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文檔簡介
1、為了探討不同劑量飲酒影響胰島素敏感性的分子機(jī)理,該研究擬以整體動物實驗結(jié)合體外原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng),從細(xì)胞和分子水平探討酒精作用下的骨骼肌細(xì)胞IRS-1mRNA表達(dá)水平變化在酒精影響的胰島素敏感性改變中的作用,為進(jìn)一步的機(jī)理研究提供參考.研究方法:該研究整體實驗中以Wistar大鼠為研究對象,以灌胃方式給予不同劑量酒精建立飲酒模型,設(shè)立對照組及低、中、高劑量酒精攝入組,酒精劑量分別為0、0.6、0.8和3.0 ml·(kg·bw)<'-1
2、>·day<'-1>,每日一次通過灌胃方式給予.13周后處死大鼠,收集血液,分離血清,測定空腹血糖和空腹血胰島素,并在此基礎(chǔ)上計算胰島素抵抗指數(shù),作為反映胰島素敏感性的指標(biāo).分離大鼠骨骼肌組織,提取組織總RNA,通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)測定骨骼肌IRS-1mRNA的表達(dá)水平,從而觀察酒精對大鼠胰島素敏感性的影響,以及酒精劑量與骨骼肌IRS-1mRNA表達(dá)水平及HOMA-IR之間的關(guān)系,探討酒精是否影響骨骼肌IRS-1mR
3、NA表達(dá)水平,這一變化與酒精引起的胰島素敏感性改變的關(guān)系.為了驗證酒精是否對骨骼肌細(xì)胞IRS-1mRNA表達(dá)有直接影響,以體外原代培養(yǎng)大鼠骨骼肌細(xì)胞為研究對象,用含不同濃度酒精的培養(yǎng)基培養(yǎng),于不同時間收集細(xì)胞,提取總RNA,通過RT-PCR方法測定各組骨骼肌細(xì)胞IRS-1mRNA表達(dá)水平的變化.觀察不同濃度酒精對骨骼肌細(xì)胞IRS-1mRNA表達(dá)的影響及與酒精的劑量關(guān)系.結(jié)論:長期適量飲酒可以增強(qiáng)胰島素敏感性,升高骨骼肌細(xì)胞IRS-1mR
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