卡維地洛對(duì)膽汁淤積性肝纖維化大鼠肝組織膠原代謝及氧化應(yīng)激的影響.pdf

1、肝纖維化是各種不同致病因子引起慢性肝病進(jìn)而發(fā)展為肝硬化的共有病理改變，是肝臟對(duì)各種慢性損傷產(chǎn)生的一種修復(fù)反應(yīng)，其共同特點(diǎn)是以膠原為主的細(xì)胞外間質(zhì)（extracellular matrix，ECM）的過度沉積?；罨母涡菭罴?xì)胞（hepatic stellate cells，HSC）是肝臟產(chǎn)生過度膠原的主要細(xì)胞。在各種促纖維生成因素的作用下，HSC從靜止?fàn)顟B(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榛罨癄顟B(tài)即產(chǎn)生膠原的肌成纖維樣細(xì)胞。
　　 交感神經(jīng)系統(tǒng)（sympat

2、hetic nervous system，SNS）是肝內(nèi)神經(jīng)的重要組成部分，參與肝臟功能、新陳代謝等方面的調(diào)控。近年來越來越多的研究顯示，交感神經(jīng)系統(tǒng)可通過對(duì)HSC增殖和凋亡等細(xì)胞行為的調(diào)控，影響肝纖維化的發(fā)生發(fā)展。卡維地洛是一種具有多種作用的交感神經(jīng)腎上腺素能受體阻滯劑包括非選擇性的β阻滯和α1阻滯，并且是一種強(qiáng)的抗氧化物和強(qiáng)的反應(yīng)性的氧自由基清除劑。研究發(fā)現(xiàn)卡維地洛可通過其交感神經(jīng)受體阻滯作用直接抑制心臟成纖維細(xì)胞的增殖，進(jìn)而阻止細(xì)

3、胞外間質(zhì)的合成，以達(dá)到減輕心臟間質(zhì)重塑，預(yù)防心力衰竭發(fā)生發(fā)展的作用。然而，其在肝纖維化中的作用，尤其是對(duì)肝纖維化過程中的膠原代謝及氧化應(yīng)激的影響，目前國內(nèi)外少有報(bào)道。我們前期的研究已顯示卡維地洛可以抑制肝纖維化大鼠肝組織的HSC活化增殖，促進(jìn)活化HSC凋亡。本研究將進(jìn)一步研究該藥對(duì)肝纖維化病理過程中肝組織Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原代謝的調(diào)控作用及氧化應(yīng)激的影響。
　　 目的：觀察腎上腺素能受體阻滯劑卡維地洛對(duì)膽汁淤積性大鼠纖維化肝組織中Ⅰ

4、、Ⅲ、Ⅳ型膠原代謝及氧化應(yīng)激的影響。
　　 方法：采用膽總管結(jié)扎法建立膽汁淤積性大鼠肝纖維化模型，并給予卡維地洛進(jìn)行藥物干預(yù)，將50只雄性Sprague Dawley大鼠隨機(jī)分成假手術(shù)對(duì)照組、模型組、小劑量卡維地洛組（0.1 mg·kg-1·d-1）、中等劑量卡維地洛組（1 mg·kg-1·d-1）和大劑量卡維地洛組（10mg·kg-1·d-1），共5組，每組10只。各組又隨機(jī)分成兩小組，分別在術(shù)后2 wk、4 wk留取肝組織。

5、應(yīng)用HE、Masson染色了解肝臟病理組織學(xué)變化及纖維化程度；分別應(yīng)用黃嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法（TBA）檢測(cè)肝組織SOD活性和MDA水平，以了解肝組織氧化應(yīng)激狀態(tài)；應(yīng)用免疫組織化學(xué)法對(duì)肝組織Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原及TGF-β1含量及分布進(jìn)行檢測(cè)；應(yīng)用Western Blot及Real time Q-PCR檢測(cè)肝組織MMP-2及TIMP-2在肝纖維化過程中的動(dòng)態(tài)表達(dá)。
　　 結(jié)論：
　　 1、卡維地洛可以下調(diào)纖維化肝組織中

6、的Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原蛋白表達(dá)，這種作用尤以大劑量組最為顯著。
　　 2、卡維地洛在基因及蛋白水平下調(diào)肝纖維化早期MMP-2表達(dá)，上調(diào)肝纖維化晚期MMP-2表達(dá)，并持續(xù)下調(diào)TIMP-2mRNA及蛋白表達(dá)，促進(jìn)MMP-2/TIMP-2平衡的恢復(fù)；下調(diào)大鼠纖維化肝組織中TGF-β1的表達(dá)。這可能是卡維地洛下調(diào)肝纖維化組織中Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原表達(dá)，減緩肝纖維化進(jìn)程的機(jī)制之一。
　　 3、卡維地洛可通過降低大鼠纖維化肝組織中MDA的含