補腎調氣法對腦出血后抑郁單胺遞質及神經(jīng)因子作用的實驗研究.pdf

1、目的：根據(jù)卒中后抑郁(PSD)的內源性機制學說和反應性機制學說，建立腦出血后抑郁動物模型，觀察腦出血后抑郁大鼠動物模型行為學變化、腦內單胺遞質及神經(jīng)營養(yǎng)因子(NTFs)的變化，結合“單胺遞質假說”、“營養(yǎng)因子假說”，從單胺遞質及神經(jīng)營養(yǎng)因子方面探討腦出血后抑郁的發(fā)病機理。提出腦出血后抑郁的病機為腎虛氣郁、痰瘀互結、腦髓失養(yǎng)，探討以補腎調氣為治法的方藥頤腦解郁對腦出血后抑郁的治療機理。 方法：1.選擇雄性Wistar大鼠經(jīng)Open

2、-Field行為學評分隨機分為正常組、出血組、抑郁組、模型組。正常組予正常食水。出血組，膠原酶誘導腦出血。抑郁組，與模型組一同接受21天的不可預知性的慢性應激刺激合并孤養(yǎng)。模型組，膠原酶誘導腦出血，術后7天開始21天的慢性應激刺激合并孤養(yǎng)。應激結束后進行行為學測定(糖水消耗量、Open-Field測定、水迷宮測試)，后用免疫組化法測定單胺遞質及神經(jīng)營養(yǎng)因子的表達，對腦邊緣系統(tǒng)進行圖像分析，觀察所測定指標陽性表達的光密度值和面積值。

3、 2.選擇雄性Wistar大鼠經(jīng)Open-Field行為學評分隨機分為正常組、模型組、對照組和治療組。正常組常規(guī)飼養(yǎng)，卒中組是膠原酶誘導的腦出血模型，予常規(guī)飼養(yǎng)。模型組、治療組和對照組予膠原酶誘導腦出血手術，術后7天開始予21天的慢性不可預知的溫和應激，應激結束后治療組予頤腦解郁方灌胃每日1次，共6周；對照組灌胃氟西汀，每日1次，共6周。灌胃結束后進行行為學測定，后用免疫組化法測定腦內單胺遞質及神經(jīng)營養(yǎng)因子，對腦邊緣系統(tǒng)進行圖像分析，

4、觀察所測定指標陽性表達的光密度值和面積值。 結果：1.腦出血大鼠在各周與正常組大鼠無明顯差異；抑郁組在第15天后蔗糖水的消耗量下降，與正常組比有明顯差異(P＜0.05)，在第21天后，蔗糖水的消耗量下降，與正常組相比有顯著差異(P＜0.01)；模型組大鼠蔗糖水的消耗量在第15天和第21天后蔗糖水的消耗量下降，與正常組相比有顯著差異(P＜0.01)。敞箱試驗結果，模型組、抑郁組、出血組水平活動和垂直活動次數(shù)較正常組相比，均有顯著性

5、差異(P＜0.01)。出血組學習、記憶時間增多，與正常組相比有統(tǒng)計學顯著性差異(P＜0.05)；抑郁組在學習、記憶時間增多、錯誤次數(shù)增多，與正常組相比有統(tǒng)計學顯著性差異(P＜0.05)；模型組水迷宮測定結果學習、記憶時間延長、錯誤增多，與正常組相比有統(tǒng)計學顯著性差異(P＜0.01)。 出血組5-羥色胺陽性細胞在海馬CA4、梨狀皮質、下丘腦內表達面積與正常組比較減低(P＜0.05)，在海馬CA1、CA3、CA4、梨狀皮質、扣帶皮質

6、與正常組比較光密度減少(P＜0.05)；抑郁組在海馬CA1、CA3、梨狀皮質、下丘腦5-羥色胺陽性細胞表達面積與正常組比較減少(P＜0.05)，在海馬CA1、CA3、梨狀皮質、扣帶皮質、5-羥色胺陽性細胞光密度與正常組比較減少(P＜0.05)；模型組大鼠腦海馬CA1、CA3、扣帶皮質內5-羥色胺陽性細胞與正常組比較表達面積減少，光密度減低(P＜0.05)，在海馬CA4、梨狀皮質、下丘腦內5-羥色胺陽性細胞與正常組比較光密度減低(P＜0.

7、05)。模型組、出血組、抑郁組下丘腦內酪氨酸羥化酶陽性細胞表達面積、光密度與正常組比較下降(P＜0.05)。腦出血組去甲腎上腺素陽性細胞在扣帶皮質與正常組比較面積增多(P＜0.05)，光密度與正常組比較下降(P＜0.05)，在下丘腦與正常組比較光密度下降(P＜0.05)；抑郁組去甲腎上腺素陽性細胞在扣帶皮質表達面積和光密度與正常組比較下降，在下丘腦表達光密度與正常組比較下降(P＜0.05)；模型組去甲腎上腺素陽性細胞在扣帶皮質和下丘腦光

8、密度與正常組比較下降(P＜0.05)。 腦出血組下丘腦、海馬CA1區(qū)BDNF陽性細胞面積、光密度顯著降低，扣帶皮質、海馬CA2、CA3區(qū)光密度較正常降低顯著(P＜0.05)；抑郁組扣帶皮質、海馬BDNF陽性細胞數(shù)光密度低于正常(P＜0.05)；模型組扣帶皮質、海馬CA1、CA2區(qū)BDNF陽性細胞表達面積、光密度和下丘腦、海馬CA3區(qū)光密度較正常降低顯著。腦出血組杏仁皮質后核、扣帶皮質bFGF陽性細胞數(shù)量較正常減少，面積降低(P＜

9、0.05)，杏仁皮質后核、下丘腦和海馬CA3區(qū)陽性細胞染色深，光密度增高(P＜0.05)；抑郁組皮質陽性細胞染色變淺光密度降低(P＜0.05)，下丘腦陽性細胞數(shù)增加，面積增高(P＜0.05)；模型組杏仁皮質后核光密度和扣帶皮質面積較正常顯著降低(P＜0.05)。腦出血組在扣帶皮質和海馬CA3區(qū)GFAP陽性細胞表達增多，面積和光密度增高(P＜0.05)；抑郁組皮質和海馬CA3區(qū)GFAP陽性細胞光密度降低(P＜0.05)；模型組GFAP陽性

10、細胞在海馬CA3表達增多，較正常顯著增加(P＜0.05)。 2.中藥組和西藥組蔗糖水消耗量較模型組增加(P＜0.05)。中藥組和西藥組大鼠水平走格數(shù)與模型組比較有顯著增加(P＜0.05)。中藥組和西藥組學習或記憶游出時間較模型組減少(P＜0.05)，中藥組記憶錯入盲端數(shù)減少(P＜0.05)。 西藥組在海馬CA1、扣帶皮質表達面積增多，扣帶皮質表達與模型組比較光密度增多(P＜0.05)。中藥治療組5-HT陽性細胞在海馬CA

11、1、梨狀皮質與模型組比較表達面積增多，在梨狀皮質表達光密度增多(P＜0.05)。西藥組下丘腦TH陽性細胞的表達面積與模型組比較增加(P＜0.05)。中藥組下丘腦TH陽性細胞的表達面積和光密度與模型組比較顯著增加(P＜0.05)。西藥組在扣帶皮質和下丘腦NE與模型組比較表達面積增多，在扣帶皮質NE陽性細胞表達光密度增加(P＜0.05)；中藥組在扣帶皮質、下丘腦內NE陽性細胞與模型組比較表達面積增多，光密度增加(P＜0.05)。 西

12、藥組在海馬CA1區(qū)陽性細胞面積表達增加較模型組增加(P＜0.05)；在扣帶皮質、CA3區(qū)面積、光密度較模型增加(P＜0.05)；中藥組陽性細胞較模型組在海馬CA3區(qū)、下丘腦BDNF陽性細胞面積表達較模型組增加，在扣帶皮質、海馬CA3區(qū)BDNF陽性細胞光密度表達較模型組增加(P＜0.05)。西藥組bFGF陽性細胞表達在扣帶皮質光密度和下丘腦面積較模型增加(P＜0.05)；中藥組bFGF陽性細胞表達在扣帶皮質光密度較模型增高(P＜0.05)

13、。中藥組、西藥組在海馬CA3區(qū)陽性細胞表達減弱，面積和光密度較模型降低(P＜0.05)。 結論：采用膠原酶誘導腦出血模型復合慢性不可預知溫和應激和孤養(yǎng)法可建立腦出血后抑郁大鼠模型該模型，模型動物在行為學上表現(xiàn)出興趣和快感缺乏活動性減少學習和記憶能力下降模擬了卒中后抑郁的主要癥狀，與臨床腦出血后抑郁疾病癥狀存在一致性；同時該模型模擬臨床腦出血后抑郁發(fā)病機制，表現(xiàn)出腦內單胺神經(jīng)遞質下降，符合臨床腦出血后抑郁發(fā)病特點。腦內單胺神經(jīng)遞質