喘息患兒血清25-羥維生素D3水平測定及臨床意義.pdf

1、目的：
　　 通過對急性發(fā)作期哮喘患兒和毛細支氣管炎患兒血清25-羥維生素D3水平的測定，探討血清25-羥維生素D3水平與兒童哮喘急性發(fā)作和毛細支氣管炎的關系，為小兒喘息性疾病的治療提供新的理論和臨床依據。
　　 對象和方法
　　 一、研究對象
　　 1.哮喘組：2009年12月～2010年3月在中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院小兒呼吸內科病房住院患兒18例，符合中華兒科學會呼吸學組兒童支氣管哮喘防治常規(guī)提出的兒

2、童哮喘診斷標準，年齡10個月～5歲，平均3.12歲，其中男12例，女6例。
　　 2.毛細支氣管炎組：同期在我院小兒呼吸內科住院患兒24例，年齡2月～3歲，平均9.98月，符合第六版《兒科學》毛細支氣管炎臨床診斷標準，其中男17例，女7例，母親無吸煙史，足月兒，除外呼吸道異物、呼吸道發(fā)育異常以及支氣管淋巴結結核等所致的喘息，并除外過敏性疾病病史和相關家族史。
　　 3.對照組： 來自于同期本院小兒骨外科住院兒童20例，既

3、往無支氣管哮喘、過敏性疾病病史和相關家族史，近4周無感染史，無活動性佝僂病史，年齡8.5月～5歲，平均2.44歲，其中男10例，女10例。
　　 二、主要儀器與試劑
　　 1.儀器：離心機、-70℃冰箱、全自動洗板機、全自動酶標儀、酶聯免疫試劑盒
　　 2.試劑：25-羥維生素D3酶聯免疫試劑盒（購自大連寶晶生物技術有限公司）
　　 三、方法
　　 （一）病史采集
　　 患兒入院時詳細詢問

4、個人過敏史，家族過敏史，既往喘息史，有無感冒喘息史。
　　 （二）標本采集
　　 患兒入院時進行治療前抽取空腹靜脈血1ml，離心1000r/min×3分鐘，收集血清后置-70℃冰箱凍，健康對照組采集標本與其相同。
　　 （三）操作步驟
　　 1.取出酶標板，依照次序對應分別加入100ul的標準品于空白微孔中
　　 2.分別標記樣品編號，加入100ul樣品于空白微孔中
　　 3.在標準品孔和

5、樣品孔中加入50ul的酶標記溶液
　　 4.36±2℃孵育反應60分鐘
　　 5.洗板機清洗5次，每次靜置10-20秒
　　 6.每孔加入底物A、B液各50u1
　　 7.36±2℃下避光孵育反應15分鐘
　　 8.每孔加入50ul終止液，終止反應。
　　 （四）結果判斷
　　 （1）儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔德OD值
　　 （2）B=標準品OD值，BO=標

6、準品0點的OD值
　　 （3）B/BO％值為縱坐標，以標準品的濃度為橫坐標，在對數坐標紙上繪制標準曲線
　　 （4）在標準曲線上查找對應的濃度范圍。
　　 四、統計學分析
　　 采用SPSS軟件進行統計學分析，結果用均值±標準差表示，應用t檢驗，P<0.05有統計學意義。
　　 結 果
　　 一、哮喘急性發(fā)作期患兒血清25-羥維生素D3水平與對照組的比較
　　 哮喘患兒急性發(fā)作期血

7、清25-羥維生素D3水平明顯低于對照組，兩者比較有顯著性差異，t值為2.924，P<0.006。
　　 二、毛細支氣管炎患兒血清25-羥維生素D3水平與對照組的比較
　　 毛細支氣管炎患兒血清25-羥維生素D3水平明顯低于對照組，兩者比較有顯著性差異，t值為2.694，P<0.01
　　 三、哮喘及毛細支氣管炎患兒血清25-羥維生素D3降低者所占比率
　　 25-羥維生素D3血清正常值為11ng/ml～6

8、0ng/ml。哮喘組18例，25-羥維生素D3降低6例，占33.34％；毛細支氣管炎組24例，25-羥維生素D3降低8例，占33.34％。
　　 四、哮喘急性發(fā)作期與毛細支氣管炎患兒血清25-羥維生素D3水平的比較
　　 哮喘急性發(fā)作期與毛細支氣管炎患兒血清25-羥維生素D3水平相比沒有差異，t值為-0.297，P>0.5，兩者比較沒有顯著性差異。
　　 結 論
　　 1、哮喘患兒急性發(fā)作期血清25-OH