毛細管區(qū)帶電泳法分離多種低分子量有機酸的研究.pdf

1、本文運用毛細管區(qū)帶電泳直接紫外檢測技術分離九種低分子量有機酸，嘗試建立一種簡單、高效、準確、穩(wěn)定地測定低分子量有機酸成分及含量的方法。通過對緩沖液種類、PH值、緩沖液濃度、電滲改性劑、有機溶劑、溫度，電壓等電泳條件優(yōu)化，確定毛細管區(qū)帶電泳直接紫外檢測分離低分子量有機酸的優(yōu)化條件如下：未涂層的毛細管50μm×60cm(有效分離長度50 cm)；分離溫度30℃；分離電壓：12kv；電極：反向；檢測波長：200nm；緩沖液：230 mmol·

2、L-1NaH2PO4/115mmol·L-1NazB4O7緩沖溶液(摩爾比2:1，PH7.49)，內(nèi)含電滲流改性劑十四烷基三甲基溴化銨(TTAB，0.5 mmol·L-1)，二次進樣之間用運行緩沖液沖洗4min。溶液進樣前用0.45μm的纖維濾膜過濾。在此條件下，甲酸、乙酸、檸檬酸、蘋果酸、乳酸、酒石酸、乳酸、富馬酸和丁二酸9種有機酸均能達到基線分離，分離度均大于1.6。且九種有機酸的線性范圍較寬，相關系數(shù)在0.9990～0.9999之

3、間，線性關系良好；各有機酸遷移時間及峰面積的RSD分別在0.1％～0.2％及2.0‰6.0％之間，回收率在94.7％～104.2％，方法具有較好的精密度和準確度。
　　 將優(yōu)化的檢測方法應用于實際體系，檢測丁二酸發(fā)酵體系中有機酸組份的回收率在95％～102.5％之間；對樣品平行測定五份，有機酸含量RSD均2％～12％之間，說明方法具有良好的準確度和重現(xiàn)性，另外對整個發(fā)酵過程進行了跟蹤監(jiān)測，丁二酸在發(fā)酵14小時后已積累11g/L。