Apocynin改善糖尿病大鼠勃起功能及其機(jī)制的研究.pdf

1、本文主要分四部分進(jìn)行了介紹：
　　第一部分
　　Apocynin對糖尿病 ED大鼠的勃起功能的作用
　　目的：探討 Apocynin對糖尿病 ED大鼠的勃起功能的作用。
　　方法：20只年齡45天的SD雄性大鼠隨機(jī)分為3組,正常對照組大鼠7只,其他13只大鼠用于糖尿病 ED大鼠模型的構(gòu)造,給予腹腔一次性注射鏈脲佐菌素(Streptozotocin, STZ)60mg/Kg的檸檬酸鈉緩沖液(50mmol/L,PH=

2、4.5),注射72小時后,利用血糖儀檢測大鼠的血糖值,隨機(jī)血糖高于16.7mmol/L被認(rèn)為糖尿病大鼠造模成功,所有大鼠均造模成功。8周后,隨機(jī)選取7只大鼠灌胃給予 Apocynin(16mg/Kg),另外6只糖尿病大鼠及正常對照組大鼠給予生理鹽水灌胃,持續(xù)4周。4周后,通過電刺激陰莖海綿體神經(jīng)誘導(dǎo)陰莖勃起,同時記錄大鼠的平均動脈壓(Mean arterial blood pressure, MAP)及海綿體壓力(Intracavern

3、osal Pressure, ICP),ICP/MAP的比值即反應(yīng)大鼠的勃起功能。
　　結(jié)果：糖尿病 ED大鼠的勃起功能明顯的低于正常對照組(P<0.05),給予 Apocynin組糖尿病 ED大鼠勃起功能明顯高于糖尿病 ED組(P<0.05)。
　　結(jié)論：Apocynin能夠改善糖尿病 ED大鼠的勃起功能。
　　第二部分
　　Apocynin對糖尿病大鼠陰莖組織中NADPH氧化酶的抑制作用
　　目的：探討

4、 Apocynin對糖尿病大鼠陰莖組織中NADPH氧化酶的抑制作用。
　　方法：通過蛋白質(zhì)印跡(Western Blot, WB)技術(shù)檢測各組大鼠陰莖海綿體組織中NADPH氧化酶亞基p47phox和p67phox蛋白表達(dá)的情況。應(yīng)用二氫吡啶(dihydropyridine, DHE)熒光探針定性檢測大鼠陰莖海綿體組織中總的活性氧表達(dá)情況。應(yīng)用硫代巴比妥酸反應(yīng)物(Thiobarbituric Acid Reactive Substa

5、nces, TBARS)法檢測脂質(zhì)過氧化物丙二醛(malondialdehyde, MDA)的表達(dá)多少來確定 ROS的多少。
　　結(jié)果：糖尿病 ED大鼠陰莖組織中p47phox和p67phox蛋白表達(dá)、ROS及MDA的表達(dá)明顯的高于正常對照組(P<0.05),給予 Apocynin組糖尿病 ED大鼠陰莖組織中p47phox和p67phox蛋白表達(dá)、ROS及MDA的表達(dá)明顯的低于糖尿病 ED組(P<0.05)。
　　結(jié)論：Ap

6、ocynin能夠通過抑制NADPH氧化酶明顯的減少 ROS的產(chǎn)生。
　　第三部分
　　Apocynin對糖尿病大鼠陰莖組織中nNOS及eNOS表達(dá)的作用
　　目的：探討 Apocynin對糖尿病大鼠陰莖組織中nNOS及eNOS表達(dá)的作用。
　　方法：通過實時熒光聚合酶鏈反應(yīng)(Real-time Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)技術(shù),WB技術(shù)檢測各組大鼠陰莖海綿體組織中nNOS及

7、eNOS基因及蛋白表達(dá)的情況。
　　結(jié)果:糖尿病 ED大鼠陰莖組織中nNOS及eNOS的基因表達(dá)及蛋白表達(dá)明顯的低于正常對照組(P<0.05),給予 Apocynin組糖尿病 ED大鼠陰莖組織中nNOS及eNOS的基因表達(dá)及蛋白表達(dá)明顯的高于糖尿病 ED組(P<0.05)。
　　結(jié)論： Apocynin能夠明顯改善糖尿病 ED大鼠陰莖海綿體組織中nNOS及eNOS的表達(dá)。
　　第四部分
　　Apocynin對糖尿

8、病大鼠陰莖組織中RhoA/ ROCK途徑的抑制作用
　　目的：探討 Apocynin對糖尿病大鼠陰莖組織中RhoA/ROCK信號途徑的抑制作用。
　　方法：通過 RT-PCR技術(shù),WB技術(shù)檢測各組大鼠陰莖海綿體組織中RhoA、ROCK1和ROCK2基因的表達(dá)情況,以及磷酸化肌球蛋白輕鏈磷酸酶(Phosphonation-myosin light chain phosphatase, p-MYPT1),細(xì)胞膜 RhoA,細(xì)胞質(zhì)

9、 RhoA,ROCK1和ROCK2蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：糖尿病 ED大鼠陰莖組織中ROCK1的基因及蛋白、p-MYPT1蛋白的表達(dá)明顯的高于正常對照組(P<0.05),RhoA、ROCK2與正常對照組及糖尿病大鼠給予Apocynin組沒有明顯的差別。給予 Apocynin組糖尿病 ED大鼠陰莖組織中ROCK1的基因及蛋白表達(dá)、p-MYPT1蛋白的表達(dá)明顯的低于糖尿病 ED組(P<0.05)。
　　結(jié)論：Apocynin