2型重組腺相關(guān)病毒-轉(zhuǎn)化生長因子β-,3-對實驗性肝纖維化大鼠肝臟組織膠原降解的影響.pdf

1、目的:轉(zhuǎn)化生長因子-3(TGF-3)是TGF-β家族的一員，近年來發(fā)現(xiàn)它在促進創(chuàng)面愈合和減輕瘢痕形成的過程中發(fā)揮重要作用。細胞外基質(zhì)(ECM)的沉積增多或(和)降解減少是瘢痕組織形成的中心機制。肝纖維化的形成機制與其相似，但是TGF-3的抗肝纖維化作用則未見報道。因此，本實驗通過基因轉(zhuǎn)導(dǎo)，將2型重組腺相關(guān)病毒攜帶轉(zhuǎn)化生長因子-3(rAAV2-TGF3)基因，觀察其對肝纖維化大鼠肝臟組織病理學(xué)和I型膠原、MMP-9、MMP-2和TIMP-

2、1表達的影響。
　　 方法:(1)構(gòu)建并驗證rAAV2-TGβ3。(2)實驗大鼠隨機分為四組：TGF-3干預(yù)組、模型組、正常對照組和陰性對照組。用40[％]的四氯化碳(CCl4)誘導(dǎo)大鼠肝纖維化模型。在CCl4誘導(dǎo)前一周，將rAAV2-TGFβ3注入大鼠尾靜脈，造模8周后處死大鼠，取肝臟組織做HE染色觀察肝臟組織學(xué)改變；masson染色和免疫組織化學(xué)染色觀察膠原纖維的變化和I型膠原、MMP-9、MMP-2和。TIMP-1的表達，

3、并對其陽性面積比進行半定量分析。
　　 結(jié)果:(1)HE染色：TGF-3干預(yù)組與模型組和陰性對照組相比，肝組織炎癥浸潤明顯減輕，纖維間隔增生減少。(2)masson染色：大鼠膠原纖維主要分布在血管和匯管區(qū)及狄氏間隙。正常對照組、模型組、陰性對照組和TGF-3干預(yù)組的膠原纖維含量分別為(O.017±O.015)、(O.132±O.022)、(O.123±O.015)、(O.077±O.015)。與模型組和陰性對照組比較，TGF-3

4、干預(yù)組大鼠肝臟組織內(nèi)的膠原纖維含量明顯下降(P均

5、)、(O.048±O.012)、(O.054±O.017)和(O.059±O.018)。MMP-9主要在肝細胞、血管內(nèi)皮細胞和竇狀內(nèi)皮細胞的胞漿表達。正常對照組、模型組、陰性對照組和TGF-3干預(yù)組的MMP-2含量分別為(O.006±O.003)、(O.087±O.020)、(O.069±O.025)和(O.227±O.013)。TIMP-1則主要在肝細胞、成纖維細胞、肌成纖維細胞和竇狀內(nèi)皮細胞的胞漿表達。正常對照組、模型組、陰性對照組

6、和TGF-3干預(yù)組的MMP-2含量分別為(O.003±O.001)、(O.063±O.014)、(O.075±O.021)和(O.035±O.012)。與模型組和陰性對照組比較，TGF-3干預(yù)組大鼠肝臟組織內(nèi)的I型膠原、TIMP-1表達明顯下降(P均　　 結(jié)論：rAAV2-TGFβ3通過抑制大鼠肝組織內(nèi)I型膠原和TIMP-1的表達