、P>0.05)。99Tcm-K237在生理鹽水和正常人血清中放置24h后，其放化純分別為(89.1±1.4)％和(88.3±1.1)％，二者差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.56，P>0.05)。靜脈注射99Tcm-K237后24h內(nèi)，小鼠血液放射性清除迅速，通過腎臟排泄較快，放射性主要聚集在腎臟，其它組織器官的放射性隨時間逐漸降低。99Tcm-K237荷人肺癌A549裸鼠顯像示腫瘤組織攝取高，T/NT在1、2、3、5和8h分別為1.25±0.

6、11、3.13±0.26、3.97±0.31、1.34±0.29、1.18±0.25； 2.131I-K237的標記率為60.16％，放化純大于95％，且具有抑制HUVEC增殖的活性，與未標記的K237之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.67，P>0.05)。30min、1h、2h、4h、8h、12h和24h的T/NT分別為2.12、2.32、2.51、2.70、3.03、4.31和4.19。治療結(jié)束時，131I-K237靜脈和瘤體內(nèi)

7、注射組、K237組及131I組的抑瘤率分別為75.01％、78.99％、31.15％、12.61％。131I-K237靜脈和瘤體內(nèi)注射組腫瘤平均體積較小，與生理鹽水對照組、K237組和131I組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。光學(xué)顯微鏡和電鏡顯示131I-K237治療組和K237組腫瘤細胞發(fā)生明顯壞死；未發(fā)現(xiàn)肝、腎、脾和造血組織的輻射損傷。 [結(jié)論] 1.99Tcm-K237易于制備，標記率高，體內(nèi)外穩(wěn)定性好，具