miR-148a和miR-409在胃癌轉(zhuǎn)移中的作用及其機(jī)制研究.pdf

1、越來越多證據(jù)表明microRNA(miRNA)與腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，然而，有關(guān)miRNA與胃癌轉(zhuǎn)移的報(bào)道較少。在本研究中，我們首先研究miR-148a在胃癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及其相關(guān)機(jī)制。我們發(fā)現(xiàn)miR-148a在胃癌組織中平均下調(diào)4倍，miR-148a表達(dá)水平與胃癌分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著負(fù)相關(guān)。功能上，表現(xiàn)為體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)上具有抑制胃癌細(xì)胞遷移侵襲能力和體內(nèi)具有抑制小鼠肺轉(zhuǎn)移能力。作用機(jī)制上，我們進(jìn)一步鑒定出ROCK1為miR-148a一

2、個功能上的靶基因。過表達(dá)miR-148a下調(diào)細(xì)胞中ROCK1 mRNA和蛋白水平，而抑制miR-148a表達(dá)則能提高ROCK1表達(dá)水平。熒光素酶實(shí)驗(yàn)證實(shí)miR-148a能直接和ROCK13UTR上的2個位點(diǎn)結(jié)合。此外，在胃癌組織中我們發(fā)現(xiàn)miR-148a表達(dá)與ROCK1蛋白水平成負(fù)相關(guān)。干擾ROCK1能抑制胃癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)ROCK1可介導(dǎo)miR-148a影響胃癌細(xì)胞遷移和侵襲。
　　 此外，我們還研究了另外一

3、個miRNA在胃癌中的作用和功能，發(fā)現(xiàn)miR-409-3p在胃癌中低表達(dá)，與胃癌分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移成負(fù)相關(guān)。過表達(dá)miR-409抑制胃癌細(xì)胞的遷移侵襲能力和小鼠肺轉(zhuǎn)移及腹腔播散能力，而且我們還發(fā)現(xiàn)miR-409主要通過miR-409-3p發(fā)揮作用，而不是miR-409-5p。使用基因芯片和生物信息學(xué)方法發(fā)現(xiàn)促腫瘤轉(zhuǎn)移基因RDX為miR-409-3p的一個潛在靶基因。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)miR-409-3p通過和RDX3UTR結(jié)合抑制RDX的表達(dá)

4、。干擾RDX的表達(dá)能抑制胃癌細(xì)胞遷移和侵襲，這一作用類似于miR-409高表達(dá)，在miR-409穩(wěn)轉(zhuǎn)株中恢復(fù)RDX表達(dá)能減弱miR-409抑制胃癌細(xì)胞的遷移和侵襲作用。
　　 綜上所述，通過對miR-148a和miR-409的功能和作用機(jī)制研究，我們在胃癌中發(fā)現(xiàn)2個新的轉(zhuǎn)移抑制基因miR-148a和miR-409，他們分別通過靶基因ROCK1和RDX抑制胃癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。本研究提示在胃癌組織中miR-148a或miR-409