膠原纖維固化金屬離子吸附材料的制備及其對(duì)蛋白質(zhì)、酶和微生物的吸附特性研究.pdf

1、pJlr大警博士學(xué)位論文題目膠原纖維固化金屬離子吸附材料的制備及其對(duì)鱟魚巫L整絲生絲鮑叢叢監(jiān)：些塹壅一作者墮鐾蓬完成B期2QQ生2臣一專研究方向廛墨自廑垡堂壟盤鎏垡到旦授予學(xué)位B期生且旦四川大學(xué)博士學(xué)位論文白質(zhì)分子上組氨酸殘基的pKa值在55～85范圍內(nèi)。當(dāng)氯化鈉濃度為0和025M時(shí)，膠原纖維固化鐵對(duì)溶菌酶的吸附容量分別為最大和最小，這是由于金屬離子親和色譜對(duì)蛋白質(zhì)的吸附在低鹽濃度下主要通過蛋白質(zhì)與金屬離子間的螯合作用進(jìn)行，在高鹽濃度下

2、主要通過疏水作用進(jìn)行。吸附容量隨溫度和起始濃度的升高而增大，表明有化學(xué)吸附存在。當(dāng)溶菌酶的起始濃度為25mg／mL，吸附液體積為25mL，吸附劑用量為0。100g時(shí)，30“C條件下膠原纖維固化鐵對(duì)其的吸附量可達(dá)395mg／g。Langmuir方程可以很好地?cái)M合膠原纖維固化鐵對(duì)溶菌酶的吸附等溫線。當(dāng)吸附時(shí)間為8h時(shí)，基本達(dá)到吸附平衡，吸附動(dòng)力學(xué)可以用擬二級(jí)速度方程進(jìn)行擬合，計(jì)算得到的平衡吸附量與實(shí)測(cè)值吻合得很好。025mol／L氯化鈉、0

3、3mol／L咪唑和0Olmol／L磷酸緩沖液(pH6O)的混合溶液對(duì)溶菌酶的解吸效果最好，其解吸率和酶活保存率分別可達(dá)967％和941％；膠原纖維固化鐵吸附柱對(duì)溶菌酶具有良好的吸附柱動(dòng)力學(xué)特性，能將溶菌酶大大地濃縮。吸附柱可以再生和重復(fù)使用。研究了膠原纖維固化鐵對(duì)溶菌酶和白蛋白的選擇性吸附。結(jié)果表明：當(dāng)pH40時(shí)選擇性吸附白蛋白，而當(dāng)pH80時(shí)選擇性吸附溶菌酶。以膠原纖維固化鐵或固化鋯為固定床填料，研究其從蛋清粉中分離純化溶菌酶的效果。

4、結(jié)果表明：這兩種材料都能夠一步從蛋清粉中分離純化得到溶菌酶，HPLC檢測(cè)所得溶菌酶的純度均為100％。用于溶菌酶分離后，膠原纖維固化金屬離子吸附材料易于薦生。膠原纖維固化鐵固定床初次和再生后用于分離純化溶菌酶時(shí)，得率分別為705％和700％；膠原纖維固化鋯固定床初次和再生后用于分離純化溶菌酶時(shí)，得率分別為687％和684％。、研究了膠原纖維固化鐵對(duì)細(xì)菌的吸附特性，包括溫度、pH、菌齡、初始濃度和離子強(qiáng)度對(duì)吸附容量的影響，以及吸附等溫線和