Foxa2在肝細胞饑餓狀態(tài)下基因表達轉(zhuǎn)錄調(diào)控中的作用及機制.pdf

1、　　肝糖異生作用是長期饑餓下機體維持血糖平衡的主要途徑，其主要依靠激素的調(diào)節(jié)，但不適當?shù)恼{(diào)節(jié)可引起糖尿病和其他遺傳代謝性疾病。糖異生途徑中關(guān)鍵限速酶的調(diào)節(jié)是最基礎(chǔ)和最基本的調(diào)節(jié)方式，其調(diào)控主要發(fā)生在轉(zhuǎn)錄水平，需要多種轉(zhuǎn)錄因子協(xié)調(diào)作用以適應(yīng)機體不同的代謝和激素狀態(tài)。 本課題建立了肝細胞轉(zhuǎn)錄因子Foxa2基因特異性剔除小鼠作為體內(nèi)研究模型，并以從該小鼠分離培養(yǎng)得到的原代肝細胞為體外研究模型，采用免疫熒光染色技術(shù)(IFC)、免疫組織化

2、學(xué)染色技術(shù)(IHC)、實時熒光定量PCR技術(shù)(RT-PCR)以及染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)(CHIPassay)，較系統(tǒng)、全面地對Foxa2在cAMP和糖皮質(zhì)激素介導(dǎo)的肝細胞特異性基因PEPCK、TAT和IGFBP-1轉(zhuǎn)錄活化中的作用和分子機理進行了研究， 經(jīng)過實驗結(jié)果顯示：肝細胞特異性因子Foxa2是cAMP和糖皮質(zhì)激素介導(dǎo)的肝細胞特異性基因PEPCK、TAT和IGFBP-1轉(zhuǎn)錄活化所共同必需，它與兩個廣泛表達的依賴于激素的轉(zhuǎn)錄因子C