華蟾素對耐阿霉素人乳腺癌細胞多藥耐藥性的逆轉及機制初探.pdf

1、測定中藥華蟾素注射劑(cinobufacine Injection，Cino)對人乳腺癌細胞阿霉素耐藥株(MCF-7／ADM)的無細胞毒性濃度，并檢測此劑量能否逆轉MCF-7／ADM株細胞對化療藥物阿霉素(adriamycin，ADM)的耐藥性及其可能的機制。 方法: 體外培養(yǎng)人乳腺癌細胞阿霉素敏感株(MCF-7／S)和阿霉素耐藥株(MCF-7／ADM)，先采用四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測Cino對MCF-7／s,nM

2、CF-7／ADM兩株細胞有無細胞毒性作用并確定其無細胞毒性濃度；MCF-7／ADM株細胞對ADM的耐藥倍數(shù)：無細胞毒濃度的Cino對MCF-7／ADM株細胞的逆轉倍數(shù)及其對MCF-7／ADM株細胞生長曲線及倍增時間的影響。再用高效液相色譜(HPLC)法檢測加無細胞毒濃度Cino前后MCF-7／S和MCF-7／ADM兩株細胞內阿霉素(ADM)的濃度變化。 結果: 1.MTT比色法結果顯示：Cino可明顯抑制體外培養(yǎng)的MCF

3、-7／s株和HMCF-7／ADM株細胞的增殖，且抑制程度隨Cino作用時間和濃度的增加而增加。表明Cino本身有細胞毒性作用，能抑制MCF-7兩株細胞的增殖，MCF-7／ADM細胞對Cino仍然敏感；低于15μg／ml的Cino對MCF-7／s和MCF-7／ADM兩株細胞均無顯著毒性作用(IR<10％)，該濃度的Cino與ADM合用時，能顯著降ADM對MCF-7／ADM細胞的IC<,50>強ADM對MCF-7／ADM株細胞的殺傷作用，即

4、與ADM合用時，能恢復ADM對MCF-7／ADM細胞的增殖抑制作用，ADM與Cino協(xié)同作用合用的CI值小于1，表明Cino具有化療增敏作用，與細胞計數(shù)繪制生長曲線結果相一致。2.高效液相色譜法結果顯示：無細胞毒濃度(15μg／ml)Cino與5μg／mlADM合用后，能顯著增加MCF-7／ADM株細胞內ADM的積累，而未見顯著增加MCF-7／S株細胞內ADM的積累，表明Cino可能通過某種機制而減少藥物的外排。 結論:

5、 1.MCF-7／s株和MCF-7／ADM株兩細胞的生長抑制率均明顯隨Cino濃度及作用時間的增加而增加，呈藥物濃度一時間依賴方式。表明Cin0本身對MCF-7兩株細胞有增殖抑制作用，MCF-7／ADM株細胞對Cino未產生耐藥性。 2.無細胞毒濃度的Cino能明顯增強ADM對人乳腺癌細胞耐藥株MCF-7／ADM的化療增敏作用，表明Cino對MCF-7／ADM細胞的MDR有部分逆轉作用。 3.無細胞毒濃度的Cino能明顯