CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在PCV2持續(xù)性感染中的作用.pdf

1、豬圓環(huán)病毒2型(porcine circovirus type2，PCV2)引起的豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾?。≒CV2-associated diseases，PCVAD）是危害當(dāng)今世界養(yǎng)豬生產(chǎn)的重要傳染病之一。PCV2可以導(dǎo)致豬的免疫功能抑制并且在宿主體內(nèi)持續(xù)性感染。但目前對(duì)PCV2持續(xù)性感染的機(jī)制了解仍然不夠。CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells，Tregs)在病原微生物致病和持續(xù)性感染中發(fā)揮著雙重作用。本文

2、擬通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，分析CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的改變對(duì)機(jī)體免疫功能及病毒感染狀態(tài)的影響，詮釋CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在PCV2持續(xù)性感染中的作用。
　　將168只6周齡雌性BALB/c小鼠隨機(jī)分為4組，即空白對(duì)照組(Blank)、PCV2組(PCV2)、Foxp3-shRNA+PCV2組(shRNA+PCV2)和pcDNA3.1-Foxp3+PCV2組(Foxp3+PCV2)，每組42只。除Blank組外，其余各組均通過(guò)

3、腹腔感染1.0x105.7 TCID50PCV2;于感染前2d與感染后12d，shRNA+PCV2組和Foxp3+PCV2組分別接種表達(dá)Foxp3-shRNA和表達(dá)Foxp3的真核質(zhì)粒（100μg/只）。感染后PCV2組與Foxp3+PCV2組的Foxp3基因的平均表達(dá)量高于shRNA+PCV2和空白對(duì)照組的表達(dá)量，F(xiàn)oxp3+PCV2組肺臟內(nèi)的病毒載量高于PCV2組和shRNA+PCV2組。
　　PCV2感染后4d，CD4+和C

4、D8+T細(xì)胞的特異增殖能力均下降，F(xiàn)oxp3表達(dá)量的增加可暫時(shí)提高CD4+T細(xì)胞的特異增殖能力，但對(duì)CD8+T細(xì)胞的特異增殖能力具有長(zhǎng)期抑制作用。PCV2對(duì)CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的增殖活性影響不顯著，當(dāng)增加Foxp3的表達(dá)時(shí)，僅能短暫地提高CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的特異增殖活性。進(jìn)一步應(yīng)用ELISA檢測(cè)血清中細(xì)胞因子水平的結(jié)果顯示，PCV2感染引起IFN-γ的水平降低，F(xiàn)oxp3+PCV2組和PCV2組的IL-10、TGF

5、-β1、IL-17A濃度顯著高于空白組和shRNA+PCV2組的水平(P＜0.05)。流式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果表明，PCV2引起感染初期脾臟內(nèi)CD3+CD4+CD8-、CD3-CD4-CD8+細(xì)胞含量下降，導(dǎo)致CD3+CD4-CD8+和CD3+CD4+CD8+T細(xì)胞亞群平均含量下降，但CD4+CD25+CD127Low調(diào)節(jié)性T細(xì)胞亞群的平均含量上升。Foxp3表達(dá)量的增加可使CD3+CD4+CD8-T細(xì)胞、CD3+CD4-CD8+T細(xì)胞和CD

6、3+CD4+CD8+T細(xì)胞亞群的進(jìn)一步短暫降低。當(dāng)抑制Foxp3表達(dá)時(shí)，CD3-CD4-CD8+細(xì)胞含量則上升。
　　PCV2可以引起CD4+CD25+Tregs數(shù)量增加，促進(jìn)IL-10、TGF-β1和IL-17A的分泌;當(dāng)增加Foxp3表達(dá)量時(shí)，肺臟內(nèi)的PCV2載量升高，機(jī)體的特異和固有細(xì)胞免疫進(jìn)一步被抑制。CD4+CD25+Tregs在PCV2持續(xù)性感染過(guò)程中發(fā)揮了重要作用。該研究結(jié)果為進(jìn)一步闡明PCV2的致病機(jī)制提供了重要科