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1、種子是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中最基本、最重要的生產(chǎn)資料。種子質(zhì)量的優(yōu)劣直接影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn),而種子活力是衡量種子播種質(zhì)量的指標(biāo)。高活力種子出苗快速整齊,抗逆性強(qiáng),具有明顯的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)和生產(chǎn)潛力。因此,揭示種子活力差異的機(jī)制對(duì)于高活力種子生產(chǎn)、加工具有重要的理論指導(dǎo)意義和潛在的應(yīng)用價(jià)值,對(duì)于提高我國(guó)種業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。本實(shí)驗(yàn)室前期研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)玉米果穗不同部位種子活力為中部>基部>頂部。本研究從蛋白磷酸激酶基因和磷酸化蛋白兩方面入手,對(duì)酪氨酸磷酸化調(diào)
2、控玉米果穗不同部位種子活力差異進(jìn)行初步研究。主要研究結(jié)果如下:
1.通過(guò)對(duì)吸脹24h的鄭單958上部和中部種子SDS-PAGE單向電泳結(jié)合酪氨磷酸化抗體的Western blot實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)吸脹24h種子蛋白分子量55-72KD范圍內(nèi)中部酪氨酸磷酸化蛋白表達(dá)量高于上部。
2.通過(guò)Western blot結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)發(fā)現(xiàn)了上部沒(méi)有磷酸化而中部磷酸化了的蛋白P93805,對(duì)其進(jìn)行KEGG通路分析發(fā)現(xiàn)P93805是糖酵解過(guò)程
3、中的關(guān)鍵酶葡萄糖磷酸變位酶,其磷酸化差異水平可能導(dǎo)致果穗上部和中部能量代謝差異,進(jìn)而影響種子活力。
3.利用生物信息學(xué)軟件分析酪氨酸蛋白激酶基因GRMZM2G076423啟動(dòng)子區(qū)順式作用元件,結(jié)果發(fā)現(xiàn),該啟動(dòng)子區(qū)具有光應(yīng)答、低溫應(yīng)答、脅迫應(yīng)答、與發(fā)育及激素相關(guān)的調(diào)控結(jié)構(gòu)域。預(yù)測(cè)該基因編碼377個(gè)氨基酸,蛋白質(zhì)分子量為42.28 KD,理論等電點(diǎn)為7.12。進(jìn)化分析結(jié)果表明:GRMZM2G076423編碼的蛋白與水稻中編碼酪氨酸
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