rhEPO對高糖狀態(tài)下大鼠Muller細(xì)胞調(diào)亡及對Bcl-2和Bax表達(dá)的影響.pdf

1、目的:探討重組人促紅細(xì)胞生成素(Recombinanthumanerythropoietin,rhEPO)對高濃度葡萄糖作用下體外培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用及對Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)的影響。
　　 方法:采用改進(jìn)的酶消化發(fā)培養(yǎng)新生SD大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞,取3～4代時培養(yǎng)的細(xì)胞行免疫細(xì)胞化學(xué)染色鑒定。將體外培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞隨機(jī)分為高濃度葡萄糖培養(yǎng)組、對照組和各濃度rhEPO處理組,rhE

2、PO處理組在高濃度葡萄糖培養(yǎng)液中分別加入終濃度為5、10、20、40kU/LrhEPO,培養(yǎng)48h后,用MTT法檢測視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞活力,酶聯(lián)免疫吸附法檢測各組細(xì)胞上清液中Bcl-2和Bax蛋白的表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示,體外培養(yǎng)的細(xì)胞大部分GS染色陽性,該方法培養(yǎng)的大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞純度可達(dá)到95%以上。在高濃度葡萄糖條件下,體外培養(yǎng)的視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞與對照組相比活性下降,且細(xì)胞大量凋亡

3、,Bcl-2蛋白的表達(dá)降低而Bax蛋白表達(dá)增高。各濃度rhEPO組經(jīng)rhEPO處理后與高濃度葡萄糖組相比細(xì)胞活力顯著增強(qiáng),并明顯增強(qiáng)了Bcl-2蛋白的表達(dá)(P＜0.05),降低Bax蛋白的表達(dá)(P＜0.05).
　　 結(jié)論:rhEPO能減少體外培養(yǎng)高濃度葡萄糖狀態(tài)下大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞的凋亡,并能顯著增強(qiáng)Bcl-2蛋白的表達(dá),降低Bax蛋白的表達(dá)。提示上調(diào)Bcl-2及下調(diào)Bax蛋白的表達(dá)可能是rhEPO對視網(wǎng)膜Müller