紅景天內(nèi)生真菌抑菌活性及Se4+、Pb2+對(duì)其生理活性的影響.pdf

1、紅景天（Rhodiola.L）是具有適應(yīng)原活性的珍稀藥用植物，其內(nèi)生真菌資源的研究尚屬空白。本課題通過對(duì)我國(guó)三個(gè)主要紅景天品種中獲得的168株內(nèi)生真菌為研究對(duì)象，系統(tǒng)研究它們?cè)诳咕钚?、宿主植物?duì)無機(jī)元素的吸收等方面的生物活性，理論上為探索內(nèi)生真菌在為宿主紅景天抵抗生物脅迫、對(duì)無機(jī)元素的選擇性吸收等方面的作用提供依據(jù)；實(shí)踐上為尋找抑菌活性、富集或抵抗元素吸收活性的真菌資源提供幫助。
　　在體外條件下，采用瓊脂擴(kuò)散法，以8種病原微生

2、物為指示菌，對(duì)168株紅景天內(nèi)生真菌進(jìn)行抗菌活性評(píng)價(jià)。結(jié)果表明，來自于大花紅景天(R. crenulata)的70株，庫頁紅景天(R. sachalinensis)的50株，長(zhǎng)白紅景天(R. angusta)的48株內(nèi)生真菌中，至少對(duì)一種指示菌有抑制作用的菌株分別占其總數(shù)的41.4％、17.4％、21.1％。以具有較好抑菌活性的二株真菌zpRs-S-12和Rc-R-5為研究對(duì)象，系統(tǒng)考察了它們的最佳發(fā)酵條件，結(jié)果表明，兩株菌的最佳碳源、

3、最佳氮源均分別是可溶性淀粉、酵母粉。Rc-R-5發(fā)酵液對(duì)普通變形桿菌（Proteus vulgaris）抑菌活性的最佳優(yōu)化條件為：40 mL/100 mL裝液量，6塊直徑為5 mm的接種量，25℃，pH8.0，6 d連續(xù)發(fā)酵等；zpRs-S-12發(fā)酵液對(duì)枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）的最佳優(yōu)化條件：40 mL/100 mL裝液量，4塊直徑為5 mm的接種量,20℃，pH8.0，4 d連續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)等。zpRs-S-12

4、發(fā)酵液對(duì)產(chǎn)黃青霉（Penicillium chrysogenum）的最佳優(yōu)化條件:30 mL/100 mL裝液量，4塊直徑為5 mm的接種量,20℃，pH8.0，4 d連續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)等。
　　以Pb2+和Se4+為代表，進(jìn)行了它們對(duì)zpRs-S-12和Rc-R-5抑菌活性及生理活性影響的研究。結(jié)果表明，高濃度的Se4+和Pb2+顯著抑制了zpRs-S-12和Rc-R-5抑菌活性，誘導(dǎo)菌體內(nèi)MDA含量增加，導(dǎo)致可溶性蛋白含量下降，GS

5、H、脯氨酸含量的增加，且抗氧化活性酶SOD、CAT活性也顯著增加。說明菌株在環(huán)境脅迫中產(chǎn)生的活性氧自由基，不僅會(huì)造成膜質(zhì)過氧化細(xì)胞損傷還會(huì)影響菌株的次生代謝和生長(zhǎng)發(fā)育。
　　本研究進(jìn)一步進(jìn)行了內(nèi)生真菌在紅景天對(duì) Se4+和 Pb2+為代表的無機(jī)元素吸收和脅迫時(shí)的影響。結(jié)果表明，處于Se4+環(huán)境中的組培苗與Ra-R-12和Rc-R-30互作后，信號(hào)分子 NO濃度降低時(shí)間推遲，植株 Se4+含量提高；而 Pb2+同樣條件下，信號(hào)分子