湖北恩施產(chǎn)厚樸的品質(zhì)研究.pdf

1、湖北恩施是中藥厚樸的傳統(tǒng)道地產(chǎn)區(qū)，恩施厚樸俗稱“紫油厚樸”，其內(nèi)表面深紫色、斷面棕色、皮厚、質(zhì)細(xì)、香氣濃、油性重，屬地道名優(yōu)藥材，原植物為木蘭科厚樸(Magnolia officinalis Rehd.et Wils.)。為深入研究恩施厚樸的品質(zhì)與鑒別，本文探討了厚樸的功效及其物質(zhì)基礎(chǔ)，對(duì)恩施厚樸有效成分及有效部位進(jìn)行了定量分析，比較了不同產(chǎn)地、品種間厚樸酚與和厚樸酚的含量，建立了恩施厚樸的HPLC指紋圖譜及DNA指紋圖譜。 將

2、歷代醫(yī)籍和本草著作中有關(guān)厚樸功效的論述與現(xiàn)代化學(xué)成分分析、藥理藥效研究的成果相結(jié)合進(jìn)行分析研究，結(jié)果表明，厚樸的功效為“下氣消脹，化濕除滿”。其有效成分主要有三類：①酚類成分，主要為厚樸酚、和厚樸酚等；②揮發(fā)油類成分，主要是桉醇、丁香烯等單萜、倍半萜及其含氧衍生物；③生物堿類成分，主要是木蘭箭毒堿、木蘭花堿等。生物堿類同時(shí)也是厚樸的主要毒性成分。 采用高效液相色譜法測(cè)定來(lái)自不同樹(shù)齡、不同部位、不同加工方法以及不同產(chǎn)地、不同品種的

3、厚樸樣品中厚樸酚、和厚樸酚含量，流動(dòng)相為甲醇-水(78：22)，檢測(cè)波長(zhǎng)為294nm。結(jié)果表明，恩施厚樸隨樹(shù)齡增長(zhǎng)，厚樸酚與和厚樸酚總含量下降；樹(shù)齡相同，酚含量與胸徑、皮厚呈正相關(guān)；根皮的酚含量遠(yuǎn)高于干皮和枝皮，干皮自下而上酚含量逐漸降低，枝皮的酚含量比中上部干皮的高；發(fā)汗能使酚含量大幅提高。不同產(chǎn)地、品種間比較，則恩施厚樸的厚樸酚與和厚樸酚含量最高。 采用《中國(guó)藥典》的揮發(fā)油測(cè)定法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法對(duì)恩施厚樸的揮發(fā)油類成分

4、進(jìn)行定性與定量分析。結(jié)果表明，同一植株上枝皮揮發(fā)油含量遠(yuǎn)高于根皮和干皮，干皮自下而上含量逐漸升高，莖基部含量最低；樹(shù)齡不同，揮發(fā)油含量各異，以5年生與20年生者為高。揮發(fā)油中單萜、倍半萜含氧衍生物含量以15年生者為最高，20年生干皮發(fā)汗品的含量次之。 采用非水溶液滴定法，探索恩施厚樸中生物堿的積累與分布規(guī)律。結(jié)果表明，隨著樹(shù)齡增長(zhǎng)，生物堿含量下降；同一植株，根皮生物堿含量最高，干皮最低；發(fā)汗使干皮的生物堿含量進(jìn)一步降低。

5、 采用《中國(guó)藥典》的浸出物測(cè)定法測(cè)定恩施厚樸的水溶性浸出物量(冷浸法)，考察不同部位、不同生長(zhǎng)年限、不同產(chǎn)地加工對(duì)厚樸浸出物的影響。結(jié)果顯示，同一厚樸株，干皮與枝皮浸出物較多，根皮較少；樹(shù)齡增長(zhǎng)，浸出物呈下降趨勢(shì)；發(fā)汗能使浸出物顯著增加。 采用HPLC法研究恩施厚樸的化學(xué)成分指紋圖譜。色譜條件：CosmosilC<,18>-MS-Ⅱ色譜柱(4.6mm×250mm，5μm)，流動(dòng)相甲醇-水 (67：33)溶液，流速1.0 mL·m

6、in<'-1>，柱溫25℃，檢測(cè)波長(zhǎng)230nm；記錄恩施產(chǎn)厚樸 10 批樣品(干皮)的 HPLC 圖譜，進(jìn)行圖譜相似度比較和特征性分析。結(jié)果表明，恩施厚樸個(gè)體間指紋圖譜相似度高(>0.92)；建立恩施厚樸的對(duì)照用指紋圖譜；確認(rèn)特征峰 5個(gè)，其中峰5與峰4峰面積的比值、峰4與峰5峰面積之和占總峰面積的比例，可分別作為恩施厚樸(干皮)的HPLC圖譜特征(特征Ⅰ、Ⅱ)。 采用ISSR標(biāo)記技術(shù)對(duì)厚樸基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增。結(jié)果2個(gè)I