燈盞花素對(duì)高糖環(huán)境下血管平滑肌細(xì)胞遷移的影響及其機(jī)制的討論.pdf

1、研究背景:糖尿病是多種心血管疾病發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。近年的臨床研究發(fā)現(xiàn)糖尿病患者PCI術(shù)后冠脈再狹窄的發(fā)生率高于非糖尿病患者，并且再狹窄程度更高。血管中層平滑肌細(xì)胞(VSMC)向內(nèi)膜下遷移是導(dǎo)致再狹窄發(fā)生的主要原因。研究表明VSMC遷移能力的增強(qiáng)與ERK1/2-MLCK信號(hào)通路的激活相關(guān)。慢性持續(xù)性的高血糖是糖尿病主要表現(xiàn)之一，并且越來(lái)越多的研究表明高血糖是導(dǎo)致糖尿病血管并發(fā)癥的首要原因。另外有研究表明高糖能激活ERK、MAPK等信號(hào)通

2、路。但是目前尚缺乏有關(guān)高糖是否參與糖尿病PCI術(shù)后再狹窄發(fā)生及其機(jī)制方面的報(bào)道。燈盞花素是從菊科屬植物短亭飛蓬全草燈盞細(xì)辛中提取的一類黃酮類成分。已有研究表明燈盞花素對(duì)糖尿病腎病和糖尿病心肌病有保護(hù)作用，并且燈盞花素通過(guò)抑制p38和ERK1/2信號(hào)通路抑制心臟成纖細(xì)胞的增殖和膠原合成。但是關(guān)于燈盞花素對(duì)糖尿病PCI術(shù)后冠脈再狹窄的作用尚不清楚。
　　目的:觀察燈盞花素對(duì)高糖環(huán)境下VSMC遷移能力的影響及其作用機(jī)制的探討。
　

3、　實(shí)驗(yàn)方法:動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。取24只正常健康SD大鼠，隨機(jī)分為4組:正常非手術(shù)組，正常手術(shù)組，糖尿病手術(shù)組和糖尿病給藥組，建立糖尿病模型，對(duì)各組大鼠行頸動(dòng)脈球囊損傷手術(shù)，給藥組術(shù)前進(jìn)行藥物預(yù)處理1天，術(shù)后繼續(xù)給藥4周，最終行在體灌注固定并取雙側(cè)頸動(dòng)脈行切片并HE染色，比較各組大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)膜增厚程度。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。培養(yǎng)原代血管平滑肌細(xì)胞并行細(xì)胞鑒定，4-6代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞給予高糖及藥物等不同干預(yù)后，采用劃痕實(shí)驗(yàn)以觀察細(xì)胞遷移能力的變化，west

4、ern blot檢測(cè)蛋白表達(dá)及磷酸化水平的改變。
　　結(jié)果:動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。以內(nèi)膜與（內(nèi)膜+中膜）的比值表示內(nèi)膜增厚的程度。HE染色結(jié)果結(jié)果顯示糖尿病手術(shù)組較正常手術(shù)組內(nèi)膜增厚明顯，燈盞花素對(duì)糖尿病手術(shù)組大鼠內(nèi)膜增生有抑制作用。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。高糖處理后VSMC遷移能力增強(qiáng)，并且燈盞花素對(duì)該作用有抑制作用，分子機(jī)制的研究進(jìn)一步表明高糖通過(guò)ERK1/2-MLCK通路上調(diào)細(xì)胞遷移，而燈盞花素對(duì)該信號(hào)通路有抑制作用。
　　結(jié)論:燈盞花素能通過(guò)